黄芪甲苷对体外神经干细胞增殖作用影响的研究

目的探讨黄芪甲苷(astragaloside,AS)对神经干细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠胎鼠神经干细胞,Nestin免疫化学染色鉴定NSCs,BrdU标记鉴定NSCs增殖。BrdU标记免疫细胞化学染色检测神经干细胞增殖能力。实时定量PCR技术探讨黄芪甲苷促进NSCs增殖的作用机制。结果Nestin鉴定为阳性,Brdu标记亦呈阳性;BrdU标记结果表明,黄芪甲苷高、中、低剂量组NSCs的增殖率明显提高(P<0.05,P<0.01)。实时定量PCR结果表明在诱导NSCs增殖过程中,黄芪甲苷高剂量组Hes5基因表达增加(P<0.05)。结论黄芪甲苷对NSCs增殖具有明显的诱导作用,其可能通过上调与细胞增殖相关基因Hes1、Hes5、cyclinD1表达而起作用,但也可能调节与其它增殖通路有关。

不同频率电针对周围神经再生与修复影响的临床与实验研究

[目的]通过实验研究使电针疗法取得理想的治疗效果,促进患者的功能恢复,提高生活质量。[方法]通过大鼠坐骨神经横断的方法构建神经再生室模型,分别采用不同频率电针针刺大鼠患侧环跳、足三里、三阴交治疗,采用图像分析系统分析,观察大鼠坐骨神经再生和修复情况。实验筛选电针最佳治疗参数及治疗时机再临床应用。[结果]电针能够改善神经肌肉结构、代谢和功能,改善神经肌肉动作电位,运动神经传导速度以及肌肉收缩力,促进损伤神经再生和神经肌肉的神经再支配。[结论]变频电针能够有效促进损伤周围神经的再生和修复,与低频电针比较,以5Hz电针效果最佳,变频电针效果次之,变频Ⅱ电针效果再次之,早期治疗效果明显。

六味地黄多糖体外抗肿瘤作用的初步研究

目的 六味地黄多糖 Ｃ Ａ４３ Ｂ 和 Ｐ３ 是具有免疫调节作用的活性多糖，在此基础上进一步观察其体外对肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法 用［３ Ｈ］ Ｔｄ Ｒ 参入法，琼脂克隆形成法及细胞形态学和 Ｎ Ｂ Ｔ 还原染色等方法观察其对小鼠淋巴细胞白血病细胞系 Ｌ１２１０ 、人早幼粒白血病细胞系 Ｈ Ｌ６０增殖反应、克隆存活率的影响以及对 Ｈ Ｌ６０ 细胞的分化诱导作用。结果 Ｃ Ａ４３ Ｂ和 Ｐ３ 对 Ｌ１２１０ 和 Ｈ Ｌ６０ 细胞的体外增殖反应和克隆形成率具有不同程度的抑制作用，对 Ｈ Ｌ６０细胞的分化形态及 Ｎ Ｂ Ｔ 阳性细胞率无明显影响，但可以使 Ｈ Ｌ６０ 细胞体积明显缩小。结论 六味地黄多糖 Ｃ Ａ４３ Ｂ 和 Ｐ３ 对肿瘤细胞生长有抑制作用，可能是具有免疫调节和直接抑瘤双重作用的活性多糖；另外提示 Ｃ Ａ４３ Ｂ 和 Ｐ３ 对 Ｈ Ｌ６０

经络美容的研究

经络美容的研究日本明治针灸大学森和北京联大中医药学院（１００００７）佘靖日本东洋医学研究所天野影子近年来，中医学在世界上影响不断扩大，各国都在积极研究其应用。笔者在日本根据中医经络学说，循经取穴按摩进行美容，同时对其疗效进行试验观察研究。首先以１８岁...

江户医学馆的教育——考证医学的奠基

由幕府医官多纪氏主持的医学馆,是江户幕府直辖的医学校,它经历了滥觞、兴隆(百日教育)、确立(官办化之初)、停滞(元简殁)、昌盛(天保改革后)、衰落(元坚殁)等阶段.医学馆始终以重视历史文献的学风,寻求安全、实用的医术.

人参茎叶多糖的研究

人参为传统名贵的中药。近年来,人们对其化学成分及其药理活性进行了广泛、深入的研究。继人参皂甙后,人参多糖的化学结构和药理作用也已引起了人们的注目,并已有人参多糖的制剂作为抗肿瘤药物在临床应用。但人参生长缓慢,生长所需环境苛刻,通常需6—7年才能收获。其茎叶每年可收获一次,目前已发现具较高的药用价值,茎叶所含的多糖类成分抗补体活性高于根中的多糖类成分。

人参皂苷Rg1干预骨髓间充质干细胞转化为多潜能干细胞关键基因mRNA的表达

背景:将成体细胞重编程为诱导多潜能干细胞方案主要通过反转录病毒将Oct-4,Sox2,c-Myc,Klf4等基因转入成体细胞而实现。目的:观察人参皂苷Rg1作用于骨髓间充质干细胞后,对成体细胞向诱导多潜能干细胞转化的关键性基因Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4、NanogmRNA表达的影响。方法:培养骨髓间充质干细胞,对照组培养基为α-MEM,体积分数5%FBS,1%双抗;用药组培养基为α-MEM,体积分数15%FBS,1000U/mLRatESGRO,1%双抗,并加入6.25μmol/L和12.5μmol/L人参皂苷Rg1。检测骨髓间充质干细胞Oct4,Sox2,c-Myc,Klf4,Nanog等mRNA的表达。结果与结论:人参皂苷Rg16.25μmol/L培养30d,Nanog、c-Myc、Oct、Klf4、Sox2mRNA表达均有升高,且Nanog、c-Myc与对照组差异有显著性意义。人参皂苷Rg1能促进骨髓间充质干细胞表达c-Myc,Nanog,但Nanog阳性的诱导多潜能干细胞在基因表达谱上很难与胚胎干细胞区分出来,提示人参皂苷Rg1对骨髓间充质干细胞向诱导多潜能干细胞转化可能具有促进作用。

黄芪甲苷对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响

目的观察黄芪甲苷对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响,并探讨其作用机理。方法体外分离培养大鼠胚胎神经干细胞,Nestin免疫细胞化学染色进行神经干细胞的鉴定,BrdU标记鉴定增殖。采用稀释法检测黄芪甲苷高、中、低剂量组(6、0.6、0.06μmol/L)对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响。结果 Nestin染色为阳性,BrdU的增殖鉴定为阳性。与对照组相比,黄芪甲苷高、中、低剂量组神经球生成数目明显增加。结论黄芪甲苷能够明显增加神经球生成数目,具有促进胚胎神经干细胞体外增殖的作用。

不同频率针刺手法诱发脊髓背角广动力范围神经元放电模式的非线性分析

目的应用非线性动力学方法探讨不同频率针刺手法诱发脊髓背角广动力范围(wide dynamic range,WDR)神经元放电信号的编码特征。方法采用玻璃微电极细胞外记录技术判定SD大鼠脊髓背角WDR神经元;不同频率(0.5、1、2、3Hz)均匀提插手法针刺大鼠足三里穴;利用非线性动力学方法提取并分析脊髓背角WDR神经元放电信号中所包含的与针刺频率相关的特征性信息,通过计算放电频率、峰峰间期、嵌入维数、最大Lyapunov指数以及Lempel-Ziv复杂度,得到不同频率针刺手法诱发WDR神经元放电信号的编码特征。结果 4种不同频率针刺手法表现出不同的特征,WDR神经元放电频率的变化与针刺手法频率的改变并非呈简单的线性相关;针刺作用下WDR神经元的放电信号具有混沌特性。结论采用非线性动力学的相关术语描述和归纳针刺电信号的放电节律形式是适用可行的,不同频率针刺手法能够在脊髓背角水平干预神经电信息的传导、编码和加工过程。

人参皂苷Rg_1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响。方法从孕16天SD大鼠胚胎脑组织中分离培养胚胎神经干细胞,免疫组化法进行神经干细胞的鉴定及增殖鉴定,采用稀释法筛选和检测人参皂苷Rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响。结果剂量筛选结果显示,人参皂苷Rg1组(100、4、0.8μmol/L)神经球数明显增加。选定人参皂苷Rg140、4、0.4μmol/L作为高、中、低剂量进行进一步实验研究,与对照组相比,人参皂苷Rg1高、中、低剂量组神经球生成数目明显增加。结论人参皂苷Rg1可以明显增加神经球生成数目,具有促进胚胎神经干细胞体外增殖的作用。

甘草酸对骨髓间充质细胞诱导为多潜能干细胞重编程关键基因表达的影响

目的:观察甘草酸作用于骨髓间充质干细胞(BMSCs)后对成体细胞向诱导多潜能干细胞(inducedpluripotent stem cells,iPS)转化的关键基因Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4、Nanog mRNA表达的影响,探索将BMSCs等成体细胞藉由中药提取物诱导为iPS的无病毒载体、无基因整合的方法。方法:培养BMSCs,分别加入6.25μmol/L、12.5μmol/L甘草酸,并设置空白对照组,培养15 d、30 d后检测Oct4,Sox2,c-Myc,Klf4,Nanog mRNA的表达。结果:甘草酸6.25μmol/L培养15 d,能升高BMSCs细胞Nanog、c-Myc、Oct4、Sox2mRNA表达,且Nanog与正常组比较差异有统计学意义;培养30 d,Nanog、Sox2、c-Myc,虽与正常组比较差异均无统计学意义,但仍高于正常;甘草酸12.5μmol/L培养15 d对BMSCs Klf4、Sox2、c-Myc、Nanog、Oct4 mRNA表达无明显影响,培养30 d可促进BM-SCs、c-Myc、Nanog mRNA的表达,与正常组比较差异有统计学意义。结论:甘草酸能增加对骨髓间充质细胞表达iPS诱导的关键性基因Nanog等的表达,而Nanog阳性的iPS细胞在基因表达谱上很难与胚胎干细胞区分出来,因此我们认为甘草酸可能对BMSCs向iPS转化具有促进作用。

联绵词淋沥与淋露

中医典籍多次出现“淋沥”一词,多数注家未予训释,还有“淋沥”音转而成的“淋露”,历代注家多望文生训。对于这个双声联绵词的解释,日本学者多纪元简和森立之独具慧眼。今采他山之石,抒千虑一得,以质诸同好。1 淋沥《金匮要略》“果实菜谷禁忌并治第二十五”云:“桃子多...

黄芩苷干预缺氧星形胶质细胞对神经前体细胞迁移的影响

[目的]探讨黄芩苷的神经保护作用与促进内源性神经前体细胞(NPC)的关系。[方法]以Wistar大鼠双侧大脑皮质为标本,培养星形胶质细胞,采用聚合酶链式反应(PCR)方法检测趋化因子mRNA的表达。[结果]黄芩苷处理的缺氧星形胶质细胞能促进NPC的迁移。[结论]黄芩苷对神经有保护作用,为临床应用提供了实验依据。

体外培养胚胎神经干细胞的增殖及中药有效成分对其增殖能力的影响

[目的]探讨中药有效成分对神经干细胞(NSCs)增值能力的影响并探讨其作用机制。[方法]从16天SD大鼠胚胎脑体外培养原代NSCs,增生并传代。用Nestin免疫细胞—化学染色(ICC)鉴定NSCs,用BrdU染色鉴定NSCs增生。限量稀释法观察了几种中药有效成分对NSCs增生的作用,如人参皂苷Rg1和黄芪皂苷(ASIV)。[结果]不同剂量的人参皂苷Rg1和黄芪皂苷ASIV能促进神经干细胞的体外增殖。与对照组比较,Rg1和AS的3种剂量可使神经球生成数目增加(P<0.05或P<0.01)。其中两种药物成分低剂量组比其他组效果更显著。Hes1,Hes5和细胞周期蛋白D1的实时定量逆转录—聚合酶链(RT-PCR)分析显示Rg1高剂量组的Hes1基因表达和AS高剂量组Hes5基因表达增长明显。同时,Rg1中剂量组的Hes5基因表达轻微增加(P>0.05)。两药各剂量组的周期蛋白D1(CyclinD1)基因表达可见有增加,但无统计学意义(P>0.05)。[结论]Rg1和ASIV可明显促进神经干细胞体外增殖,实时定量检测结果显示Hes1、Hes5和周期蛋白D1与Rg1和AS促进神经干细胞增殖有一定关系。

锌缺乏对小鼠巨噬细胞与小肠粘膜上皮细胞的影响

用缺锌饲料制成小鼠缺锌模型,观察其外观、体重、脏体比、巨噬细胞(Mφ)与小肠粘膜上皮细胞形态等变化。给缺锌饲料2周后可见缺锌鼠(n=24)食量减少,与对照组(n=11)体重呈显著性差异,至第4周差异更大。缺锌鼠死亡率29.17％,对照组为0。缺锌鼠肝、肾、肾上腺、胸腺重量显著下降,胸腺脏体比显著下降,其他脏体比无显著差异。扫描电镜观察,缺锌组Mφ表层结构趋向简单,丝状片状伪足短而少,激活细胞比下降至56.4％(对照组81.9％,P<0.01)。透射电镜可见Mφ与小肠粘膜上皮细胞内线粒体、溶酶体数量减少,粗面内质网肿胀扩张,外周核糖体脱落并脱颗粒,高尔基体萎缩。荧光显微镜下缺锌鼠Mφ体积缩小,微丝及微管数量、粗细、荧光反应强度、定向排列均改变。Mφ吞噬指数降低至2.53±0.22,表面积缩小。说明机体内锌水平的变化,可直接影响Mφ活化,使小肠粘膜上皮、Mφ的膜结构损伤,微丝、微管改变。

中药治疗疑难病验案——柴胡疏肝汤治疗慢性胰腺炎获效显著

关于柴胡疏肝汤在上期疑难病验案中已述及,为避免重复,不再论述。现仅将柴胡疏肝汤证再录如下：①从季肋下到脐旁可触及硬的深部腹直肌,局部紧张。②腹部拘急、疼痛。③胸胁苦满。④胸痛、背痛、肩部酸痛。⑤手足厥冷。⑥恶心呕吐、食欲不振。