一个更加通用的抗体可变区cDNA体外扩增法

在对一组单克隆抗体可变区ｃＤＮＡ进行体外扩增时，为了克服通用可变区引物的局限性，我们在ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ上合成固相ｃＤＮＡ，并采用一种称为“单引物预掺入ＰＣＲ”的新ＰＣＲ程序，即：在只有一侧引物存在的情况下，先让ＰＣＲ反应在低退火延伸温度下运转３个循环；追加另一侧引物后，转入常规ＰＣＲ循环。新方法扩展了“通用引物”的适用范围，并为引物设计和一些其它基因的ＰＣＲ放大提供了思路。

5株单克隆天然自身抗体的V基因利用

越来越多的证据表明,在正常动物和人体血清中存在着大量自身抗体.它们以低亲和力、多反应性(polyreactivity)为特点,被称为天然自身抗体,或NAA(naturalautoantibody),以区别于病理情况下出现的自身抗体.NAA的存在和被发现,向传统的“自身抗体有害”的观点提出了挑战,给当代免疫学提供了新的研究课题.关于NAA的发生机制和生理意义,目前尚无定论.

单克隆抗体可变区基因PCR扩增产物的直接测序

利用一组通用引物对单克隆抗体可变区ｃＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增。扩增产物经纯化后通过一个以链终止法为基础的“循环测序”程序直接进行序列测定，其中所用四种双脱氧核苷酸分别带不同的荧光标记，测序引物选自同一组通用引物。测序电泳和数据收集在ＤＮＡ测序仪上进行。本法简单、快速、准确，是解析抗体可变区序列的有效手段。