东莞市猪圆环病毒2型的血清学调查

从2004年12月～2005年4月,对东莞市26个镇、区74个猪场,16个镇屠场,共采集猪血清1766份,用酶联免疫吸附试验法检测,共检出阳性血清235份,总阳性率13.31%;阳性场46个,占所检测场的62.16%,阳性屠场3个,占所检测屠场的18.75%.血清学调查结果显示,PCV-2在东莞市猪场的感染已普遍存在.

东莞市5种猪病的血清学调查

在东莞市29个养猪场和26个屠宰场共抽取了989份猪血清,应用正向间接血凝试验对猪瘟、弓形虫、衣原体抗体进行了检测,应用酶联免疫吸附试验对伪狂犬病gE抗体进行了检测,应用虎红平板凝集试验对布鲁菌病抗体进行了检测。养猪场猪瘟的免疫合格率是84.83%,弓形虫抗体阳性检出率4.98%,衣原体抗体阳性检出率10.66%,伪狂犬病gE抗体阳性率41.47%。屠宰场的猪瘟免疫合格率是30.51%,弓形虫抗体阳性检出率1.76%,衣原体抗体阳性检出率2.47%,伪狂犬病gE抗体阳性率14.99%。布鲁菌病抗体均未检出阳性。

东莞市规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学调查

建立检测猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)酶联免疫吸附试验(ELISA),应用该方法对广东省东莞市 17个规模化猪场的216份猪血清进行检测,检出阳性血清102份,阳性率为47.2％。证实我市存在PRRS,为 该病的大面积进行血清学普查提供一种简易、快速、准确的检测方法。

广东东莞地区犬、猫弓形虫血清学调查

应用正向间接血凝试验，对东莞市2005-2006年采集的629份犬、猫血清进行了弓形虫抗体检测，其中检测的610份犬血清，抗体阳性4份，抗体阳性检出率为0．66％，检测的19份猫血清中，抗体阳性0份。

东莞地区散养家禽禽流感H5免疫效果调查

应用禽流感血凝和血凝抑制方法对东莞地区散养家禽207个场点2006年采集的1514羽份家禽血清进行检测,结果总的免疫合格率为70.74%,其中第1季度的免疫合格率为88.68%,第2季度的免疫合格率为66.37%,第3季度的免疫合格率为63.27%,第4季度的免疫合格率为71.11%。

东莞地区犬接种狂犬病疫苗后抗体水平的检测

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对东莞市采集的809份犬血清进行检测,采用SYNBIOTICS软件进行分析。结果表明,抗体阳性数265份,抗体阳性率32．76%,其中检测免疫狂犬病多联苗的血清493份,抗体阳性数55份,抗体阳性率11．16%,检测免疫狂犬病单价疫苗的血清316份,抗体阳性数210份,抗体阳性率66．46%。

一起三鸟批发市场鸡传染性喉气管炎的检疫与处理

1发病情况与症状 2006年6月20日，我站驻场检疫员按照三鸟批发场的检疫规程对进场的禽只检疫时，发现从外市运入我市三鸟批发市场的1000多只鸡有明显的发病症状，鸡只半闭眼，伸颈张口呼吸，鸡喙边带有红色的粘液，时而发出响亮的喘呜音。并且在车上发现有7只死亡的鸡只。检疫员结合具体情况和临床症状初步断定这批鸡只患有鸡传染性喉气管炎，立即禁止这批鸡入场，随车的物品和人员不得离开，并且采样送实验室诊断。

多重PCR方法检测大肠杆菌O157∶H7的初步研究

目的研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法。方法以大肠杆菌O157∶H7的O157抗原基因(rfbE基因)、鞭毛H7抗原基因(fliC基因)、粘附素基因(eaeA基因)和志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ(SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因)为扩增对象,设计能导至目的片段大小不同的5对引物,通过优化条件,建立了可用于粪便检测的大肠杆菌5重PCR。结果在同一扩增体系中,检测了5株不同来源的大肠杆菌O157∶H7及27株非大肠杆菌O157∶H7细菌。结果表明,该方法能从2株大肠杆菌O157∶H7中扩增出rfbEf、liC、eaeA、SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因,它们的大小分别为582 bp、802 bp、487 bp3、68 bp和177 bp。而另外3株大肠杆菌O157∶H7也能扩增出除eaeA、SLT-Ⅱ基因外的其它3个基因片段。表明该方法可用于检测大肠杆菌O157∶H7,还可检测细菌是否含有毒素基因。在检测27株非大肠杆菌O157∶H7,除O149出现SLT-II扩增产物和O1∶H7出现fliC基因扩增产物外,其它非大肠杆菌O157∶H7的扩增结果均为阴性,表明该方法有较高的特异性。当粪便样品经增菌培养12 h,用该5重PCR体系能检测出最初接种量为5cfu/g粪便的样品。结论本5重PCR方法具有较高的特异性和敏感性,可迅速、有效地将大肠杆菌O157∶H7与其它非大肠杆菌O157∶H7相区别,同时还能检测O157∶H7中的毒力因子。因此,通过进一步研究,本方法有望应用于临床大肠杆菌O157∶H7感染的辅助诊断。

水禽禽流感H5N1亚型改良HI抗体检测方法的研究

鉴于在采用1%鸡红细胞悬液作为指示细胞检测水禽血清的HI抗体效价水平过程中常出现非病毒性凝集情况,亟需要建立一种快速简便经济的适合水禽血清抗体效价检测的方法。本研究通过对未经处理与采用不同红细胞吸附处理被检水禽血清以1%鸡、鸭或鹅红细胞悬液进行测定其HI抗体效价的结果对比,结果表明建立采用1%与待检水禽血清同源1%红细胞悬液做指示细胞的改良HI试验比采用鸡红细胞悬液测定结果高1～1.5log2,且可以有效避免非病毒性凝集情况的出现。

禽流感油乳佐剂疫苗质量快速检测方法的建立

通过对低温冻融法、研磨法、稀释高速捣碎法、95%乙醇法及三氯甲烷法破乳效果比较,确定三氯甲烷为油乳剂疫苗的破乳剂。将不同抗原含量的H9和H5亚型灭活与非灭活疫苗破乳后分离上层水相,采用红细胞凝集(HA)试验,测定其HA价,结果发现脱乳后上层水相与未做成油乳疫苗并做相应稀释的原液的HA价下降1～3个滴度,且将不同稀释度制备H5亚型疫苗经脱乳处理后上层水相的HA价与荧光定量PCR结果基本一致。所建立的禽流感油乳剂疫苗质量的检测方法具有快速、经济、简便,尤其适合于对大批量及基层应用。

大肠杆菌O_(157):H_7 rfbE基因和fliC基因的克隆与序列分析

根据已发表的E.coliO_(157):H_7EDL933株的rfbE基因和fliC基因,设计了两对引物,分别对两个O_(157):H_7菌株的rfbE基因和一个菌株的fliC基因进行PCR,并将PCR产物克隆于pMD18-T载体质粒。测序结果表明,获得到了与理论相符的582bprfbE基因片段和802bpfliC基因片段。一株菌的rfbE基因存在无意义突变(两个)。而另一株菌fliC基因有一个有意义突变(aac→gac)