糖基化终产物对小鼠成骨样细胞基质金属蛋白酶诱导物基因表达的影响

目的探讨糖基化终产物(AGEs)对小鼠成骨样细胞基质金属蛋白酶诱导物(EMM-PRIN)表达的影响。方法在培养的小鼠成骨细胞株(MC3T3-E1)中分别加入不同浓度(50、100、200及400mg/L)的AGEs干预24h和同一浓度(200mg/L)的AGEs干预12、24及48h,以无血清培养基(α-MEM)和相应浓度的牛血清白蛋白(BSA)为对照。用RT-PCR法检测EMMPRIN mRNA的表达水平。结果不同浓度和不同时间的AGEs干预的EMMPRIN mRNA水平与对照组相比均有显著差异(P<0.01);AGEs组EMMPRIN mRNA表达呈时间和浓度依赖性升高(P<0.05)。结论AGEs以时间及浓度依赖的方式增加小鼠成骨细胞EMMPRIN mRNA的表达,AGEs可能通过调节成骨细胞EMMPRIN的表达参与骨质疏松的发病。

自我管理教育对2型糖尿病患者治疗依从性的影响

目的评价自我管理教育对2型糖尿病(T2DM)患者治疗依从性的影响。方法 980例T2DM患者随机分为自我管理教育组(管理组,514例)和常规糖尿病教育组(对照组,466例)。比较干预前后两组患者糖尿病知识、治疗依从性和血糖控制状况变化。结果干预后,管理组糖尿病知识水平显著高于对照组(P<0.05),治疗依从性、空腹血糖(FBG)、餐后2-h血糖(PBG)和糖化血红蛋白(HbA1c)控制情况均显著优于对照组(P<0.01)。结论自我管理教育能增强T2DM患者治疗依从性,改善血糖控制效果。

1,5-脱水葡萄糖醇在初诊2型糖尿病患者血糖监测中的价值

目的评估1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)在初诊2型糖尿病(T2DM)患者血糖监测中的价值。方法选择初发T2DM患者192例,通过糖尿病教育、营养指导、调整口服药物或胰岛素剂量使血糖达标;比较治疗前和开始治疗后第2、4、8周患者的空腹静脉血糖(FPG),1,5-AG,果糖胺以及糖化血红蛋白(HbA1c)的变化。结果治疗2、4周时的1,5-AG为(5.40±2.81)μmol/L、(9.05±3.07)μmol/L,均明显高于治疗前的(1.86±1.30)μmol/L(P<0.05);HbA1c于治疗4周时开始下降。治疗8周时,血清1,5-AG与HbA1c、果糖胺、FPG水平呈负相关(r分别为-0.576、-0.594、-0.663,P<0.01)。结论 1,5-AG比HbA1c反应灵敏,能快速反应血糖变化,可用于T2DM患者早期的血糖监测。

暴发性1型糖尿病合并心肌损害一例及文献复习

暴发性1型糖尿病（fulminant type 1diabetes）是一种特殊类型的糖尿病,自日本学者Imagawa等于2000年首次提出以来,逐渐被临床医师所认识和关注,此病发病时β细胞破坏速度快、高血糖症状及酸中毒程度严重、缺乏糖尿病相关抗体、预后差、糖化血红蛋白接近正常。我科收治1例暴发性1型糖尿病合并心肌损伤,现结合相关文献分析如下。

α_2β_1整合素Bg1 Ⅱ基因多态性与糖尿病合并冠心病的相关性

目的探讨α2β1整合素基因多态性与糖尿病合并冠心病、血脂异常之间的关系。方法采用PCR-RFLPs法,对217例南京地区2型糖尿病(T2DM)患者[合并冠心病101例(A组),无冠心病116例(B组)]和107例正常对照者(C组)进行整合素α2β1Bg1Ⅱ酶切位点多态性研究,并根据冠状动脉造影结果分组分析。结果 (1)A组Bg1Ⅱ+/+基因型(56%)显著高于B组(23.3%)和C组(39.3%)(P<0.01);Bg1Ⅱ基因阳性率与冠心病冠脉病变支数呈正相关趋势;(2)Bg1Ⅱ+/+型者胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)明显高于Bg1Ⅱ+/-及Bg1Ⅱ-/-者(P<0.05),而胰岛素敏感指数(ISI)降低;(3)不同Bg1Ⅱ基因型的各亚组间血浆总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平没有显著性差异(P>0.05)。结论α2β1整合素Bg1Ⅱ酶切位点多态性与冠状动脉病变间存在相关性,可能与T2DM胰岛素抵抗、动脉粥样硬化进展有关。

糖基化终产物对小鼠成骨样细胞基质金属蛋白酶2分泌的影响

目的探讨糖基化终产物(AGEs)对小鼠成骨样细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)分泌的影响。方法用不同浓度的AGEs(50、100、200、400 mg/L)干预培养的小鼠成骨样细胞(MC3T3-E1)24 h和用200 mg/L的AGEs干预MC3T3-E1不同时间(12、24、48 h),以无血清培养基(α-MEM)和相应浓度的牛血清白蛋白(BSA)为对照。用Western blot法检测小鼠成骨样细胞上清中MMP-2蛋白的表达。结果不同浓度和不同时间的AGEs干预的MMP-2分泌水平明显高于对照组(P<0.01)。结论AGEs以时间及浓度依赖的方式增加小鼠成骨样细胞MMP-2分泌,AGEs可能通过调节成骨细胞MMP-2的分泌参与骨质疏松的发病。

伊贝沙坦对人肾系膜细胞β1-整合素表达及Ⅳ型胶原分泌的影响

目的探讨伊贝沙坦对糖基化终产物(AGEs)干预下人肾系膜细胞(HRMC)β1-整合素表达以及胞外基质(ECM)成分Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)分泌的影响。方法用糖基化终产物-牛血清白蛋白(AGE-BSA)干预HRMC(AGE-BSA组),用不同浓度的伊贝沙坦与AGE-BSA共同干预HRMC48 h(伊贝沙坦干预组)。RT-PCR法测定细胞β1-整合素mRNA水平;Western blot法检测β1-整合素蛋白表达;放射免疫分析法测定细胞培养上清Ⅳ-C含量。结果与AGE-BSA组相比,伊贝沙坦干预组能下调由AGE-BSA诱导的HRMCβ1-整合素mRNA和蛋白表达的升高,并抑制培养上清Ⅳ-C的分泌(P<0.05)。结论 伊贝沙坦可能通过抑制AGEs引起的上述改变而发挥其肾脏保护作用。

大鼠PPARγ shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

目的构建过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)基因RNA干扰慢病毒载体并鉴定。方法设计针对PPARγ的小发夹RNA(shRNA)序列,应用基因重组技术插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,XbaⅠ和XhoⅠ双酶切和DNA测序鉴定重组克隆。将pLL3.7空载体(NC组)、pLL-PPAR-γsh1RNA(S1组)、pLL-PPAR-γsh2RNA(S2组)三组质粒分别与辅助包装质粒共转染人胚肾293T细胞,并测定病毒滴度;病毒感染大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞和大鼠海马神经干细胞后,分别用RT-PCR和Western blot检测PPARγmRNA和蛋白表达。结果 PPARγshRNA成功插入慢病毒载体。慢病毒载体经293T细胞包装成功,测定病毒的滴度为5×106IU/ml。与NC组相比,S1、S2组PPARγmRNA水平下降(P<0.05),且S1组PPARγ蛋白表达亦明显下降(P<0.05)。结论成功构建PPARγ基因RNA干扰慢病毒载体。

2型糖尿病患者代谢指标与认知障碍的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者认知功能水平与血糖(Glu)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素(Ins)水平等代谢指标之间的关系。方法选取50例T2DM患者为T2DM组,47例年龄、性别构成比、文化程度、职业等方面相匹配的健康人作为对照组。应用多维度神经认知量表(连线测验、MoCA量表、数字广度测试、健康调查表)分别对两组人群进行认知功能检测,并将T2DM患者的认知功能评分与Glu、HbA1c、HOMA-IR、Ins水平进行相关性分析。结果 T2DM组的发散思维能力、短时记忆、空间与执行能力、注意能力、语言、抽象、延迟回忆、定向能力均低于对照组(P<0.05);焦虑、抑郁情绪重于对照组(P<0.05)。多因素线性逐步回归分析结果显示,在年龄、病程、教育程度、吸烟指数、血压、血脂作为混杂因素校正的情况下,Glu、HbA1c、HOMA-IR、体重指数(BMI)、Ins是导致认知功能评分下降的危险因素(P<0.05)。结论 T2DM患者认知功能减退,且Glu、HbA1c、HOMA-IR、BMI、Ins水平与认知功能减退呈明显的正相关性。

胰腺应激蛋白PSP/reg对胰腺星状细胞活性的影响

目的探讨胰腺应激蛋白胰石蛋白/再生蛋白(PSP/reg)对胰腺星状细胞(PSC)的增殖、迁移、凋亡、胞外基质(ECM)合成的影响。方法分离纯化慢性胰腺炎患者纤维化区的PSC,基因重组胰腺应激蛋白PSP/reg,分别以10、100 ng/ml的终浓度对其进行干预。BrdU标记法检测PSC增殖;创伤愈合法观察PSC的迁移;原位缺口末端标记(TUNEL)技术检测PSC凋亡。细胞免疫荧光法观察细胞外基质(ECM)如胶原蛋白I(Col I)、纤连蛋白(FN)的生成。结果胰腺应激蛋白PSP/reg呈浓度依赖性地抑制PSC的增殖和迁移(P<0.05),而不影响PSC凋亡。免疫荧光结果显示Col I、FN生成减少。结论 胰腺应激蛋白PSP/reg在急慢性胰腺炎时显著升高。其抑制纤维化主要效应细胞PSC的活性,可能减少胰腺纤维化发生,在胰腺炎后的再生修复过程中发挥重要作用。

糖基化终产物对体外培养的胎鼠海马神经前体细胞增殖和分化的影响

目的观察糖基化终产物(AGEs)对胎鼠海马神经前体细胞(NPCs)增殖和分化的影响。方法分离孕14.5d胎鼠海马,有限稀释法进行单克隆体外培养,分为不同浓度AGEs-牛血清白蛋白(BSA)组和对照组。分别用无血清NPCs培养基和胎牛血清促其增殖和诱导分化。MTT法和免疫荧光双标法结合激光共聚焦成像分别观察不同浓度AGEs对NPCs增殖和分化的影响。结果AGEs-BSA(50～400)mg/L干预后第3天和第7天,吸光度(A570nm)显著降低(P<0.01);AGEs-BSA(50～400)mg/L干预7d后,NeuN阳性细胞率显著低于对照组(P<0.05)。结论糖基化终产物抑制胎鼠NPCs的增殖和向神经元的分化。

罗格列酮抑制AGEs诱导的人肾小球系膜细胞β1-整合素的表达

目的观察罗格列酮对糖基化终产物(AGEs)干预的人肾小球系膜细胞(HRMC)β1-整合素表达以及细胞外基质(ECM)成分Ⅳ型胶原分泌的影响。方法用葡萄糖和牛血清白蛋白制备糖基化终产物(AGE-BSA),用不同浓度的罗格列酮(1.0、10.0、100.0μmol/L)和AGE-BSA共同干预以及AGE-BSA单独干预(AGEs组)HRMC。RT-PCR法测定细胞β1-整合素mRNA水平;Western blot法检测β1-整合素蛋白表达;放射免疫分析法测定细胞培养上清液Ⅳ型胶原含量。结果与AGEs组相比,各浓度罗格列酮均能下调由AGE-BSA诱导的HRMCβ1-整合素mRNA和蛋白表达的升高,并抑制培养上清液Ⅳ型胶原的分泌(P<0.05)。结论罗格列酮可能通过抑制AGEs引起的HRMCβ1-整合素mRNA和蛋白表达及Ⅳ型胶原含量的升高,发挥一定的肾脏保护作用。

胰岛素给药途径的研究进展

经典的胰岛素给药方式为皮下注射,注射器、胰岛素泵、胰岛素笔等注射方式逐渐演变,目的在于减少病人痛苦,提高生活质量。吸入、口服、黏膜等非注射给药方式方便、无痛,但因胰岛素吸收、降解、利用等方面的不足,尚未能广泛应用。超声胰岛素导入为目前研究较多的无痛性胰岛素给药方式。

1,5-脱水葡萄糖醇及其临床应用

1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG),在糖尿病的筛查、病程判断及血糖控制方面具有很重要的意义。现就1,5-AG的生物学特性、检测方法及临床应用作一综述。