枳实对大鼠胃肠电活动影响的初步研究

目的 :研究枳实对大鼠胃肠移行性综合肌电 (MMC)的影响及其与P物质的关系。方法 :采用电生理学和免疫组织化学方法 ,观察枳实灌胃前后大鼠胃肠电活动及P物质含量的变化。结果 :浓缩枳实液可使大鼠胃肠MMC活动相时程与周期比值 (A/T)增大 ,胃肠肌间神经丛内P物质增多。结论 :枳实对大鼠胃肠MMC具有兴奋效应并可能与P物质有关。

组胺受体在枳实调节小鼠小肠运动中的作用

目的 :探讨枳实调节胃肠功能的作用机制。方法 :采用活性碳末指示法 ,以小鼠在灌服不同药物一定时间后小肠碳末推进率为指标分析小肠的运动功能。结果 :灌服枳实煎液可明显提高小鼠小肠碳末推进率 ,此效应可被H1受体拮抗剂苯海拉明阻断而不能被H2 受体拮抗剂西米替丁阻断。结论 :枳实增强小肠运动功能的作用与H1受体有关。

甘草对大鼠小肠动力功能影响的实验研究

目的初步探讨甘草对大鼠小肠动力的作用,及其作用与胃肠激素的相关性。方法观察甘草组与空白组移行性综肌电(MMC)周期持续时间、Ⅲ相持续时间、Ⅲ相每分钟快波数(FM)和每簇的快波数(FC)的变化;采用免疫组织化学法结合显微图像定量分析扫描系统检测十二指肠、空肠嗜铬细胞及其肌间神经丛中5羟色胺(5HT)、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)的相对含量。结果①甘草组与空白组比较MMCⅢ相FM和FC明显减少,MMC周期明显延长,Ⅲ相持续时间明显缩短,统计有显著性差异(P<0.05)。②甘草组十二指肠、空肠粘膜及肌间神经丛内5HT表达明显较空白组减少,比较有显著性差异,小肠粘膜无明显SP、VIP阳性免疫反映物表达,但小肠肌间神经丛内SP含量明显减少、VIP含量明显增加,组间比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论甘草对大鼠小肠动力有抑制作用,这种抑制作用与5HT、SP、VIP分泌失调密切相关。

氧化苦参碱抑制子宫内膜癌细胞株Ishikawa的实验研究

目的:观察不同浓度氧化苦参碱(oxymatrine,Oxy)对人子宫内膜癌细胞株Ishikawa增殖抑制及诱导凋亡作用。方法:培养人子宫内膜癌细胞株Ishikawa,通过细胞形态学观察、CCK-8比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期人工重组基底膜侵袭小室(transwell)观察细胞的侵袭力。结果:Oxy明显抑制Ishikawa增殖,并呈时效和量效关系,24h、48h、72h的IC50分别为8.07,4.62,3.22mg/ml;细胞周期发生明显改变。随着药物浓度增高,G1期细胞比例增加,S期细胞减少;流式细胞仪可检测到细胞凋亡现象,当Oxy浓度为10mg/ml时,细胞凋亡率65.4%;荧光显微镜可见细胞凋亡形态学变化;Ishikawa细胞侵袭基底膜的能力明显被抑制。结论:Oxy可抑制Ishikawa增殖,诱导Ishikawa细胞凋亡,有可能成为治疗子宫内膜癌的有效药物。

地龙2号对大鼠肝纤维化TGF-β1,MMP-13及TIMP-1 mRNA和蛋白表达的影响

目的:研究蚯蚓提取物地龙2号对实验性肝纤维化大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1),基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA和蛋白表达的影响.方法:采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型.古Wistar大鼠52只随机分成6组:正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和小剂量组;8wk末,用免疫组织化学染色法及RT-PCR检测肝组织中TGF-β1,MMP-13,TIMP-1mRNA和蛋白的表达.结果:地龙2号大、小剂量组肝组织内TGF-β1及TIMP-1mRNA(TGF-β1:0.68±0.16vs0.90±0.29.0.66±0.14vs0.90±0.29,后者P<0.05;TIMP-1:1.01±0.22vs2,48±1.18,1.21±0.38vs2.48±1.18,P<0.01)及蛋白表达均显著低于模型组(TGF-β1:3.14±2.67vs8.22±2.99.3.60±1.90vs8.22±2.99,P<0.01;TIMP-1:3.57±2.23vs7.56±3.40,3.30±2.67vs7.56±3.40,P<0.01),而MMP-13mRNA(1.69±0.75vs0.62±0.21,1.82±0.71vs0.62±0.21,P<0.01)及蛋白表达则明显高于模型组(7.71±1.25vs4.67±2.45,P<0.01,8.50±2.88vs4.67±2.45.P<0.01).结论:地龙2号可下调TGF-β1,TIMP-1mRNA及蛋白的表达,并上调MMP-13mRNA及蛋白的表达,从而抑制或减轻肝纤维化的形成.

通腑汤对胃肠动力障碍大鼠小肠肌间神经丛中5-HT、SP和VIP含量的影响

目的 :探讨通腑汤的药物作用及作用机制。方法 :用甘草灌胃建立胃肠动力障碍动物模型 ;观察通腑汤对大鼠十二指肠、空肠肌间神经丛中 5 羟色胺 (5 HT)、P 物质 (SP)和血管活性肠肽 (VIP)含量的影响。结果 :与模型组比较 ,经通腑汤治疗 6d后十二指肠肌间神经丛内 5 HT、SP和VIP含量有显著性差异 ,5 HT、SP含量明显增加 ,VIP含量明显减少。结论 :通腑汤可纠治甘草引起的胃肠动力障碍 ,使 5 HT、SP、VIP的分泌恢复正常 ,说明通腑汤的药物作用机制与 5 HT、SP和VIP的分泌密切相关。

P物质对哮喘大鼠神经内分泌功能的调节

目的探讨哮喘大鼠脑内P物质在哮喘发作中的作用。方法以大鼠腹腔注射含百日咳和氢氧化铝的卵蛋白溶液制备哮喘动物模型,免疫组织化学方法(SABC)检测哮喘大鼠脑内c-fos蛋白,放射免疫法检测下丘脑室旁核(para-ventricular nucleus,PVN)内P物质(substance P,SP)的含量及正中隆起(ME)中促肾上腺皮质激素释放激素(cortico-tropin-releasing hormone,CRH)和外周血中促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、皮质酮(corticoster-one,CORT)含量,PVN内分别微量注射外源性SP、SP受体拮抗剂S0145,观察其对哮喘大鼠肺功能与下丘脑-垂体-肾上腺皮质功能轴(hypothalamus-pituitary-adrenal axis,HPA轴)活动的影响。结果哮喘大鼠发作时PVN内SP含量升高;正中隆起CRH与外周血中ACTH、CORT含量均降低(P<0.05),呼/吸时程比和气道阻力增加,膈肌放电积分、肺顺应性减小(P<0.01)。PVN内微量注射SP后哮喘大鼠的肺通气功能进一步下降,CORT、ACTH、CRH含量进一步降低(P<0.01)。SP受体阻断剂S0145则可逆转哮喘发生时大鼠肺功能与HPA轴的改变。结论哮喘大鼠下丘脑室旁核内SP可影响HPA轴的功能,参与哮喘发作。

华蟾素对子宫内膜癌Ishikawa细胞RRM2表达的影响和意义

目的:探讨华蟾素对体外培养的子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭力及其对RRM2表达的影响和意义。方法:体外培养Ishikawa细胞,经不同浓度华蟾素干预后,用RT-PCR及Western blot分别检测RRM2在mRNA及蛋白水平上的表达,用MTT法检测处理前后细胞的增殖,transwell小室分析细胞体外的侵袭力。结果:华蟾素能显著减少RRM2在mRNA及蛋白水平的表达,有效地抑制Ishikawa细胞增殖,降低侵袭力,研究证实华蟾素终浓度3.0mg/ml是最佳抑制浓度,对照组Ishikawa细胞组则无上述效应。结论:华蟾素可明显降低Ishikawa细胞中RRM2表达,抑制细胞增殖,降低细胞侵袭力。

杏仁核参与大鼠哮喘发作及其机制探讨

为探讨杏仁核是否参与大鼠哮喘发作及其机制,采用卵蛋白致敏哮喘大鼠模型,运用WGA-HRP逆行追踪与免疫组织化学染色相结合的双重标记方法,在光镜下观察向下丘脑室旁核(PVN)发出投射的杏仁核神经元内Fos蛋白的表达情况。结果显示:杏仁核内可观察到三种阳性细胞,即HRP逆标神经元、Fos阳性神经元和HRP/Fos双标神经元。Fos阳性细胞呈双侧分布,主要分布在杏仁核的内侧亚核(MeA)和中央亚核(CeA);HRP逆标神经元和HRP/Fos双标神经元分布在注射区同侧的内侧杏仁核,内侧杏仁核内HRP/Fos双标神经元占HRP单标神经元的33.55%。本研究结果提示,哮喘大鼠发作时,杏仁核、下丘脑室旁核的神经元兴奋,且杏仁核到下丘脑室旁核的直接投射可能参与了哮喘发作的调控。

胆囊收缩素对消化功能的影响及其相关机制

胆囊收缩素 (CCK)是一种脑肠肽 ,作为胃肠激素和神经肽 ,其分布广泛 ,通过受体介导多种重要的生理功能。CCK受体激动剂与拮抗剂的研究深入 ,促进了人们对CCK生理功能的深入认识。CCK通过内分泌、旁分泌、神经分泌、自分泌等途径发挥生理作用。作者从CCK与胃肠运动、胰液分泌、胃酸分泌、胰腺生长的关系以及CCK作为肠抑胃素、饱因子6个方面综述CCK对消化功能的影响及其相关机制。

胞外组蛋白—一种新发现的内源性损伤相关分子模式分子

核内染色质成分组蛋白释放至细胞外便成为胞外组蛋白。最近证实胞外组蛋白是一种内源性损伤相关分子模式(DAMP)分子,能诱导组织细胞尤其是血管内皮细胞损伤、激活白细胞和血小板、促进异常凝血过程与血栓形成、直接或间接造成炎症反应与免疫反应,导致多器官功能障碍综合征(MODS)。抗组蛋白抗体、激活蛋白C(APC)、C反应蛋白(CRP)可拮抗胞外组蛋白细胞毒性作用。

哮喘豚鼠脑内组胺含量的变化及中枢组胺H_3受体的调节作用

目的 检测豚鼠哮喘急性发作时脑内组胺含量的变化 ,观察中枢组胺H3受体在哮喘未发作时对脑内组胺含量的影响。方法 哮喘急性发作组豚鼠给予腹腔注射卵蛋白致敏 ;阴性对照组豚鼠给予腹腔注射等量生理盐水 ;THIO组豚鼠在哮喘未发作期侧脑室内注射H3受体拮抗剂thioperamide (2 0 μg) ;生理盐水组豚鼠在哮喘未发作期侧脑室内注射等量生理盐水。断头处死动物后 ,在冰台上迅速分离出下丘脑、大脑皮质和海马 ,称重 ,匀浆 ,荧光法测定组胺含量。结果 哮喘急性发作组 ,下丘脑和大脑皮质中的组胺含量高于阴性对照组 ,差异有显著意义 (P <0 0 1) ;海马内组胺含量差异无显著意义 (P >0 0 5 )。哮喘未发作期侧脑室注射thioperamide后 ,下丘脑和大脑皮质中的组胺含量均升高 ,与生理盐水组比较差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ,海马内组胺含量无显著变化 (P >0 .0 5 )。结论 中枢组胺含量与哮喘发作有关 。

先天性感音神经性聋与内耳免疫

先天性感音神经性聋占先天性聋的很大比例 ,对其探索和研究工作具有重要的临床意义。作者主要就母体自身免疫对子代影响的相关性研究及其与先天性感音神经性聋及内耳免疫的关系进行综述。

一氧化氮在家兔脑室注射P物质引起心血管效应中的作用

目的 :探讨脑内P物质 (SP)的心血管效应与一氧化氮 (NO)的关系。方法 :家兔 18只 ,乌拉坦静脉麻醉 ,侧脑室注射SP(n =9) ,对照组注射人工脑脊液。记录给药前后平均动脉血压 (MAP)、左室收缩压 (LVSP)、左心室舒张末期压 (LVEDP)、心室内压最大上升速率 (+dp/dtmax)和下降速率 (-dp/dtmax)、心肌收缩成分实测最大缩短速度 (Vpm)、心率 (HR)。硝酸还原酶法测定家兔脑室注射SP(7 46nmol)前、后脑脊液中NO的含量。结果 :与对照组比较 ,侧脑室注射SP可引起MAP、HR、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax和Vpm的值明显增加 (P <0 0 5 ) ,小脑延髓池脑脊液中NO的含量显著降低 (P <0 0 0 1)。结论 :(1)脑内SP可增强麻醉家兔心脏的收缩功能 ,并能升高动脉血压。 (2 )脑内SP引起的心血管效应伴有NO的减少。

雌激素对大鼠急性哮喘模型呼吸力学影响的实验研究

目的观察雌激素对实验动物哮喘模型干预后的呼吸力学改变，探讨雌激素对急性哮喘的影响。方法雄性Wister大鼠24只，6—8周龄，体重120～160g。随机分为哮喘模型组（A组）、雌激素干预组（B组）和正常对照组（C组），每组8只。A、B组分别于第1、8天腹腔注射致敏悬液10％卵白蛋白1ml，第15天开始以1％卵蛋白超声雾化激发，30min·d^-1，共7d，建立急性哮喘模型。C组操作同前，但以生理盐水代替卵蛋白。从第15天开始，A组每次激发前1h腹腔注射生理盐水1 ml，共7d；B组每次激发前1h予腹腔注射17毋雌二醇30μg·kg^-1。（1 ml），共7d；C组每次生理盐水雾化之前1h予生理盐水1 ml腹腔注射。各组于第21天麻醉后行气管插管，进行肺功能测定。测定肺潮气量（Vt）、呼吸频率（F），并计算肺动态顺应性（Cdyn）和肺阻力（RL），所得结果进行统计学分析。结果3组大鼠肺功能检测结果显示，A组和C组比较，大鼠的Vt、F、RL、Cdyn均有显著性差异（P〈0．01）；A组和B组比较，Cdyn无显著性差异（P〉0．05），其余指标有显著性差异（P〈0．01）；B组和C组比较C。有显著性差异（P〈0．05）。结论雌激素能明显降低大鼠哮喘模型的气道阻力，改善其肺动态顺应性。

癌基因TRE17与肌钙蛋白C2相互作用的鉴定

目的:寻找癌基因TRE17的结合蛋白。方法:分别构建了TRE17/PGBKT7和TRE17(447)／PGBKT7诱饵质粒,用酵母双杂交技术筛选了人骨骼肌CDNA表达文库,并用GST-PULLDOWN分析进一步观察了癌基因TRE17与其结合蛋白之间的作用。结果:酵母双杂交分析提示,癌基因TRE17可能结合6种靶蛋白,包括PUR ALPHA、肌球蛋白轻链2、乳酸脱氢酶A和肌钙蛋白C2等,其中,仅肌钙蛋白C2能够既结合全长的癌基因TRE17,又结合仅编码TRE17 氨基端447个氨基酸的TRE17(447)。GST-PULLDOWN分析表明FRE17(447)明显结合肌钙蛋白C2,而不是阴性对照 GST。结论:肌钙蛋白C2能特异性结合癌基因TRE17,为进一步研究TRE17的恶性转化机制提供了新的线索。

哮喘大鼠脑内小胶质细胞激活的时程及形态变化研究

为探讨哮喘大鼠在连续激发不同阶段脑内小胶质细胞激活的时程及形态变化,本实验取健康雄性SD大鼠制备哮喘模型并诱发哮喘发作。48只SD大鼠随机分为对照组和实验组。对照组分为正常组和生理盐水组(n=8);实验组根据造模期间连续抗原激发的时间不同,分为连续激发3,7,14,21d组(n=8)。各组大鼠均进行呼吸功能检测、肺组织切片HE染色及脑组织抗OX-42免疫组织化学染色。结果显示:与对照组大鼠比较,实验组中各组大鼠呼吸功能各项指标均明显加重;肺组织病变程度逐渐增加;小胶质细胞由静息状态转变为激活状态,且数量明显增多。以上结果提示:哮喘大鼠脑内小胶质细胞被激活,在一定时间内小胶质细胞激活的程度随呼吸功能的降低及肺组织病变程度的增加而增加。

白细胞介素-10与哮喘炎症发生的研究进展

气道慢性炎症是变应性哮喘的基本特征 ,也是气道高反应性发生的病理基础。辅助性T淋巴细胞 (Th细胞 )之Th1细胞因子释放减少、Th2细胞因子上调表达导致体液免疫应答过强 ,是诱发慢性气道炎症的关键因素。白细胞介素 10具有抑制多种细胞 (Th1、Th2、单核巨噬细胞 )合成释放促炎性细胞因子的功能 ,并且参与气道高反应性的形成 ,其产生也受到炎性介质组胺等细胞因子外因素的调节。

组胺调节胃肠功能的机制

目前已发现 3种组胺受体 :H1 R、H2 R和H3 R。组胺与细胞膜上相应受体结合 ,可影响细胞膜的离子通透性及细胞内的代谢过程 ,进而调节靶细胞的功能。现就组胺通过 3种组胺受体调节胃肠功能的机制作一综述。

钾通道KCNQ1在大鼠胰腺发育过程中的表达

目的分析钾通道KCNQ1在不同发育阶段大鼠胰腺以及成年大鼠胰岛中的表达情况,为探悉其在胰腺B细胞发育及功能中可能的作用提供实验依据。方法采用高密度寡核苷酸芯片对胚胎第12.5天(E12.5)、E15.5、E18.5、新生和成年大鼠胰腺进行基因转录水平分析,并用RT-PCR对KCNQ1通道亚基在上述5个时期大鼠胰腺以及成年大鼠胰岛中的表达进行验证和分析。结果与胰腺内分泌细胞分化、成熟有关的转录因子分别于E15.5、E18.5达到表达高峰;E18.5胰腺中B细胞功能成熟标志基因的表达显著增加,而KCNQ1钾离子通道的编码基因KCNQ1及KCNE1此时才出现表达。成年胰腺及胰岛中均具有多种KCNQ1通道亚基的表达。结论 KCNQ1通道的表达出现于胰腺发育后期内分泌细胞功能逐渐成熟阶段,在成年胰岛中亦具有较高表达水平,提示KCNQ1通道可能表达于成熟B细胞并参与其内分泌功能。