骨桥蛋白下调对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响

目的观察骨桥蛋白(osteopontin．OPN)下调后对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响。方法构建针对OPN的siRNA(small interference RNA)表达质粒,用脂质体方法转染PC3细胞。RT-PCR和Western blot检测转染后PC3细胞OPN的表达；MTT比色法和流式细胞仪检测PC3细胞OPN下调对细胞的生长和细胞周期的影响；软琼脂生长实验检测OPN下调后对PC3细胞集落形成的影响。结果 RT-PCR和Western blot证实经RNA干扰介导的PC3细胞存在OPN表达下调,转染的细胞生长受抑制,出现细胞周期S期阻滞和细胞凋亡,在软琼脂上的细胞集落形成率下降。结论经RNA干扰的选择性OPN下调可使PC3细胞在S期阻滞并出现细胞凋亡,细胞的恶性程度下降。

三氧化二砷诱导HeLa细胞凋亡与其抑制HPV18 E6表达和端粒酶活性有关

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡时,对HPV18E6致瘤基因和端粒酶活性的影响。方法用不同浓度的As2O3作用于HeLa细胞不同时间段后,光镜和电镜观察细胞形态改变,流式细胞仪检测细胞周期改变,MTT法测定细胞生长抑制情况。RT PCR方法检测HPV18E6的表达,TRAP ELISA方法测定细胞内端粒酶活性变化。结果2μmol/LAs2O3处理HeLa细胞48h后,可降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,抑制HPV18E6的表达,细胞内端粒酶活性明显下降。As2O3对HeLa细胞的这种作用呈时间剂量依赖关系。结论As2O3诱导HeLa细胞凋亡可能与其抑制HPV18E6致瘤基因的表达有关,细胞内端粒酶活性的抑制可能与这种E6致瘤基因的抑制有关。