银杏叶片提取物EGB761联合高压氧治疗阿尔茨海默病的疗效分析

目的:研究应用高压氧(HBO)联合银杏叶片提取物(EGB761)治疗阿尔茨海默病(AD)的临床疗效及机制。方法:纳入2013年12月至2016年6月南京脑科医院初诊断AD患者共120例,按随机数字法将120例患者随机分为对照组、HBO治疗组、EGB761治疗组、HBO联合EGB761治疗组。所有患者治疗前后进行MMSE、ADL、ADAS-Cog量表评估,并抽血检测TGF-β_1、IL-1β、SOD、MDA、GSH-PX水平。结果:HBO治疗组及EGB761治疗组量表评估较基线时评分均有明显的改善;此外,联合使用HBO及EGB761较单用HBO或EGB761治疗改善更明显;HBO组、EGB761组和HBO+EGB76l组的血清SOD活性、GSH-PX、TGF-β_1的含量水平均提高,MDA及IL-1β水平降低,且HBO联合EGB761治疗组血清中相关因子水平的改变更为显著。结论:HBO联合EGB761对改善AD患者认知能力、日常生活活动能力效果确切,可能与其抑制氧化自由基及炎症因子的过度损伤有关。

高压氧加自由基拮抗剂对大鼠肝脏基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的:观察高压氧加自由基拮抗剂对大鼠肝脏损伤早期及肝纤维化形成过程中肝脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响方法:用 CCl_4建立大鼠肝纤维化模型,在2wk 和8wk 分别给予高压氧结合自由基拮抗剂、高压氧、自由基拮抗剂处理,放免法测定血清透明质酸(HA)的含量,以了解细胞外基质合成情况,免疫组化法检测肝组织 MMP-2蛋白以及其调节相关的生长因子 TGF-β1 蛋白的表达;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测 MMP-2 mRNA 水平.结果:实验2wk 末模型组高压氧结合自由基拮抗剂组肝脂肪变性和水样变性及点状坏死与模型组相比明显减轻,MMP-2蛋白及 mRNA,TGF-β1蛋白表达均低于模型组,差异显著(MMP-2:5.04±1.34 vs 56.75±3.03,P<0.01;MMP-2mRNA:0.155±0.005 vs 0.547±0.013.P<0.01;TGF-β1:3.28±0.33 vs 4.96±0.28,P<0.01).血清 HA虽低于模型组,但无显著差异(P>0.05).实验8wk 末模型组肝小叶内纤维结缔组织增生明显并形成粗细不等的纤维条索,高压氧结合自由基拮抗剂组以肝细胞脂变和细胞水肿为主,纤维结缔组织无明显增生,肝组织 MMP-2蛋白及 mRNA,TGF-β1蛋白表达和血清 HA 水平与模型组相比均明显为低(MMP-2:12.53±2.51 vs 160.57±5.54, P<0.01;MMP-2 mRNA:0.506±0.013 vs 0.685±0.014,P<0.01;TGF-β1:4.97±0.35 vs 7.76±0.39,P<0.01;HA:116.8±17.7μg/L vs 87.8±31.6μg/LP<0.01).高压氧组、自由基拮抗剂组在2wk 末和8wk 末肝损伤略轻于模型组,MMP-2蛋白和 TGF-β1蛋白表达均低于模型组,且高压氧组 MMP-2 mRNA 表达亦较模型组低.结论:高压氧结合自由基拮抗剂可以降低 CCl_4损伤大鼠肝脏 MMP-2表达,可以迟滞肝纤维化病变的发展.

高压氧对小鼠CT26结肠腺癌细胞周期和荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的探讨高压氧(HBO)对小鼠CT26结肠癌细胞周期和荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法应用流式细胞仪检测对照组和HBO组CT26癌细胞的细胞周期;建立小鼠结肠癌移植瘤模型,观察0.2MPaHBO对CT26癌细胞移植瘤生长的影响。结果对照组细胞在G0G1期、S期、G2M期的比例分别为74.82%、20.38%、4.80%;而HBO后12h组为66.48%、33.16%、0.36%,HBO后24h组为55.89%、40.79%、3.32%。HBO组小鼠肿瘤的体积和重量较模型对照组降低,肿瘤体积抑制率为32.39%,重量抑制率为35.77%。结论HBO可使CT26细胞在S期积蓄,并抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长。

高压氧联合化疗药物对结肠腺癌细胞CT26小鼠移植瘤生长的影响

目的:探讨高压氧联合化疗药物对结肠腺癌细胞CT26小鼠移植瘤生长的影响。方法:建立小鼠结肠腺癌移植瘤模型,观察0．2 Mpa HBO及联合化疗药物5-FU或紫杉醇对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,计算肿瘤抑制率;用流式细胞仪观察0．2 Mpa HBO对CT26细胞周期的影响。结果:动物实验结果显示:HBO组小鼠肿瘤体积抑制率为:22．39％,肿瘤质量抑制率为:25．77％;5-FU组分别为:42．38％,43．61％;5-FU+HBO组分别为:72．10％,71．47％;紫杉醇组分别为:26．31％,23．04％;紫杉醇+HBO分别为: 33．24％,30．96％。5-FU+HBO组与5-FU组及HBO组相比较有显著性差异(p<0．01);紫杉醇+HBO组与紫杉醇组及HBO组相比差异不明显。流式细胞仪检测结果显示:0．2 Mpa HBO诱导CT26细胞在S期积蓄(G0／G1期(55．89％)、S期(40．79％)、G2／M期(3．32％))。结论:0．2 Mpa HBO可抑制了CT26结肠腺癌小鼠移植瘤的生长,并能增强细胞周期特异性化疗药物的敏感性。

高压氧环境下辅以动态关节松动术治疗颈性眩晕的疗效观察

目的观察在高压氧环境下辅以动态关节松动术治疗颈性眩晕(CV)的疗效。方法采用随机数字表法将68例颈性眩晕(CV)患者分为观察组及对照组,每组34例。2组患者均常规给予超短波治疗,另外观察组在0.2 MPa高压氧(HBO)环境下进行动态关节松动术治疗;对照组则在普通治疗室内进行动态关节松动术治疗。上述关节松动术每次治疗15 min,每周治疗5 d,共持续治疗2周。于治疗前、治疗2 d、4 d、1周、2周及随访2个月时分别采用颈性眩晕症状与功能评估量表(ESCV)对2组患者进行评定,同时记录每日眩晕发作次数;于治疗前、治疗2周及随访2个月时采用经颅多普勒超声(TCD)检测2组患者椎动脉(VA)及基底动脉(BA)平均血流速度。结果治疗前2组患者每日眩晕次数、ESCV评分、VA及BA平均血流速度组间差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后各时间点发现2组患者上述各项疗效指标均较治疗前明显改善(P<0.05),并且观察组在治疗2周期间及随访2个月时其ESCV评分、每日眩晕次数、VA及BA平均血流速度等均明显优于同期对照组水平,组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论在高压氧环境下辅以动态关节松动术能更有效改善颈性眩晕相关症状,减少颈性眩晕发作频率,该联合疗法值得临床推广、应用。

高压氧对结肠癌LoVo细胞周期的影响

目的探讨高压氧(HBO)对结肠癌LoVo细胞周期的影响。方法应用流式细胞仪检测不同压力及时间高压氧暴露后LoVo细胞的细胞周期改变。结果①0．2 MPa HBO可使LoVo细胞在细胞周期S期积聚,与0．15、0．25．MPa HBO暴露组比较,差异具有极显著性(P<0．01);②0．2 MPa HBO暴露后24 h组S期细胞积聚明显高于HBO暴露后12 h和48 h组(P<O．01);③0．2MPa HBO暴露后24 h组的S期细胞积聚高于其他组别(P<0．01)。结论高压氧可诱导肿瘤细胞进入细胞周期并在S期细胞积聚,细胞周期同步化提示高压氧可作为大肠肿瘤放疗和化疗的辅助治疗。

高压氧对Aβ25—35诱导大鼠认知和记忆障碍及其海马神经元凋亡的影响

目的探讨高压氧（HBO）治疗对β-淀粉样蛋白（Aβ）25—35所致拟阿尔茨海默病（AD）模型大鼠认知和记忆功能的改变及其海马神经元凋亡情况的影响。方法选取健康成年雄性SpragueDawley（SD）大鼠48只，按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组和HBO治疗组，每组12只。正常对照组不做任何处理。其余各组大鼠给予10％水合氯醛（4m1）腹腔注射麻醉，假手术组大鼠每侧海马注射5μl生理盐水；造模大鼠（模型组和HBO治疗组）每侧海马注射5μl的A325—35制备拟AD大鼠痴呆模型。造模成功后，模型组大鼠不做任何治疗处理；HBO治疗组大鼠造模2周后，常规HBO治疗，每日1次，10d为1个疗程，中间休息3d，共2个疗程。采用Morris水迷宫法观察各组大鼠空间记忆能力的改变，TUNEL染色观察大鼠海马神经元凋亡情况的改变，同时检测海马组织凋亡相关基因Bcl-2和Bax的mRNA、蛋白表达的改变。结果水迷宫实验中，第5天和第6天HBO治疗组大鼠的逃避潜伏期与模型组比较显著缩短（33．4±4．5）s比（48．1±2．7）s，（20．8±1．7）s比（40．5±1．9）S，P〈0．05，空间探索实验中HBO治疗组大鼠在原平台所在象限的时间及穿过原平台的次数较模型组显著增加（35．8±5．6）％比（21．1±3．8）％，（4．8±1．1）次比（3．1±1．2）次，P〈0．05。TUNEL染色中，模型组海马神经元中胞核呈现棕色凋亡形态的较多，而HBO治疗组则见少数凋亡的海马神经元。海马组织凋亡基因检测中，HBO治疗组Bcl-2mRNA和蛋白的表达显著高于模型组（P〈0．05），其BaxmRNA和蛋白的表达则相应地降低。结论HBO可能通过抑制Aβ25—35诱导的海马神经元凋亡而改善AD大鼠模型的认知和记忆能力。

海马区注射Aβ_(25-35)对大鼠学习记忆能力的影响

目的:对大鼠大脑海马区注射凝聚态的Aβ25-35,观察Aβ25-35对大鼠空间学习、记忆能力的影响以及大鼠脑组织的病理学改变。方法:SD大鼠36只,雌雄各半,将大鼠分为正常组、生理盐水组(双侧海马区各注射5μl生理盐水)、模型组(双侧海马区各注射5μl Aβ25-35),注射后1周进行水迷宫实验,连续7 d,2次.d-1,检测大鼠空间学习、记忆能力的改变状况。模型制作30 d后对各组大鼠脑组织进行苏木素-伊红(HE)染色,在光学显微镜下观察各组脑组织的形态学变化。结果:行为学实验结果显示实验第5、6天模型组的潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少,与生理盐水组和正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);病理学实验显示正常组海马神经元排列整齐、着色均匀,而模型组的海马神经元排列紊乱、细胞核固缩、不规则、胞浆浓缩。结论:大鼠双侧海马区注射Aβ25-35能够制作拟阿尔茨海默病模型。

高压氧联合细胞周期特异性药物对结肠腺癌Lovo细胞的杀伤作用

目的探讨高压氧（HBO）联合细胞周期特异性药物氟尿嘧啶对结肠腺癌Lovo细胞的杀伤作用。方法0．20MPaHBO暴露后联合应用不同浓度氟尿嘧啶处理结肠腺癌Lovo细胞。流式细胞仪检测细胞周期，四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察其对结肠腺癌细胞增殖的抑制作用。结果①HBO暴露后Lovo细胞S期细胞积聚较对照组明显增多（P〈0．01），HBO暴露后24h组Lovo细胞s期积聚明显高于HBO暴露后12h组和48h组（P〈0．01）；②0．20MPaHBO暴露后24h联合应用低浓度氟尿嘧啶（≤8uM）作用Lovo细胞12h后，HBO联合氟尿嘧啶组癌细胞增殖的抑制程度与氟尿嘧啶组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；药物作用48h后，HBO联合氟尿嘧啶组与氟尿嘧啶组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；⑧中浓度和高浓度（16、32和64uM）的氟尿嘧啶作用于Lovo细胞12h，HBO联合氟尿嘧啶组与氟尿嘧啶组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；药物作用48h后，HBO联合氟尿嘧啶组与氟尿嘧啶组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论0．20MPaHBO暴露可提高细胞周期特异性药物氟尿嘧啶对Lovo细胞的杀伤作用，尤其增强低浓度氟尿嘧啶对结肠腺癌细胞的杀伤作用。