肾阳虚骨关节炎个案与13个免疫基因的初步研究——辨证论治的个体化医学及分子疗效评定方法试探

目的通过用基因芯片方法研究肾阳虚骨关节炎温针治疗典型病例的差异表达基因,探索辨证论治的个体化医学治疗效果及分子疗效评定的新方法。方法对10例典型肾阳虚骨关节炎患者辨证评分,然后施以温针灸治疗,选出1例疗效最好者,对其治疗前、后差异基因表达谱进行分析。结果所选患者肾阳虚证、疼痛评分分别减少26分和12分,基因芯片检测该患者治疗前、后血液获得有表达差异的基因57条,其中已知功能的基因有33条,与免疫相关者13条,约占整个已知功能基因的39·39%。结论温针治疗肾阳虚证有效病例的基因表达涉及面广,其分子机理包括免疫、能量、疾病、肿瘤等多个方面,但以免疫最为突出。这提示可以以肾阳虚证的分子生物学为基础,来探讨辨证论治的个体化医学疗效及其评价方法。

Caspase 3在大肠杆菌E.coliBL21中表达和活性的研究

目的:研究凋亡蛋白酶Caspase 3在大肠杆菌中的表达及活性。方法:用PCR法扩增出Caspase3基因cDNA,然后插入pCMV-Myc载体,扩增后克隆至表达载体pGEX-6p,使用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导Caspase 3蛋白的表达;应用SDS-PAGE和W estern b lot法鉴定其性质。结果:经测定诱导3 h后Caspase 3活性最高。结论:可在大肠杆菌E.coliBL21中诱导表达出有活性的Caspase 3,为研究其在细胞凋亡中的作用奠定了基础。

调强放射治疗笔形束算法研究

目的:探讨笔形束算法的原理应用于调强放射治疗计划的临床物理数据,参数修正方法。方法:对有限元笔形束算法的计算模型进行分析利用蒙特卡罗算法对利用大野数据推导的有限元笔形束算法数据进行对照分析,采用有限元笔形束算法的计算误差进行验证。结果:有限元笔形束算法模型得到的数据与测量数据对比,PDD数据有很好匹配,误差<2%;Profiles数据在半影区域和射野边缘区域最大达到4%。利用大野线性关系得到的小射野输出因子与Monte Carlo算法得到的输出因子具很好的一致性。结论:以有限元笔形束算法模型为基础的调强放射治疗计划系统在临床剂量计算中能得到较好的精度,可提高计算速度。利用大野数据推导的小野输出因子,可以代替用Monte Carlo算法得到的射野输出因子。

FasR和FasL基因在口腔癌组织中表达与凋亡关系研究

目的 探讨口腔癌组织及正常组织的凋亡与FasR、FasL基因表达的关系。方法 利用免疫组织化学法检测口腔癌组织及癌旁正常组织中FasR、FasL基因的表达,采用原位末端标记(TUNEL)法检测口腔癌组织标本中的凋亡情况。结果 FasR基因在口腔癌组织和正常口腔组织中的阳性表达率分别为5 6.7% (3 8/67)和83 .6% (3 8/4 2 ) ,FasR基因在口腔癌组织中的阳性表达率显著低于正常口腔组织(P <0 .0 0 1)。FasL基因在口腔癌组织和正常口腔组织中的阳性表达率分别为85 .7% (5 6/67)和16.7% (7/4 2 ) ,口腔癌组织中FasL基因的表达显著高于正常口腔组织(P <0 .0 0 1)。口腔癌组织细胞凋亡指数显著低于正常口腔组织(P <0 .0 0 1)。FasR阳性的口腔癌组织细胞凋亡指数显著高于FasR阴性者(P<0 .0 0 1) ,而FasL阳性的口腔癌组织细胞凋亡指数显著低于FasL阴性者(P <0 .0 5 )。结论 FasR和FasL基因在口腔癌组织细胞凋亡过程中存在着协同或拮抗作用的关系。

中成药在老年非小细胞肺癌放射治疗中的应用

目的评价参一胶囊联合放射治疗治疗老年非小细胞肺癌近期疗效及急性毒副反应。方法选取2010年7月至2013年6月收治的肺癌患者60例,随机分为试验组30例,放射治疗加参一胶囊治疗;对照组30例,为单纯放射治疗。治疗2个月后比较两组近期疗效及急性毒副反应的差异。结果试验组近期有效率为63.3%,对照组近期有效率为33.3%,两组间比较差异有显著性(P<0.05);两组均未出现Ⅳ度急性毒副反应,两组间急性放射性肺炎、放射性食管炎发生率比较,差异无显著性(P>0.05)。结论参一胶囊联合放射治疗治疗老年非小细胞肺癌安全有效。

三维放射治疗计划系统临床物理数据的测量和验证

目的:探讨三维治疗计划系统测量的方法,分析拟合数据参数的计算方法,并且利用测量设备验证计算数据和拟合参数的准确性。方法:利用PTW和IBA三维水箱模体对多套三维计划系统进行所需的临床物理数据进行测量,对一种治疗计划系统依据测量数据进行拟合公式得到的线性系数进行分析,得到治疗计划时所需的计算数据,并且利用测量设备对计算数据进行验证。结果:利用测试数据得到的拟合数据及计算模型相关系数输入到TPS后得到相应的计算数据。通过测试设备验证:拟合数据PDD与测量PDD一致性比较好,误差小于±1%;Profiles数据在半影区域,小射野一致性误差最大可达到3%。对TPS的数据验证,单野PDD剂量点和Profiles数据点均能在±3%以内。结论:了解三维治疗计划系统的计算模型和参与物理数据的测试对TPS的质量保证和质量控制具有积极意义。

隐匿性乳腺癌1例并文献复习

隐匿性乳腺癌是一种少见特殊类型的乳腺癌，在乳腺癌中不到1%，缺少一定的诊疗规范[1]。本文报道本院放疗科收治的1例隐匿性乳腺癌，通过文献复习，以提高对该病的认识。

两种不同腔内外照射法治疗宫颈癌临床观察

目的 对比观察全盆腔外照加腔内放疗法及全盆腔外照直肠挡铅腔内放疗法治疗宫颈癌的疗效及对直肠膀胱的影响.方法 119例宫颈癌,随机分为全盆组59例、挡铅组60例.全盆组：全盆大野外照射5 000cGy/25次后予腔内放疗2～3次,1次/周,800 cGy/次.挡铅组：全盆大野外照3 000 cGy/15次后予直肠挡铅并行腔内放疗4～6次,1次/周,500 ～ 700 cGy/次.结果 两组近期疗效及3、5年生存率相近（P均＞0.05）.挡铅组放射性直肠炎及膀胱炎的3、5年发生率分别为13.3％和3.4％、10.9％和2.1％,全盆组分别为25.4％和8.5％、20.5％和6.8％,两组放射性直肠炎发生率相比,P均＜0.05.结论 全盆腔外照直肠挡铅腔内放疗法治疗宫颈癌的疗效与全盆腔外照加腔内放疗法相近,但放射性直肠炎的发生率低.

乳腺癌保乳手术58例近期疗效观察

目的评价乳腺癌保乳综合治疗的疗效.方法乳腺癌行保留乳房的肿瘤切除加腋窝淋巴结清扫;前哨淋巴结活检阴性则替代腋窝淋巴结清扫.结果随访1～61个月,中位随访24个月,保乳组中1例锁骨上淋巴结转移(1/54);死亡2例,死亡率3.70%(2/54).结论乳腺癌采用保乳手术综合疗法,近期疗效满意.

局部性尤文肉瘤综合治疗临床分析

目的 探讨局部性尤文肉瘤的综合治疗效果。方法 收集经综合治疗的 2 5例尤文肉瘤患者的临床资料 ,采用Kaplan Meier法进行分析、Logrank法检验 ,分析治疗方式和化疗周期对疗效的影响。结果 综合治疗局部性尤文肉瘤的有效率为 92 % (2 3 /2 5 )。治疗结束后病灶完全消退组患者的 1、3、5年生存率 (10 0 %、93 .8%和 81.3 % )明显高于病灶未完全消退组 (10 0 %、75 .0 %和 5 0 .0 % ) (均P <0 .0 5 )。行 6个周期化疗的患者 1、3、5年生存率 (10 0 %、93 .8%和 66.7% )高于 3个周期者 (88.9%、77.8%和 5 5 .6% ) (均P <0 .0 1)。局部采用手术或放疗对疗效无明显影响 (P >0 .0 5 )。结论 经综合治疗 ,局部性尤文肉瘤病灶完全消退者生存期明显延长 ,化疗周期的次数是影响疗效的重要因素。

低位局部晚期直肠癌的新辅助治疗

目的:研究低位局部晚期直肠癌的术前新辅助治疗的意义。方法:2002年2月至2006年6月间共有局部晚期低位直肠癌患者45例,在我院接受术前新辅助放、化疗,然后进行手术治疗。化疗方案:奥沙利铂+甲酰四氢叶酸钙+氟尿嘧啶,与放疗同步化疗二个周期;放疗方案:1.8Gy/次,每周5次,共25次,5周内完成,总剂量45Gy。结果:经过术前新辅助放、化疗,多数病例手术病理标本表明肿瘤消退为TRG3(53.3%),其中4例肿瘤完全消失;60.0%(27/45)的病例T降期,原发病灶平均最大径平均缩小35.8%;62.2%(28/45)的病例N降期。全组71.1%(32/45)的病例采用保留肛门手术,17.8%(8/45)的患者采用腹会阴联合切除术,8.9%(4/45)因肿瘤消失未行手术。结论:低位晚期直肠癌的新辅助治疗,可降低肿瘤分期,从而提高手术切除率和保肛率。

高强度聚焦超声治疗晚期胰腺癌近期疗效评价

目的探讨高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)治疗晚期胰腺癌的安全性及有效性。方法 19例晚期胰腺癌患者共接受121次(平均6.4次)HIFU治疗。观察患者生命体征、重要器官功能、影像学检查(CT或MRI等)、并发症和肿瘤转归的情况。结果临床受益反应率达71.2%;除1例患者接受HIFU治疗后5个月出现阻塞性黄疸外,未见其他副作用;部分患者的MRI检查显示HIFU治疗区内组织呈凝固性坏死表现。结论 HIFU治疗期胰腺癌能取得一定的疗效,治疗安全性相对较高,值得临床进一步观察研究。

子宫颈癌根治术后同步放化疗与放疗序贯化疗及单纯放疗临床对比研究

目的:探讨子宫颈癌根治术后高危患者同步放化疗与放疗+化疗序贯治疗、单纯放疗的疗效及毒副反应。方法:117例宫颈癌术后高危患者分为同步放化疗组、放疗+化疗序贯治疗组和单纯放疗组3组,各39例。3组放疗方案相同。第1组在放疗第1周内同时给予FP方案化疗;第2组在放疗结束后1周给予FP方案化疗。结果:3组3年盆腔复发率分别为2.6%、17.9%和23.1%,第1组与第2、3组比较差异有统计学意义,χ2=6.532,P=0.011;3组3年远处转移率分别为2.6%、12.8%和25.6%,第1、2组与第3组比较差异有统计学意义,χ2=6.936,P=0.008;3组3年生存率分别为94.7%、74.4%和61.5%,第1组与第2、3组比较差异有统计学意义,χ2=10.268,P=0.001。第1组骨髓抑制和消化道反应发生率均高于第2、3组,χ2值分别为14.204和13.882,P值均为0.000,但大部分患者能够耐受。结论:子宫颈癌术后高危患者同步放化疗组与放疗+化疗序贯治疗、单放组比较,降低了3年盆腔复发率,减少了3年远处转移率,提高了3年生存率,且早期毒副反应能耐受。

应用电子射野影像系统(EPID)提高放疗摆位精确性的临床研究

目的利用射野影像系统研究放疗过程中人体不同部位摆位误差和空腔脏器不同充盈状态及有无体位固定装置对摆位准确性的影响。方法放疗前先采集定位片图像为参照,与治疗过程中实时采集的验证图像对比,测量摆位误差。结果头颈部肿瘤靶区摆位误差较小;胸部肿瘤靶区由于呼吸心跳运动的影响,误差较大;在平静呼吸状态下,腹腔和盆腔的肿瘤靶区摆位误差与各脏器的不同充盈状态关系不大。结论利用射野影像系统可以有效减少放疗摆位误差,提高摆位的准确性,及时纠正摆位误差,是质量控制和质量保证的有力工具;有体位固定措施的摆位误差较无体位固定措施的误差明显减小。

子宫颈癌体外放疗传统射野合理性的临床研究

放疗是宫颈癌的有效治疗方法，掌握好方法及剂量控制，可提高治愈率，减少放射性直肠炎及膀胱炎的发生率。采用何种放疗方法及剂量才能得到较好治疗效果并尽量减少直肠及膀胱并发症的产生。为此笔者对1998年1月至2001年12月首次放疗的80例宫颈癌患者进行了两种放疗方法的比较研究。

重组腺病毒携带TNF-α受体Ⅰ基因对肝脏缺血再灌注损伤的研究

目的探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及可溶性TNF-α受体Ⅰ(sTNFRⅠ)基因的保护作用。方法预先给予携带sTNFRⅠ基因的重组腺病毒后建立大鼠缺血再灌注模型,阻断肝左、中叶入肝血流60min后分别再灌注1h、3h、6h、12h。采用全自动生化分析仪测定血清中肝酶学指标(AST、ALT),TBA法测定肝脏丙二醛(MDA)含量。大鼠肝脏组织切片HE染色后,行光镜检查,观察肝组织显微结构变化。结果AST、ALT和肝脏的组织形态学都显示模型组较假手术组大鼠有明显的肝脏损伤,其中以再灌注6h肝脏损伤最严重。肝组织MDA含量明显高于假手术组(P<0.01),于再灌注3h达到高峰。肝组织TNF-α的表达均明显高于假手术组(P<0.01),且于再灌注6h达到高峰。结论sTNFRⅠ可增强抗氧化能力,降低MDA水平,抑制缺血再灌注大鼠体内氧化应激水平,对大鼠缺血再灌注有一定的治疗作用。

乳腺癌原发灶与复发转移灶中雌激素受体表达及雌激素受体基因甲基化改变的临床意义

目的分析乳腺癌原发灶与复发转移灶间雌激素受体（ER）表达及ER基因甲基化改变的临床意义。方法采用免疫组化法检测70例乳腺癌原发灶和复发转移灶中ER表达情况，采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测ER基因甲基化表达的变化。结果70例乳腺癌原发灶和复发转移灶中，ER阳性率分别为64．3％和41．4％，差异有统计学意义（P〈0．05）。ER从原发灶到复发转移灶阳性转阴性患者6例（8．6％），其中4例ER基因从非甲基化状态转为高甲基化；ER从原发灶到复发转移灶阴性转阳性患者4例（5．7％），其ER基因均表现为高甲基化状态转为非甲基化状态。结论乳腺癌原发灶与复发转移灶中ER表达不一致，引起ER表达变化的原因可能与ER基因的甲基化状态有关。

装载超抗原SEA基因的由前列腺特异性抗原和端粒酶逆转录酶启动子双调控靶向前列腺癌的溶瘤腺病毒载体的构建

目的构建表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素（SEA）基因的由前列腺特异性抗原（PSA）启动子及端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子双调控的特异性增殖溶瘤腺病毒SG504-SEA。方法从前列腺癌组织基因组DNA中获得522bp大小的PSA启动子序列，将PSA启动子克隆到由hTERT启动子调控的特异性增殖溶瘤腺病毒载体SG502中，得到靶向前列腺癌细胞的双调控溶瘤腺病毒载体SG504。将已构建好的含有771bp大小SEA基因片段的病毒骨架质粒PPE3-ccdb—SEA与SGSIM用Lipofectamine 2000共转染至293细胞。共转染后9—14d出现病毒空斑，经过3次病毒空斑纯化，经鉴定正确的腺病毒命名为SG504-SEA，即携带SEA基因的双调控靶向前列腺癌的特异性溶瘤腺病毒。结果经聚合酶链反应（PCR）及酶切鉴定，SEA基因成功克隆到病毒载体中，可以表达SEA基因，且病毒滴度为2．0×10^10pfu／ml。结论成功构建表达超抗原SEA基因的双调控选择增殖型溶瘤腺病毒SG504-SEA。

藤黄酸对膀胱癌细胞株BIU-87生长的抑制作用

目的探讨GA（藤黄酸）对膀胱癌细胞株BIU-87生长的抑制作用及其机制。方法分别以倒置相差显微镜、噻唑蓝（MTT）比色法、流式细胞术观察GA对BIU-87的形态学改变作用、生长抑制效应、凋亡诱导以及周期阻滞作用。结果倒置相差显微镜观察发现，GA作用后BIU-87细胞变圆、脱壁，部分死亡、漂浮；MTT法显示，GA对BIU-87具有明显的生长抑制作用，并随着药物浓度的增加（0—3μmol／L）而逐渐增强，IC50为1．7μmol／L；流式细胞术检测发现，GA浓度为1．5、3．0μmol／L时凋亡率分别为（34．6±5．2）％和（58．6±6．9）％，显著高于对照组的（2．2±0．8）％；GA浓度为0、1．5、3．0μmol／L，作用48h后，G0～G1期细胞数分别是（35．0±1．2）％、（35．0±1．5）％、（46．0±3．1）％；而S期细胞比例分别为（33．5±0．7）％、（34．1±0．6）％、（15．6±3．3）％，并呈剂量依赖性阻滞BIU-87细胞周期于G。／G，期。结论GA对BIU-87细胞有明显生长抑制作用，这可能与诱导BIU-87凋亡、阻滞其细胞周期进程有关。