系统解剖学与组织胚胎学交叉融合教学改革的初步探讨

目的 :通过教学改革的分步实施 ,达到人体系统解剖学与组织胚胎学学科的实质性交叉融合 ,初步改变传统的系统解剖学与组织胚胎学分开教学 ,互不联系的格局。方法 :采用大小班理论教学和分别实验的教学方法对呼吸、泌尿系统进行了包括教学内容的研究、集体备课、课前预讲试讲、课堂讲授、教师和学生的问卷调查、讨论分析等步骤进行教学改革。结果 :通过两个系统的交叉融合教学探索 ,使人体形态学大体与微细的教学内容得到了较好的有机结合 ,对今后全面实施教学内容的融合 ,提高医学生人体形态学的基本理论、基本技能探索一种新的教学。结论 :人体系统解剖学与组织胚胎学教学的实质性交叉融合是可行的 。

局灶性脑缺血大鼠学习记忆能力与海马齿状回nNOS表达的关系

目的观察局灶性脑缺血再灌注大鼠学习记忆与海马齿状回神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的关系。方法大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,5溴脱氧尿核苷(BrdU)标记分裂增殖细胞,应用Y型电迷宫监测大鼠学习记忆能力,免疫组化单标和双标技术检测大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数和nNOS的表达。结果局灶性脑缺血再灌注对学习记忆能力损害明显,但随着再灌注时间的延长学习记忆能力有较好恢复,再灌注28d恢复明显。海马齿状回BrdU阳性细胞增加,14d达高峰;再灌注后7dnNOS表达增强,28d达高峰,BrdUnNOS双标细胞在14d达高峰。结论局灶性脑缺血再灌注可增强大鼠海马齿状回细胞的增殖能力,增殖细胞nNOS的表达对大鼠学习记忆能力恢复有促进作用。

胚胎大鼠大脑额叶皮质神经干细胞的分离、培养与鉴定

目的:探讨从胚胎大鼠大脑额叶皮质分离培养神经干细胞(neural stem cell,NSCs)的方法及NSCS的特性。方法:将14.5 d胎龄的大鼠额叶皮质脑组织制备成单细胞悬液,于含EGF和bFGF的DMEM/F12无血清培养液中培养,形成原代细胞球后,进行单细胞克隆传代扩增。免疫荧光组化方法检测克隆球Nestin、Map-2、GFAP抗体标记情况。结果:原代培养2周后,可形成大量悬浮生长的神经球,B rdU和Nestin检测呈阳性,诱导分化后呈Map-2、GFAP阳性。结论:可从胚鼠脑皮质中分离培养纯化、扩增传代获得NSCs,经诱导后可以分化为神经元和星形胶质细胞,可作为细胞替代治疗中枢神经系统疾病的供体来源。

研究生局部解剖学教学改革的实践与研究

目的 :提高局部解剖学教学效果 ,使研究生能掌握好基本的技能 ,为临床手术打下良好的基础。方法 :①采用以研究生为主体 ,教师指导为辅的模式进行教学 ;②结合专业 ,侧重解剖 ,使研究生对除自己解剖的局部以外的各局部都有较好的学习机会 ;③注重动手实践能力、分析和解决问题的能力的培养 ;④通过提问、演讲和示范解剖操作过程 ,将局解理论与临床手术应用有机结合 ;⑤鼓励具有手术经验的研究生结合临床在尸体上演示一些难度较大的手术方法 ;⑥改进考试方法 ,把考试分成理论考试、解剖操作技能考核和标本考试三部分 ,较好地反映研究生的综合素质能力和学习的真实水平。结果 :教学改革使研究生局部解剖学的教学收得了很好的效果。结论

成年和老年大鼠局灶性脑缺血后室管膜下区细胞增殖的比较研究

目的 :比较老年和成年大鼠局灶性脑缺血后室管膜下区 (thesubventricularzone ,SVZ)神经干细胞的增殖情况。方法 :制作大脑中动脉梗塞模型 ,用免疫组织化学方法动态检测室管膜下区 5 溴脱氧尿嘧啶 (bromodeoxyuridine ,BrdU)标记的阳性细胞数的变化。结果 :正常组和假手术组成年大鼠SVZ的BrdU阳性细胞明显多于老年大鼠。实验组成年和老年大鼠SVZ的BrdU阳性细胞均在缺血后 3d开始增加 ,7d时达到高峰 ,2 8d时仍高于正常水平 ,且成年大鼠各时间点SVZ的BrdU阳性细胞均明显高于老年大鼠。结论 :大鼠脑缺血激活SVZ神经干细胞增殖 。

DNFmRNA、GFR-_α1mRNA在不同年龄大鼠SVZ和海马表达的变化及其意义

目的:观察不同年龄SD大鼠脑室管膜下区(SVZ)和海马GDNFmRNA及其受体GFR- α1mRNA表达水平的变化,探讨其在神经发生及脑老化中的作用。方法:用RT PCR方法检测胚胎18d、新生以及1、3、8、12月龄SD大鼠SVZ和海马GDNFmRNA及其受体GFR -α1mRNA的变化。结果:随着年龄增长,SD大鼠SVZ和海马GDNFmRNA及其受体GFR- α1mRNA表达水平逐渐降低。且各年龄组海马表达参数的幅度小于SVZ。结论:GDNF及其受体GFR- α1在神经发育及脑老化进程中起到一定的作用。

CEPO经Mash1信号促进大鼠局部脑缺血后纹状体内神经发生

为检测氨甲酰化促红细胞生成素(CEPO)在大鼠脑缺血后发生过程中的作用及其相关信号通路,本实验将成年大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后立即尾静脉给予CEPO(50μg/kg)。结果显示:CEPO可显著降低大鼠MCAO后3d梗塞面积,增加缺血侧神经干细胞增殖、促进神经干细胞分化成为神经元。CEPO的促神经发生效应与缺血侧纹状体内前神经元bHLH转录因子Mash1的表达上调密切相关。本结果提示CEPO对脑缺血具有神经保护作用,Mash1信号在缺血侧纹状体内可能介导CEPO增强的神经发生和神经元分化效应。

He-Ne激光与超短波治疗小儿急性支气管炎临床观察

目的 探讨He Ne激光与超短波治疗小儿急性支气管炎的疗效。方法 对 2 94例患儿随机分为He Ne激光组、超短波组和两者联合治疗之综合组分别进行治疗。结果 激光组与超短波组疗效比较 ,差异无显著意义 (χ2 =0 .71,P >0 .0 5 ) ;而综合组与前两组疗效比较 ,差异有极显著意义 (χ21=6.67,χ22 =10 .89,P <0 .0 1)。结论 He Ne激光与超短波联合治疗组疗效好 ,患儿易于接受 ,并颇受家长欢迎。

含未甲基化CpG寡脱氧核苷酸对人外周血树突状细胞抗肿瘤作用的影响

目的 :研究含未甲基化CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对人外周血树突状细胞 (dendriticcells ,DC)分化、成熟及其抗肿瘤作用的影响。方法 :分离正常人外周血DC ,透射电镜观察CpGODN刺激组和未刺激组DC的超微结构 ,流式细胞仪分析其表面HLA DR、CD86的表达 ,MTT法检测其对同种异体混合淋巴细胞反应 (mixed lymphocytereactor ,MLR)中T细胞增殖的影响及调节T细胞杀伤肿瘤的能力。结果 :与未刺激组相比 ,CpGODN刺激组DC表面突起细、长且规则 ,粗面内质网增多 ,空泡减少甚至消失 ;同时DC表面HLA DR、CD86的表达上调 ,能明显促进MLR中T细胞的增殖 ,增强DC调节T细胞杀伤肿瘤活性。结论 :CpGODN可诱导人外周血DC分化成熟 。

嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究

目的:研究携带35型腺病毒纤毛的嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35能否有效地将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并观察eGFP基因在大鼠BMSCs内持续表达的时间。方法:贴壁培养法分离、扩增大鼠BMSCs。用带有eGFP基因的Ad5/F35(Ad5/F35-eGFP)分别以1、10、100、1000的感染复数(MOI)转染第2代大鼠BMSCs;荧光倒置显微镜和流式细胞仪(FCM)检测eGFP基因的转染效率与表达水平,观察细胞生长状态以评估病毒对大鼠BMSCs基本生物学特性的影响;对MOI=100的病毒转染的大鼠BMSCs在转染后第2、7、14、21、30天分别用FCM检测大鼠BMSCs内eGFP的表达情况。结果:MOI在1到1000范围内,eGFP基因转染效率和表达水平与Ad5/F35-eGFP的MOI呈正向剂量相关性。MOI=100的病毒可转染90%左右的大鼠BMSCs,且eGFP基因在1个月内均有表达。MOI为1、10、100的病毒不影响大鼠BMSCs的活力和增殖能力。结论:Ad5/F35可以高效地将eGFP基因体外转染大鼠BMSCs,eGFP基因可持续表达1个月。本研究为Ad5/F35作为BMSCs的基因转移和表达载体进行细胞治疗与基因治疗提供了实验依据。

MnCl_2对树突状细胞调节T细胞抗肿瘤活性的实验研究

目的:探讨不同浓度MnC l2对树突状细胞(DC)调节T细胞抗肿瘤活性的影响。方法:采用析因实验设计,分析MnC l2浓度、DC细胞浓度、效靶比三因素各水平对DC调节T细胞抗人肝癌细胞株(Huh7)活性的影响;流式细胞仪检测MnC l2最佳刺激组与空白组DC膜分子HLA-DR表达;体内实验分析MnC l2最佳刺激组DC在SC ID小鼠体内对T细胞抗Huh7活性的调节作用。结果:MnC l2浓度、DC细胞浓度、效靶比三因素各水平对T细胞杀伤活性皆产生显著效应(P<0.01),并且3个因素中两两有协同作用(P<0.01)。最佳MnC l2刺激浓度为300μmol.L-1,该浓度MnC l2能显著提高DC表面HLA-DR表达水平及阳性细胞率(P<0.01)。在SC ID小鼠体内,MnC l2刺激组DC成瘤率为2/5,对照组成瘤率为5/5;MnC l2刺激组的肿瘤平均体积为0.42 cm3,对照组为2.95 cm3。刺激组的成瘤率及肿瘤平均体积皆小于对照组(P<0.01)。结论:300μmol.L-1MnC l2能显著提高DC表面HLA-DR表达水平及阳性细胞率;MnC l2激活的DC在体外能显著增强T细胞杀伤活性并在SC ID小鼠体内能显著抑制肿瘤生长。

胶质细胞源性神经营养因子对局灶性脑缺血后海马齿状回脑电活动的影响

目的:观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对局灶性脑缺血大鼠在体海马齿状回脑电活动的影响。方法:制作右侧局灶性脑缺血模型,右侧脑室注射GDNF,通过神经电生理学方法,记录正常组、脑缺血模型组、生理盐水组和GDNF组大鼠局灶性脑缺血90 m in后再灌注14 d海马齿状回的脑电活动,分析脑电频谱。结果:免疫组化检测显示,GDNF组各时间点B r-dU阳性细胞较脑缺血模型组和生理盐水组增多。大鼠脑电图显示,GDNF组较脑缺血模型组和生理盐水组脑电活动恢复明显,组间比较有显著性差异(均P<0.05)。结论:GDNF可改善局灶性脑缺血后的脑损伤,促进激活内源性神经干细胞增殖、分化,改善脑缺血后的行为和脑功能。