石金钱龟低聚肽制备工艺优化及其抑制新冠病毒的潜能

为了探究石金钱龟低聚肽作为新冠肺炎病毒(SARS-Co V-2)药物开发原料的可能性,该研究用“风味蛋白酶+木瓜蛋白酶”组合对龟肉进行酶解,通过不同酶配比、加酶量、pH和酶解时间的单因素实验和正交实验确定最优工艺条件,制备出石金钱龟低聚肽。再通过HPLC-MS分离、PeakStudio解析、PeptideRanker活性预测逐步筛选出活性较高的低聚肽,最后进行各低聚肽序列与SARS-COV-2棘突蛋白(S蛋白)的分子对接。结果显示,最佳工艺参数为风味蛋白酶:木瓜蛋白酶=7:3、加酶量7%、pH 5.5、酶解时间4 h,此时的水解度为42.56%;Peak Studio解析出可信度(ALC)>90%的肽共510条,经Peptide Ranker生物活性评估后筛选出6条低聚肽与S蛋白分子对接,低聚肽序列分别为:LDFFK、LDFFKAL、FRVL、AFRVL、AGGKPFQ、SPFRVT,其Docking Score在-138.50--169.68之间,其中LDFFKAL的Docking Score最低,为-169.68,说明该低聚肽抑制新冠肺炎病毒的潜能最强。总的来说,经工艺优化后石金钱龟龟肉的水解度大大增加,且制得的石金钱龟低聚肽有较强的抑制新冠肺炎病毒的潜能。

复合酶解制备石金钱龟龟肉多肽工艺及抗氧化性研究

为了探究石金钱龟多肽作为抗氧化功能性食品成分的可能性,本实验以石金钱龟龟肉为实验材料,在不同pH和酶解时间下,用中性蛋白酶和风味蛋白酶组合酶解制得龟肉酶解液。对各组酶解液作感官评价,并测定其水解度、总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力和·OH自由基清除能力。结果表明,各组酶解液的感官评分均在60~74分之间,感官性状良好,其中色泽、澄清程度、粘稠程度的分数随酶解时间的增长而增加,龟肉特征味、气味的分数随酶解时间的增长而降低。且各组酶解液均呈现出较好的总抗氧化活性,当酶解条件为pH=7、8h时,总抗氧化能力高达0.61mmol/L,优于阳性对照Trolox;当酶解条件为pH=7、4h时,DPPH自由基清除率最高,达61.53%;当酶解条件为pH=7、3h时,·OH的清除率最高,达28.88%,略高于阳性对照抗坏血酸。可见,石金钱龟龟肉多肽可作为新型抗氧化功能性食品开发的物质基础。