Fogarty球囊构建兔颈总动脉损伤及移植内皮祖细胞治疗的动物模型

目的:利用Fogarty球囊建立兔颈总动脉球囊损伤及损伤处移植内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPCs)治疗的动物模型。方法:培养兔外周血中EPCs并以Fe2O3磁性纳米颗粒标记。将实验兔随机分为细胞组(12只)和空白组(10只),经股动脉入路利用Fogarty球囊损伤两组兔右侧颈总动脉,并用Fogarty球囊阻断血流后将标记EPCs移植至细胞组血管损伤段,将生理盐水注入空白组;术后7 d取2只细胞组兔损伤血管行普鲁士蓝染色;术后3 d,1、4、8周行MR扫描;术后8周取损伤血管,行HE、弹力纤维及PCNA染色。结果:术后7 d普鲁士蓝染色示损伤内膜可见含铁EPCs附着,MR扫描示术后4周空白组兔损伤血管壁稍有增厚,术后8周明显增厚,细胞组术后4周损伤血管管壁未见明显增厚,8周后稍有增厚。病理学检查示,术后8周细胞组与空白组内膜/中膜比(N/M)分别为0.34±0.05和1.14±0.10(P<0.01),PCNA阳性细胞指数为0.08±0.01和0.31±0.01(P<0.05)。结论:Fogarty球囊成功构建兔颈总动脉损伤狭窄模型并阻断血流实现EPCs定向移植至血管损伤处,参与内膜的修复。

人血栓调节蛋白基因转染内皮祖细胞预防球囊扩张术后动脉再狭窄

目的探讨血栓调节蛋白基因（hTM）转染的内皮祖细胞（EPCs）移植至兔颈总动脉球囊损伤局部预防动脉冉狭窄的可行性。方法兔外周血分离培养EPCs；脂质体介导基因转染，片以Fe2O3磁性纳米颗粒标记EPCs；高脂饮食联合球囊扩张制作兔双侧颈总动脉损伤模型共16只，随机分成2组，双腔Fogarty球囊阻断法分别将转染EPCs、未转染EPCs及等量生理盐水移植至兔颈总动脉损伤局部；移植后1、3、7、14d分别行磁共振（MR）扫描，观察损伤局部信号强度改变；4个月后行血管组织切片苏木素-伊红（HE）染色及弹力染色，观察再狭窄情况。结果脂质体可以成功地将外源hTM基因转染至EPCs并可获得10％～15％的转染效率；Fogarty球囊阻断法可以使部分EPCs黏附于血管损伤局部，引起局部MR信号改变；基凶修饰组、基因未修饰组、单纯损伤组内膜中膜比（N／M）分别为0．30±0．02、0．62±0．05、1．58±0．10，3组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论血栓调节蛋白基因转染内皮祖细胞可以有效预防球囊扩张术后动脉再狭窄。