南京地区戊型肝炎病毒基因型鉴定和变异分析

为了解南京地区戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)基因型的分布以及变异状况,本研究采用逆转录套式聚合酶反应(RT-nPCR)的方法检测南京地区40份急性散发性戊型肝炎患者的粪便标本,对PCR产物进行测序,利用生物信息学软件比较核苷酸的同源性、遗传距离,进行基因分型和变异分析。40份粪便标本中检测到14份阳性HEV、RNA,检出率为35%,基因分型均为HEV IV型,且分属2个不同的亚型;利用生物信息学软件对国内I型和IV型毒株加以比较,发现HEV IV型毒株比I型变异程度高,不同年份的HEV IV型毒株变异更大,有新的亚型出现,且变异有随时间推移而增大的趋势。

慢性丙型肝炎患者血清抗-HCV及HCVRNA水平与病情的关系研究

目的探讨慢性丙型肝炎患者血清抗-HCV水平和HCVRNA含量与病情的关系。方法应用微粒子发光法检测抗-HCV水平,应用荧光定量PCR技术检测HCVRNA含量,并与病情进行相关性分析。结果血清抗-HCV水平>100S/CO时,HCVRNA含量较高,且大多数患者血清ALT升高;当HCVRNA含量较高时,抗-HCV水平及ALT同步异常。结论HCVRNA含量与抗-HCV水平在一定程度上均能反映HCV的复制情况,且与病情密切相关,应同步检测。

慢性HBV感染ALT持续正常与肝损伤的关系及其相关因素分析

目的评估ALT持续正常的慢性HBV感染者(PNA)的肝脏损伤情况,探讨与其损伤相关的因素,为临床正确及时处理此类患者提供参考。方法对符合研究标准的160名慢乙肝患者,包括血清ALT水平持续正常的53例患者,按ALT水平分成4组,检测相关生化免疫等指标,同时做肝病理穿刺,分析与肝损伤相关的因素。结果37.7%的PNA患者有S2及以上等级的纤维化,45.3%的PNA患者有G2及以上等级的炎症水平。年龄越大,ALT水平越高,更高水平的HBVDNA载量,有更严重的肝损伤。结论53例PNA患者中,43.4%有明显纤维化或明显炎症,对于PNA的慢乙肝患者,大于40岁、ALT>25u/L、HBVDNA定量>104/mL,尤其是男性患者,应考虑肝穿刺以证实是否有肝损伤。

乙型肝炎患者HBV抗体阳性模式与HBV DNA含量的相关分析

目的:探讨乙型肝炎患者HBV抗体阳性模式与HBV DNA含量的相关关系。方法:采用乙肝患者入院时第一份血清,同步进行HBV标志物(HBVM)、HBV DNA含量和肝功能检测,对其中96例HBV抗体阳性的病例进行综合分析。结果:HBsAg/HBeAb/HBcAb组和HBsAg/HBcAb组的HBV DNA含量显著高于HBsAb/HBeAb/HBcAb组和HBcAb组(P<0.01)。按临床分型,HBV DNA阳性率为HLC(85.0%)>CH(76.5%)>AH(12.5％)。结论:乙肝患者血清HBV抗体阳性并不表示体内病毒复制停止而无传染性,多数患者体内HBV DNA呈低水平持续复制,部分患者仍保持较高的复制水平。本文结果提示,慢性持续感染者体内病毒复制活跃与机体免疫功能紊乱或功能低下,不能清除病毒有关。部分HBeAb阳性患者HBV DNA持续复制,可能与HBV基因变异有关。

圭亚那乔治敦市居民粪便寄生虫感染调查

目的介绍南美洲圭亚那(Guyana,South Am erica)乔治敦市居民肠道寄生虫感染情况。方法1%卢戈碘液染色直接涂片检查。结果5 200例患者粪便寄生虫感染率6.54%,常见寄生虫感染:钩虫2.33%(121/5 200);蓝氏贾第鞭毛虫1.65%(86/5 200);蛔虫0.75%(39/5 200);鞭虫0.69%(36/5 200);溶组织阿米巴0.42%(22/5 200)。结论乔治敦地区居民中肠道寄生虫感染率较高。

用不同基因型戊型肝炎病毒重组蛋白建立酶联免疫吸附测定一步法

目的以7种不同基因型和亚型的HEV重组蛋白作为包被抗原，建立HEV抗体检测EuSA一步法。方法通过方阵滴定法确定包被抗原浓度，确定临界值，并进行敏感度、特异度和热稳定性试验。结果7种重组抗原混合物（Mix166）最佳包被浓度为1．5mg／L。抗-HEV IgG检测试剂的批内、批间变异系数分别为8．67％和10．85％，抗一HEV IgM检测试剂的批内、批间变异系数分别为4．56％和5．99％。一步法检测50份HEV RNA阳性血清的HEV IgG和HEV IgM抗体，阳性率均为94％。一步法检测674份健康者血清，52份抗-HEVIgG阳性．3份抗HEV IgM阳性。一步法检测HEV墨西哥株攻击黑猩猩后收集的系列血清发现，病毒攻击后1～6周抗-HEVIgM阳性，2～76周抗-HEV IgG阳性，而进口试剂盒缺乏对抗-HEV墨西哥株IgG、IgM的反应性。结论Mix166作为包被抗原建立的HEV抗体ELISA一步法具有较好的敏感性和特异性，可用于HEV感染的诊断。

唾液抗戊型肝炎病毒IgM用于戊型肝炎诊断的探讨

目的应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测唾液中抗戊型肝炎病毒(HEV)-IgM,评价其用于戊型肝炎早期诊断的可行性。方法应用东南大学基因工程疫苗研究所建立的HEV-IgM抗体ELISA检测方法,检测77例急性戊型肝炎患者、63例非戊型肝炎患者及64例正常人的唾液和血清样本中抗HEV-IgM,将唾液和血清两者的检测结果加以比较,并观察标本采集时间对检测结果的影响。结果77份急性戊型肝炎患者血清与唾液抗HEV-IgM阳性符合率为87%;在64份正常对照组及63份其他患者对照组中,血清与唾液抗HEV-IgM均阴性,阴性符合率为100%。标本采集时间对唾液和血清检测结果的相关性无显著影响。结论唾液标本用于抗HEV-IgM检测,特异性好,敏感性较高,具有无创伤、容易采集、操作简便等优点,在特殊情况下可代替血清用于戊型肝炎的诊断,尤其适用于戊型肝炎流行时HEV近期感染的血清流行病学调查。