猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达

本研究扩增猪轮状病毒中国分离株 JL94株VP4蛋白主要抗原编码区基因(1 756 bp),将测序结果与国外分离株进行比较;将该基因片段同载体pMel BacA连接后,与杆状病毒DNA共转染入昆虫细胞Sf9,经蚀斑筛选纯化重组病毒并再感染Sf9细胞获得 vp4 基因的表达,对表达的 VP4 蛋白进行 Western blot分析和血清中和抗体试验。结果表明:JL94株VP4主要抗原编码区基因与国外分离株 CRW 8 株、Gottfried株该基因片段氨基酸同源性分别为96.43%和67%,说明 JL94株与 CRW 8 株属同一 VP4 血清型,而与 Gottfried株属不同血清型。JL94 株VP4主要抗原编码区氨基酸最大变异处位于 aa81 aa207。vp4 基因在昆虫细胞中表达量占细胞总蛋白的 20%,Western Blot证实表达蛋白有良好的生物学活性。所表达的蛋白免疫小鼠产生中和抗体,阻断 JL94 在 MA104 细胞上引起的细胞病变。

巨细胞病毒UL97/UL54基因突变与抗病毒药物的相关性

巨细胞病毒(CMV)感染一般不引起人体明显的临床表现,但对骨髓移植和实体器官移植及艾滋病病人而言,却是引起发病和死亡的主要原因之一。抗病毒药物治疗严重CMV感染需延长疗程,这往往会促使CMV UL97/UL54基因突变,导致病毒对药物产生抗性,给治疗带来困难。本文从分子和基因水平对近年来有关CMV UL97/UL54基因突变与抗病毒药物相关性的研究进展予以综述。