前言——发挥神经影像学先进技术的作用,提高脑血管病的诊治水平

随着我国人口老龄化程度不断增高，脑血管病发病率也随之上升，脑血管病已成为第二大致死性和第一大致残性疾病。我国每年有200多万人发生脑血管病，每年死于脑血管病者约有100万以上。

纳米磁性探针转染大鼠外周血内皮祖细胞的磁共振成像实验研究

目的建立稳定的体外分离培养、诱导分化大鼠外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),及应用纳米磁探针体外标记EPCs的方法,磁共振(MR)进行标记细胞成像。方法抽取SD大鼠外周血,应用Ficoll密度梯度离心的方法获得单个核细胞,同时应用VEGF和bFGF诱导,使之向内皮细胞分化,以免疫细胞化学鉴定贴壁细胞的内皮标志。制备Fe2O3-arginine复合物,对EPCs进行磁探针标记,应用MR进行细胞群成像。结果经VEGF和bFGF诱导后的EPCs的内皮标志CD31、CD34、Flk21和vWF在不同时段呈阳性表达。普鲁士蓝染色可见铁颗粒位于细胞质内,标记率接近100%;磁共振成像(MRI)显示标记的细胞群信号强度的变化较未标记细胞群信号降低。结论大鼠外周血中含有EPCs,在体外特殊诱导环境下,可定向分化为内皮样细胞。Fe2O3-arginine可以有效标记EPCs构建纳米生物探针,临床应用型1.5TMR可在体外进行标记细胞群成像。

靶向LOX-1的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块近红外荧光成像及阿托伐他汀干预实验研究

目的探讨靶向LOX-1的近红外分子探针示踪小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块及评价阿托伐他汀干预的可行性。材料与方法采用12周龄Apo E-/-小鼠经高脂高糖饮食喂养16周建立AS模型,C57小鼠作为对照。基线实验分为靶向探针组(n=5)、竞争性抑制组(n=4)、碱性磷酸盐溶液(PBS)组(n=5)及对照C57组(n=5),经小鼠尾静脉注入1 mg/kg靶向探针或PBS,24 h后行近红外荧光成像(NIRF)。干预实验将Apo E-/-小鼠随机分为对照组和干预组(n=5,饮食中不加或加阿托伐他汀干预6周)。采用油红O染色鉴定斑块面积。斑块面积与NIRF信号分布之间的关系采用线性相关分析。结果 Apo E-/-小鼠注入anti-LOX-1-NIR797探针24 h后,NIRF示主动脉斑块区见强荧光信号,竞争性抑制组斑块SNR显著降低,而对照组C57小鼠注入靶向探针或Apo E-/-小鼠注入PBS时,其主动脉斑块信噪比较弱(P<0.01)。实验组Apo E-/-小鼠主动脉油红O染色和NIRF的阳性面积呈正相关(r=0.917,P<0.001)。阿托伐他汀干预组anti-LOX-1-NIR797信号较对照组显著降低、腹主动脉斑块面积减少(P<0.05)。结论应用靶向LOX-1的近红外探针在NIRF平台可有效检测Apo E-/-小鼠AS斑块并评价阿托伐他汀的干预效果。

血管平滑肌细胞与血管性病变发生的分子成像研究进展

血管平滑肌细胞(VSMC)是构成血管壁结构及维持血管张力的主要细胞,在血管再狭窄、动脉粥样硬化等多种血管病变中发挥着关键作用。随着分子影像学的发展,血管平滑肌细胞层面的分子成像研究日益受到重视。对VSMC在病理状态下的表型转化、增殖、迁移及分子成像研究进展予以综述,旨在提高对血管再狭窄及动脉粥样硬化形成等血管性疾病的诊治水平。

人血栓调节蛋白基因转染兔内皮祖细胞的体外实验研究

目的探讨人血栓调节蛋白(hTM)基因转染兔内皮祖细胞(EPCs)的可行性及效率,为hTM修饰的EPCs活体移植预防经皮腔内血管成形术术后血管内再狭窄提供实验依据。方法采用基因工程方法构建重组质粒pcDNA3.1-hTM。梯度离心法分离兔外周血单个核细胞(MNCs),贴壁筛选出EPCs,通过免疫组化检测其CD34、vWF、KDR等内皮系抗原,通过Dil-ac-LDL及FITC-UEA-1荧光染料双吞实验进一步表征EPCs pcDNA3.1-hTM转染EPCs,转染48 h后行细胞免疫荧光染色,72 h后行Western印迹检测比较重组质粒转染组、空载质粒转染组和对照组hTM表达水平。转染后分别于第3、4、5天采用四氮噻唑蓝法(MTT)比较各组细胞增殖活性。结果双酶切及基因测序鉴定均证实pcDNA3.1-hTM重组质粒构建成功;细胞表面抗原及免疫荧光双标实验表明所培养细胞为EPCs。转染后的直接免疫荧光实验及Western印迹检测证实hTM在重组质粒转染组的表达高于对照组;MTT比色实验示重组质粒转染组、空载质粒组、空白对照组在第3、4、5天吸光度值差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建pcDNA3.1-hTM重组质粒,转染兔外周血EPCs后可使EPCs成功表达TM,且对EPCs的活力、增殖等生物学性质无明显影响。

抓住核心问题，卓有成效地开展分子影像学研究

医学领域正悄然发生着一场革命，特别是人类基因组计划的完成，为实现个体化危险因素的评估、预防和医学干预提供了可能。伴随不断涌现的“组科学（omics）”，如功能基因组学、蛋白组学、药物基因组学等研究的进展及系统生物学的推广，个体化医疗（personalized medicine）将逐渐成为现实。分子影像能够无创或微创、可重复地提供在体、定量、实时、可视化分子及基因信息，甚至是多分子相互作用的信息，这些独特、真实的个体信息正是个体化医疗的前提。

7.0T micro-MRI评价局部应用丝裂霉素C和消旋聚乳酸膜抑制大鼠硬膜外粘连及瘢痕形成

目的应用7.0Tmicro-MR比较单独应用丝裂霉素C(MMC)、消旋聚乳酸(DL-PLA)膜以及二者联合应用(MMC+DL-PLA膜)时抑制大鼠椎板切除术后硬膜外粘连的效果。方法将16只SD大鼠随机分为4组,每组4只,椎板切除术后于硬膜外给予不同局部处理:单纯MMC组局部应用MMC 0.67mg/ml;单纯DL-PLA膜组给予生理盐水和0.05mm厚DL-PLA膜;MMC+DL-PLA膜组给予MMC 0.67mg/ml和0.05mm厚DL-PLA膜;对照组单纯应用生理盐水。术后4周处死大鼠,分别行7.0Tmicro-MR扫描及瘢痕组织面积测定,并于镜下观察硬脊膜与后方瘢痕组织粘连情况。结果单纯MMC组和单纯DL-PLA膜组硬膜外瘢痕组织较疏松,瘢痕面积小,与硬脊膜部分粘连。MMC+DL-PLA膜组硬膜外瘢痕组织较疏松,瘢痕面积更小,与硬脊膜未形成明显粘连。对照组标本硬膜外瘢痕组织致密,瘢痕面积大,与硬脊膜形成紧密粘连。结论局部单独应用浓度为0.67mg/ml的MMC或0.05mm厚的DL-PLA膜均能减少硬膜外瘢痕组织增生,二者联合应用时效果更显著。

大鼠眼球的高场磁共振成像研究

该文旨在研究微型磁共振(MRI)对大鼠眼球的成像效果和应用.通过对10只SD大鼠的20只眼球进行7.0 T MRI检查,应用常规T1WI和T2WI序列高分辨率扫描;观察MRI图像上大鼠眼球的结构,并比较MRI测量与组织学显微镜下测量视网膜厚度结果.磁共振扫描清楚地显示了所有受试大鼠眼球的主要结构,包括角膜、晶状体、玻璃体、视网膜、巩膜、虹膜、睫状体、视神经.球壁结构磁共振图像层次与组织学结构层次有良好对应性;磁共振视网膜厚度测量值与显微镜下视网膜厚度测量数据进行配对t检验,P>0.05,二者无显著差异.由此得出的结论是小动物MRI可以对大鼠眼球细微解剖结构进行无创性的成像,为我们提供了一个研究大鼠眼科疾病模型的形态学及功能变化的手段.

磁探针标记人内皮型一氧化氮合酶基因修饰的内皮祖细胞及其体外磁共振成像实验研究

目的人内皮型一氧化氮合酶（heNOS）基因体外修饰兔外周血来源的内皮祖细胞（EPC）后，应用纳米磁探针三氧化二铁（Fe2O3）一精氨酸（arginine）复合物体外标记基因修饰的EPC，磁共振（MR）进行标记细胞成像。方法制备Fe2O3-arginine复合物。分离兔外周血单个核细胞，贴壁法筛选出EPC，传代培养，用脂质体Lipofectamine^TM 2000体外转染heNOS基因至EPC，转染后48h对基因修饰EPC进行磁探针标记，普鲁士蓝染色显示细胞内铁，Western blot检测heNOS基因表达情况，四氮噻唑蓝（MTT）比色试验评价磁探针标记基因修饰EPC后对细胞生长状况的影响，流式细胞分析检测标记、未标记细胞的凋亡，应用磁共振的T，W、T2WI、T2 WI3个序列进行细胞群成像。结果普鲁士蓝染色可见铁颗粒位于细胞质内，标记率与标记的未修饰基因组EPC相似，都接近100％。MTT比色试验示Fe2O3-arginine标记后第3、4、5天，标记的基因修饰细胞组、未修饰基因细胞组的吸光度值与未标记者比较，差异无统计学意义。流式细胞分析结果显示Fe2O3-arginine标记后细胞凋亡与未标记细胞间差异无统计学意义。磁共振成像显示标记的基因修饰细胞群信号强度的变化与标记的未修饰基因细胞相似，两者之间差异无统计学意义，且两者均较未标记细胞群信号低，以T2WI的信号强度变化率最大，标记后7d的信号强度变化率均较标记后1d者下降。结论使用脂质体可以成功地将外源heNOS基因转染进兔外周血EPC中并在某中有效表达，Fe2O3-arginine可以有效标记heNOS基因修饰的EPC，其对细胞的活力、增殖等生物学特性无明显影响。临床应用型1．5TMR可在体外进行标记细胞群成像，间接反映干细胞的数量和分裂增殖状态。

静息态脑功能磁共振的低频振荡信号及其应用进展

功能磁共振是目前研究人脑工作的有效手段。通过局部刺激诱导脑血氧水平的血液动力学改变，从而间接反应神经活动情况。大部分功能磁共振研究是通过比较刺激组和对照组（或者基线）血氧水平依赖（bloodoxygenationlevel—dependent，BOLD）信号强度的改变，因此对照组的精心设计能使得特殊刺激的神经活动信号改变显得更有意义。

2型糖尿病患者认知障碍及其功能磁共振成像研究进展

一、糖尿病脑病的概念 随着社会发展及人们生活方式的改变，全球范围内糖尿病患者逐年增加，世界卫生组织最新统计数据显示：全球约有3．47亿糖尿病患者。在中国糖尿病的患病形势更为严峻，2010年国家疾病控制中心和中华医学会内分泌学会调查显示，我国18岁以上成年人糖尿病总体发病率达11．6％，老年人中超过20．4％患有糖尿病，其中90．0％以上为2型糖尿病心，本文主要综述2型糖尿病的相关研究进展。

小鼠脾源性内皮祖细胞培养及7．0T磁共振单细胞成像初探

目的建立一种小鼠脾源性内皮祖细胞的培养方法，探讨7．0T磁共振（7．0TMR）系统对磁标记单细胞成像的可行性。方法密度梯度离心法分离脾脏单个核细胞，诱导培养得到内皮祖细胞（EPC）。免疫化学、荧光染色鉴定细胞特性。Fe2O3-PLL标记细胞，普鲁士蓝染色，MTT法评价Fe2O3-PLL对细胞生长的影响，邻菲哕啉法定量分析细胞内铁含量。7．0TMR不同序列体外单细胞成像。结果小鼠脾脏单个核细胞经体外诱导培养呈内皮细胞形态，表达EPC表面标志物CD31、CD34、vWF，显示内吞乙酰化低密度脂蛋白（acLDL）、结合凝集素1（UEA-1）等内皮细胞的功能。MTT检测Fe2O3-PLL标记对细胞增殖活力影响不明显，标记组与未标记组吸光度（A）值比较第4天至第7天差异均无统计学意义（第4天，t=2．81；第5天，t=-1．87；第6天，t=-0．298；第7天，t=-0．115；P均〉0．05）。磁标记单细胞能够在7．0TMR检测中成像，自旋回波序列（MSME）图像中标记细胞显示灰度高于梯度回波序列（2D-FLASH），MSME序列图像标记细胞平均导致信号缺失体素个数为20．2个，而2D—FLASH序列图像为30．1个，差异具有统计学意义（t=15．2，P〈0．05）。结论小鼠脾脏单个核细胞可诱导分化为EPC。在7．0TMR检测中Fe2O3-PLL标记的EPC能够实现体外单细胞成像。