东莞市2013—2017年结核病流行病学特征分析

目的通过分析东莞市近年来结核病流行特征,为今后结核病防控策略制定提供依据。方法采用描述性流行病学研究方法,对东莞市2013—2017年新登记报告的结核病患者资料进行分析。结果2013—2017年东莞市共报告结核病患者17 361例,患者年平均发病率为41. 82/10万,主要集中在21～40岁年龄组(占60. 85%);结核病患者中,男性(11 534例)平均年报告发病率(27. 78/10万)显著高于女性(5 827例)平均年报告发病率(14. 03/10万)(2=17. 071,P=0. 002);初治患者16 978例(97. 79%),复治患者383例(2. 21%),不同年份间结核病患者治疗类型分布间差异有统计学意义(P <0. 05)。患者中,本地人口为1 748例(占10. 07%),流动人口为15 613例(占89. 93%);在各职业人群中,结核病患者以工人为主,占53. 60%,其次是家政服务人员(24. 10%),农民(5. 20%),干部职员(2. 10%)和商业服务人员(1. 90%)。结论东莞市结核病发病率近年来进一步降低,流动人口中的工人群体仍是结核病的高发人群,应加强对相应人群的宣传教育和规范化治疗。

麦角硫因的开发及其在临床医学中的初步应用

1909年麦角硫因(ergothioneine, EGT)首次被分离,是一种天然水性含硫氨基酸,具有强抗氧化能力,主要由微生物合成。作为一种极性小分子,麦角硫因在肠道有机阳离子转运体1(organic cation transporter 1,OCTN1)的帮助下穿过细胞膜,通过血液运输到肠道、肝脏和肾脏等全身器官,在预防和治疗各种疾病(如心血管疾病、肾脏疾病、糖尿病等)中发挥着重要作用。现就EGT的微生物合成、提取方法和检测手段,及其抗氧化作用在免疫性疾病中的研究进展作一概述。

多胺代谢在调控肿瘤血管生成中作用机制的研究进展

多胺(PA)是普遍存在于动植物所有组织和细胞类型中的脂族聚阳离子,与肿瘤的血管生成密切相关。该文就多胺代谢与肿瘤血管生成的关系及机制的研究进展进行综述,以期为靶向多胺代谢的临床抗肿瘤血管生成治疗提供新的理论依据。

小儿龋齿发病因素分析

目的:探讨小儿龋齿发病因素。方法:选取2017年2月至2018年2月来东莞市妇幼保健院实施儿童保健的100例小儿作为研究对象,判定龋齿发病情况,根据患儿是否合并有龋齿分为龋齿组和无龋齿组,收集两组患儿一般临床资料和相关可疑危险因素进行单因素和多因素Logistic回归分析,探究影响小儿龋齿发生的危险因素。结果:100例小儿经检查55例小儿发生龋齿,发生率为55.00%。单因素分析得出,性别、年龄、刷牙频率、吃甜食、吃酸食、饭后漱口在龋齿组和无龋齿组患儿中比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析得出,年龄、刷牙频率、吃甜食、吃酸食、饭后漱口为影响小儿龋齿发生危险因素。结论:小儿龋齿发病率较高,影响小儿龋齿发生危险因素较多,临床中应针对性进行预防和干预,以降低小儿龋齿发生率。

解脲支原体临床分离株生物被膜药物敏感性分析

目的检测解脲支原体(Ureaplasma urealytium, Uu)临床分离株生物被膜的形成及其对抗菌药物的敏感性,为Uu临床治疗提供参考。方法通过结晶紫染色半定量法检测Uu临床菌株生物被膜的形成能力;采用微量肉汤稀释法检测并分析Uu临床菌株在浮游状态与生物被膜状态下对四环素、红霉素、阿奇霉素、左氧氟沙星的敏感性。结果在所检测的25株Uu中64%(16/25)菌株能形成生物被膜,9株不能形成生物被膜。16株Uu形成生物被膜后对四环素和左氧氟沙星的最小生物被膜药物抑制浓度(minimal biofilm inhibitory concentration, MBIC)比浮游菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)高4~8倍或以上,差异有统计学意义(P<0.05);对红霉素和阿奇霉素MBICs增加的0~2倍,差异有统计学意义(P<0.05)。Uu形成生物被膜后对四环素和左氧氟沙星的耐药率显著提高,差异有统计学意义(P<0.05);对红霉素和阿奇霉素的耐药率无显著性差异(P>0.05)。9株不能形成生物被膜Uu菌株,在浮游状态和生物被膜状态培养下对所选4种抗生素体外药敏试验的MIC和MBIC的差异无统计学意义(P>0.05);对所选4种抗生素耐药率的差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论 Uu临床菌株多数可形成生物被膜,生物被膜形成后降低对四环素和喹诺酮类抗菌药物的敏感性,对阿奇霉素和红霉素的敏感性影响较小。阿奇霉素和红霉素可用于Uu生物被膜临床菌株的治疗。

2016-2018年肺结核合并呼吸道感染患者病原菌分布及药敏变化趋势分析

目的探讨2016-2018年肺结核合并呼吸道感染患者病原菌分布及药敏变化趋势分析。方法对2016年至2018年确诊为肺结核患者的深部痰或支气管灌洗液标本进行细菌分离培养,分离致病菌菌株,用全自动细菌鉴定及药敏分析系统对病原菌进行细菌鉴定及药敏试验,并分析其耐药性变化趋势。结果4906例痰或支气管灌洗液标本中分离出致病性病原菌1005株,其中革兰阴性杆菌895株(89.05%),阳性球菌28株(2.79%),真菌82株(8.16%)。主要革兰阴性杆菌对多种碳青霉烯类、喹诺酮类、氨基糖甙类药物仍保持较高的敏感性,金黄色葡萄球菌对环丙沙星、苯唑西林、克林霉素、红霉素和青霉素有较高耐药性。铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌对多种常用抗菌药物的耐药性呈逐年升高趋势。结论对于合并下呼吸道感染的肺结核患者,应根据药敏试验结果制订合理的治疗方案,并加强医院感染的防控管理。

基于LC-MS筛选肺结核耐药患者的血清代谢标志物

目的筛选潜在可用来指示不同耐药肺结核的新型血清代谢标志物,并分析其潜在机制与功能。方法收集结核药敏(DS)、单耐药异烟肼(MR-INH)、单耐药利福平(MR-RFP)、耐多药(MDR)和多耐药(PR)患者血清样本。有机试剂振荡、去蛋白、提取全部血清样本中的代谢物质,LC-MS/MS技术检测全部样本中的代谢物质。Pareto-scaling方法进行归一化,应用MetaboAnalyst 4.0软件进行差异分析,组间T检验,P≤0.05视为有差异的代谢物。进一步通过代谢物功能富集及共表达分析,明确差异代谢物的功能并探讨其作为标志物的意义与机制。结果基于LC-MS/MS技术分析发现相较于DS组,MR-INH组存在286个异常表达代谢物、MR-RFP组存在362个差异代谢物、MDR组存在277个差异代谢物、PR组存在1208个差异代谢物。其中Acetylagmatine(P<0.05)、Aminopentol(P<0.05)、Tetracosanyl oleate(P<0.05)在MR-INH组中表达具有显著差异;Ala His Pro Thr(P<0.001)、Glycinoprenol-9(P<0.05)在MR-RFP组中表达差异明显;Trimethylamine(P<0.05)、Penaresidin A(P<0.05)、Verazine(P<0.05)在MDR组中表达具有显著差异;PIP(18∶1(11Z)/18∶3(6Z,9Z,12Z))(P<0.001)、Pro Arg Trp Tyr(P<0.001)、N-Methyldioctylamine(P<0.001)、Phytolaccoside E(P<0.05)在PR组中表达具有显著差异。与DS组相比,Phthalic acid Mono-2-ethylhexyl Ester(P<0.05)和Eicosanoyl-EA(P<0.05)在MR-INH、MR-RFP、MDR、PR组均存在显著差异。结论Acetylagmatine、Aminopentol、Tetracosanyl oleate、Ala His Pro Thr、Glycinoprenol-9、Trimethylamine、Penaresidin A、Verazine、PIP(18∶1(11Z)/18∶3(6Z,9Z,12Z))、Pro Arg Trp Tyr、N-Methyldioctylamine、Phytolaccoside E、Phthalic acid Mono-2-ethylhexyl Ester、Eicosanoyl-EA共14种新型代谢物可能是指示结核单耐药、耐多药、多耐药的潜在标志物,联合分子标志物来评估结核耐药的发生发展,可以增强诊断的灵敏度和特异性,具有一定的临床应用前景。

γ-干扰素释放试验联合斑点形成细胞及ELISPOT诊断活动性结核与潜伏性结核的研究

目的:探究γ-干扰素释放试验(interferon-γrelease assays,IGRAs)联合可产生γ-干扰素(interferon-γ,INF-γ)的斑点形成细胞(spot-forming cells,SFC)数量、酶联免疫斑点检测法(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)模型识别活动性结核与潜伏性结核的诊断效能。方法:选取2017年9月-2018年12月在笔者所在医院就诊的结核分枝杆菌感染患者312例,其中活动性肺结核组154例记为活动组,潜伏性结核分枝杆菌感染158例记为潜伏组。通过受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析γ-干扰素释放试验、SFC及ELISPOT联合诊断模型识别活动性及潜伏性结核的诊断价值。结果:活动组γ-干扰素释放试验结果高于潜伏组,SFC高于潜伏组,ELISPOT阳性率(78.6%)高于潜伏组(31.0%),差异均有统计学意义(P<0.05)。γ-干扰素释放试验诊断的临界值为2.72 IU/ml,其对应灵敏度为79.1%,特异度为52.5%,ROC曲线下面积为0.768[95%CI(0.708,0.829)];SFC诊断临界值为2.78,其对应的灵敏度为75.3%,特异度为60.8%,ROC曲线下面积为0.768[95%CI(0.711,0.825)];ELISPOT阳性诊断临界值为4.27 mg/L,其对应灵敏度为70.8%,特异度为51.3%,ROC曲线下面积为0.620[95%CI(0.546,0.694)]。行Logistic回归分析,得到联合诊断模型Logit(P)=1.433+2.512γ-干扰素释放试验+1.654 SFC+1.121 ELISPOT,联合检测截断值为2.47,对应灵敏度为74.7%,特异度为80.4%,ROC曲线下面积为0.851[95%CI(0.806,0.896)]。联合检测特异度及曲线下面积均高于各指标单独检测,差异均有统计学意义(P<0.05),且联合检测保持较好的灵敏度。结论:γ-干扰素释放试验、SFC及ELISPOT联合诊断模型可提高活动性结核的特异度,并保持较高的灵敏度,在鉴别活动性及潜伏性结核感染方面具有重要的临床价值。

中药诱导间充质干细胞成骨分化信号通路的研究进展

间充质干细胞(MSCs)来源于中胚层,具有自我更新、修复机体系统和多向分化潜能的细胞。近年来已筛选出许多诱导MSCs成骨分化的中药单体。该文总结了中药诱导MSCs成骨分化作用及其相关信号通路。

人牙龈间充质干细胞外囊泡调控M1型巨噬细胞极化的研究

目的分析人牙龈间充质干细胞外囊泡(human gingival mesenchymal stem cell extracellular vesicle,CMU-Egm-9-EVs)调控M1型巨噬细胞(macrophage)极化(polarization)的表型及机制。方法通过佛波酯(PMA,100 nmol/L)作用人单核细胞系THP-1构建M0极化模型,设立空白对照组、EVs-PKH26组、CMU-Egm-9-Evs浓度递增组(20、40、80、160、320μg/mL)、CMU-Egm-9-Evs组(10μg/mL)、LPS组(100 ng/mL)与共同作用组(CMU-Egm-9-Evs、10μg/mL+100 ng/mL LPS、100 ng/mL),作用48 h后,激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬外囊泡;ELISA检测细胞因子TNF-α含量;Western blot检测巨噬细胞炎症相关蛋白iNOS、IL-6、ARG-1等表达;RT-qPCR检测TNF-α、IL-1β、iNOS基因表达。结果巨噬细胞可吞噬CMU-Egm-9-Evs。与空白对照组相比,高浓度CMU-Egm-9-EVs作用M0型巨噬细胞后,iNOS表达明显上调,差异有统计学意义(P=0.001,P<0.05);巨噬细胞分泌TNF-α明显增多,差异有统计学意义(P=0.0138,P<0.05);LPS和低浓度CMU-Egm-9-EVs共同作用于M0型巨噬细胞后,与LPS单独作用组相比,TNF-α分泌减少,差异有统计学意义(P=0.0012,P<0.05);M2型巨噬细胞ARG-1蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.0001);M1型巨噬细胞相关基因mRNA IL-1β、iNOS、TNF-α表达均下调,差异均有统计学意义(P=0.0079,P=0.0005,P=0.0001)。结论CMU-Egm-9-EVs可被巨噬细胞吞噬,高浓度作用于巨噬细胞时,可明显促进其向M1型巨噬细胞极化;在LPS炎症刺激下,低浓度CMU-Egm-9-EVs可抑制其向M1巨噬细胞极化。

粪菌移植和益生菌在复发性艰难梭菌感染和炎症性肠病中的应用进展

聚集在人体肠道的菌群对维持机体正常的生理功能具有重要作用,肠道菌群的失调会导致复发性艰难梭菌感染及炎症性肠病等疾病。粪菌移植是将健康供者肠道内的功能菌群转移到患病个体的肠道内,重建患者的肠道微生态环境,从而达到治疗的目的。研究发现,粪菌移植在治疗复发性艰难梭菌感染方面表现出较高的治愈率,同时对炎症性肠病有积极的疗效。益生菌是一类能发挥健康作用的活性微生物,当机体摄入足够数量的益生菌,益生菌能在宿主肠道内定植,可以恢复并维持宿主肠道菌群的平衡。益生菌可作为预防复发性艰难梭菌感染的辅助治疗,同时在缓解炎症性肠病方面也有较好的效果。

外泌体源性miRNA在肿瘤发生发展中作用的研究进展

外泌体作为细胞间信息交流的重要媒介,可携带蛋白质、脂质、核酸等多种信息物质到受体细胞中,使受体细胞产生不同的生化反应进而调节各项生命活动。近年来大量研究表明,外泌体源性miRNA广泛参与包括肿瘤在内的多种疾病的发生发展。为了更好地了解外泌体源性miRNA对肿瘤发生发展的影响,该文综述了外泌体源性miRNA在肿瘤血管生成、上皮-间质转化、免疫调节、转移前微环境、耐药等方面的作用。

有抑菌能力乳杆菌的筛选及其抑菌物质的初步探究

目的筛选具有抑菌能力的乳杆菌菌株并对其抑菌物质进行初步探究。方法采用琼脂扩散法进行抑菌试验,筛选出具有抑菌能力的乳杆菌菌株;通过热稳定性试验检测抑菌物质耐高温的能力;通过有机酸排除与过氧化氢排除试验检测这两种物质对抑菌作用是否有影响;用胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K消化处理各株乳杆菌无细胞发酵液后进行抑菌试验,判断抑菌物质是否为蛋白多肽类物质。结果 2株副干酪乳杆菌与1株保加利亚乳杆菌对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门菌和痢疾志贺菌有抑菌效果。这3株乳杆菌无细胞发酵液中的抑菌物质经过高温处理后仍具有抑菌能力,但抑菌能力与处理前相比显著降低(P<0.05);有机酸对照组未产生明显的抑菌圈;过氧化氢排除后的无细胞发酵液的抑菌能力未受影响;经过蛋白酶作用3株乳杆菌无细胞发酵液的抑菌能力显著降低(P<0.05)或消失。生物被膜态副干酪乳杆菌2的抑菌能力与浮游态相近,其无细胞发酵液中的抑菌物质可以完全耐受100℃处理与胃蛋白酶的消化作用,可部分耐受胰蛋白酶的消化作用。结论副干酪乳杆菌1、副干酪乳杆菌2和保加利亚乳杆菌具有良好的抑菌能力,它们产生的主要抑菌物质为蛋白多肽类,此物质具有较好的耐高温能力与耐蛋白酶能力;被膜态副干酪乳杆菌产生的抑菌物质表现出了更强的抗胁迫能力与稳定性。

佛手柑内酯抑制EBI3/STAT3信号增强结肠癌细胞对5-Fu化疗敏感性的研究

目的探究佛手柑内酯(Bg)对结肠癌细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性的影响及其机制。方法采用Bg作用人结肠癌SW1116/5-Fu和LoVo/5-Fu耐药细胞系;CCK-8法检测细胞增殖能力;Western blot检测Bcl-2、Bax、EB病毒诱导基因3(EBI3)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、CYP1B1和MEKK2蛋白质表达。结果Bg作用SW1116、SW1116/5-Fu、LoVo和LoVo/5-Fu细胞后,5-Fu作用细胞的半抑制浓度(IC50)值明显降低(P<0.05),尤其是Bg联合EBI3阻断剂作用细胞后,IC50值明显下降(P<0.05)。Western blot检测结果显示,Bg作用下SW1116/5-Fu和LoVo/5-Fu细胞Bcl-2、EBI3、STAT3、p-STAT3、CYP1B1和MEKK2蛋白质表达水平均明显降低,Bax蛋白质表达水平明显升高。结论Bg可能通过诱导细胞凋亡、抑制EBI3/STAT3信号通路及抑制耐药相关蛋白质CYP1B1和MEKK2表达增强结肠癌细胞对5-Fu的化疗敏感性。

CRISPR/Cas9介导的IL-6基因敲除对结肠癌SW1116细胞化疗敏感性的影响

目的采用成簇的、规律间隔的短回文重复序列/核酸内切酶9(CRISPR/Cas9)基因组编辑技术构建白细胞介素6(IL-6)基因敲除结肠癌SW1116细胞系,探讨其对化疗药物顺铂(CDDP)的敏感性。方法采用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,构建IL-6基因敲除的SW1116细胞系;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡;Western blot法检测细胞IL-6、cyclin E、Bax、Bcl-2、p-STAT3和STAT3表达。结果成功构建了IL-6-/+SW1116和IL-6-/-SW1116细胞系;IL-6-/+SW1116和IL-6-/-SW1116细胞与野生型SW1116细胞相比,其生长状态、细胞增殖能力、细胞周期及细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05);5mmol/mL CDDP干预后,IL-6-/-SW1116细胞凋亡率明显增加、细胞增殖受到明显抑制、细胞内Bax表达明显增高,Bcl-2、p-STAT3和STAT3表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了对CDDP敏感,且生长增殖周期稳定的IL-6-/-SW1116细胞系,可为IL-6介导的结肠癌化疗耐药机制研究提供实验基础。

益生菌降血脂作用及其机制的研究进展

益生菌(probiotics)是一类对人体健康有益的活性微生物,具有调节机体代谢、增强免疫力等生理特性。近年来的研究证实,某些益生菌能通过调控胆固醇或甘油三酯的代谢平衡发挥降血脂的作用,这类具有降血脂作用的益生菌对预防和治疗高脂血症有一定的效果。与药物治疗高脂血症相比,益生菌降血脂具有疗效显著、不良反应小等优点,有望成为预防和治疗高血脂症的新方法。现对益生菌降血脂作用及其机制研究作一概述。

EB病毒诱导基因3增强结肠癌5-氟尿嘧啶耐药株耐药性的研究

目的建立结肠癌(CRC)5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药株探讨EB病毒诱导基因3(EBI3)与CRC 5-Fu耐药的关系。方法采用5-Fu持续接触浓度递增诱导法建立人CRC耐药细胞系;CCK-8法检测细胞增殖和耐药性;4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核形态学改变;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡;EBI3 CRISPR激活质粒和EBI3 CRISPR/Cas9敲除质粒转染结肠癌耐药和非耐药细胞后,Western blot检测EBI3、细胞色素P450家族成员1B1(CYP1B1)和有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶2(MEKK2)表达。结果采用5-Fu持续接触浓度递增诱导法建立人结肠CRC细胞系SW1116/5-Fu和LoVo/5-Fu;细胞周期检测结果显示,与SW1116和LoVo细胞相比,SW1116和SW1116/5-Fu细胞周期各期百分比无明显差异(P>0.05)。与LoVo细胞相比,LoVo/5-Fu细胞G1期细胞百分比明显增高(P<0.05),S期细胞百分比明显降低(P<0.05);Western blot检测结果显示,与SW1116和LoVo细胞相比,SW1116/5-Fu和LoVo/5-Fu细胞EBI3、CYP1B1和MEKK2表达均明显增高;SW1116、SW1116/5-Fu、LoVo和LoVo/5-Fu细胞转染EBI3敲除质粒后,5-Fu作用细胞的半抑制浓度(IC50)值明显降低(P<0.05),而细胞转染EBI3激活质粒后,5-Fu作用细胞的IC50值明显增高(P<0.05)。结论EBI3可能介导了CRC细胞对5-Fu的耐药过程。

肺结核患者外周血MAIT细胞功能及血清IL-22水平分析

目的观察肺结核(TB)患者外周血MAIT细胞功能及血清白细胞介素22(IL-22)水平,分析其临床意义。方法收集50例TB患者和30例健康志愿者为研究对象。流式细胞术检测外周血MAIT细胞水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-22水平;磁珠分选CD8+T细胞,体外结核菌抗原Ag85B刺激检测MAIT细胞产生Perforin和IL-22的能力。结果 TB患者外周血MAIT细胞和血清IL-22水平均明显低于健康志愿者(P<0.05);痰涂片检查结核菌阳性患者外周血MAIT细胞和血清IL-22水平均明显低于阴性患者(P<0.05);常规化疗药物治疗后外周血MAIT细胞和血清IL-22水平均明显增高(P<0.05);TB患者外周血MAIT细胞和血清IL-22水平呈正相关(P<0.05);Ag85B干预后,TB患者和健康志愿者外周血MAIT细胞产生Perforin的能力均明显降低(P<0.05),而产生IL-22的能力与对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论MAIT细胞与IL-22可能在抗结核免疫过程中发挥重要作用。

牙龈间充质干细胞免疫调节作用及在疾病治疗中的应用研究进展

牙龈间充质干细胞(GMSC)是一种从牙龈固有层中分离得到的成体干细胞。相较于骨髓间充质干细胞(BMSC)、脂肪间充质干细胞(ADSC)和脐带间充质干细胞(UCMSC), GMSC来源更丰富、取材相对无创且稳定性较好。近年来大量研究发现GMSC在炎症性或免疫相关疾病的治疗和再生医学中有更广阔的应用前景。本文将GMSC生物学特性、对免疫细胞(T细胞、单核-巨噬细胞、B细胞、肥大细胞、树突状细胞)的调节和在疾病(糖尿病、神经损伤性疾病、动脉粥样硬化、移植物抗宿主病、炎症性肠病、类风湿性关节炎、接触性超敏反应、牙周炎、肿瘤、银屑病、新型冠状病毒肺炎)治疗中作用等方面的研究进展作一综述。

间充质干细胞在结核病治疗中的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是一种多能干细胞,具有自我更新、多向分化、免疫调节和抗炎的能力,在组织修复和再生中发挥着重要作用。已有临床前和临床研究证明,MSCs在治疗结核病(tuberculosis, TB)方面具有潜在的应用价值。因此,了解MSCs的生物学和免疫学特性,对规范和优化基于MSCs的再生治疗具有重要意义。现重点介绍MSCs在TB中的作用机制以及基于MSCs在TB临床试验的最新进展。