医院检验科临床微生物实习教学探索与实践

临床微生物检验实习是检验专业学生实习的重要组成部分,不仅要求学生具备扎实的理论知识,而且得掌握规范的检验操作技术。是否经过严格规范的带教实习,会直接影响学生工作能力和工作作风。由于临床微生物检验专业性与严谨性,一直都是检验带教中的难点。为此,我们需与时俱进,不断调整带教的内容,优化带教方式,现将临床微生物检验教学实践中体会与思考总结以下6点:1)明确制度;2)专岗负责;3)合理安排;4)学以致用;5)加强沟通;6)严格考核。

血清AFU、孕酮、β-HCG联合检验对诊断先兆流产的临床价值

目的探讨血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、孕酮、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)联合检验对诊断先兆流产的临床价值。方法选取120例先兆流产孕妇,根据其妊娠结局不同分为观察1组(继续妊娠)与观察2组(妊娠失败),各60例;另选取60例孕检健康孕妇作为对照组。检测三组孕妇血清AFU、孕酮、β-HCG水平,并比较不同检测结果的诊断效能。结果观察1组、观察2组血清AFU、孕酮、β-HCG水平均比对照组低(P<0.05),观察2组血清AFU、孕酮、β-HCG水平均比观察1组低(P<0.05)。联合AFU、孕酮及β-HCG水平诊断先兆流产的敏感度、准确率、特异度分别为86.67%、93.33%及90.00%,联合检测敏感度、准确率、特异度均高于单一水平检测(P<0.05)。结论先兆流产孕妇血清AFU、孕酮及β-HCG水平明显更低,联合检测可提高先兆流产疾病诊断准确率,为后续治疗提供重要的参考价值。

分级检验方案在临床血脂生化检验中的应用

目的分析分级检验方案在临床血脂生化检验中的应用效果。方法方便选取2019年3月—2020年1月在医院进行血脂检验的患者35例,将所有患者血液样本分为两份,一份(对照组)采用常规拉网式检验方案,另一份(观察组)采用分级检验方案,比较两种检验方式检验结果:血脂生化水平[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(ApoB)、载脂蛋白AI(ApoAI)]、血脂指标阳性率、血脂指标漏检率。结果对照组与观察组TC、TG、HDL-C相比,差异无统计学意义(P>0.05);对照组与观察组LDL-C、ApoB、ApoAI相比,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与观察组TC、TG、HDL-C检验阳性率相比,差异无统计学意义(χ^(2)=0.064、0.058、0.000,P=0.799、0.808、1.000);对照组LDL-C、ApoB、ApoAI阳性率分别为71.43%、74.29%、2.86%,观察组分别为94.29%、97.14%、2.86%,经检验,差异有统计学意义(χ^(2)=6.436、7.466、4.590,P=0.011、0.006、0.032);对照组血脂指标漏检率(25.71%)与观察组(2.86%)相比显著较高,差异有统计学意义(χ^(2)=7.466,P=0.006)。结论分级检验方案在临床血脂生化检验中的应用价值显著。

Th1/Th2型细胞因子谱在革兰阴性菌或阳性菌脓毒血症中的鉴别诊断及预后预测价值研究

目的研究1型或2型辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)细胞因子谱在革兰阴性菌或革兰阳性菌(G^(-)/G^(+))脓毒血症中的鉴别诊断意义及预后预测价值。方法收集120例脓毒血症患者的临床资料,按照患者的细菌学培养结果分为G^(-)感染组(G^(-)组,65例)和G^(+)感染组(G^(+)组,55例),并根据患者随访28 d时是否生存分为死亡组(41例)和生存组(79例),分别比较G^(-)组和G^(+)组患者、生存组和死亡组中Th1/Th2细胞因子谱IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平的组间差异。分析IL-6、IL-10、IFN-γ联合检测对G^(-)/G^(+)患者的鉴别诊断及预后评估的价值。结果G^(-)组和G^(+)组患者的IL-2、IL-4以及TNF-α水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05),G^(+)组患者的IL-6、IL-10、IFN-γ均低于G^(-)组患者(P均<0.05)。生存组和死亡组患者的IL-2、IL-4以及TNF-α水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05),生存组患者的IL-6、IL-10、IFN-γ均低于死亡组患者。IL-6、IL-10、IFN-γ联合检测对鉴别诊断G^(-)/G^(+)感染以及预测患者死亡的特异度高于单一检测;受试者操作特征曲线分析显示,针对G^(+)感染,IL-6、IL-10、IFN-γ诊断临界值分别为72.56、10.58、2.52 ng/L;针对死亡患者,IL-6、IL-10、IFN-γ诊断临界值分别为189.55、77.11、4.89 ng/L。结论Th1/Th2细胞因子谱IL-6、IL-10、IFN-γ水平可用于鉴别诊断G^(-)或G^(+)脓毒血症,并能有效评估患者预后。

粪便、唾液及血清幽门螺旋杆菌检测对慢性胃炎幽门螺杆菌感染的诊断价值

目的探讨粪便、唾液及血清幽门螺旋杆菌(Hp)检测在慢性胃炎Hp感染诊断中的应用价值。方法选择东莞市滨海湾中心医院2019年7月至2020年7月期间诊治的136例慢性胃炎患者为研究对象,以胃镜病理检测到幽门螺杆菌阳性作为Hp感染的金标准,比较粪便、唾液幽门螺杆菌抗原及血清幽门螺杆菌抗体等单项指标,以及联合以上指标应用对慢性胃炎Hp感染的诊断价值。结果136例慢性胃炎患者中胃镜病理检查Hp感染阳性100例,阴性36例;血清Hp诊断敏感性为86.00%,明显高于高于唾液的75.00%和粪便的80.00%,但是特异性为30.56%,明显低于唾液的61.11%和粪便的63.89%,差异均有统计学意义(P<0.05);联合检测的敏感性为96.00%,明显高于单项检测,阴性预测值为75.00%,高于单项检测,差异均有统计学意义(P<0.05);联合检测的诊断符合率最高(79.41%),但是与单项比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清、唾液和粪便对慢性胃炎患者的幽门螺杆菌检出率均较高,其中血清Hp抗体的特异性较差,进一步联合三种检测方法可有效提高检查的敏感度。

MAFG-AS1调控miR-24-3p对急性淋巴细胞白血病细胞Molt4增殖及凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MAFG-AS1通过调控miR-24-3p对急性淋巴细胞白血病细胞Molt4的增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析MAFG-AS1和miR-24-3p在白血病血清、细胞中的表达。将Molt4细胞分为si-NC组、si-MAFG-AS1组、miR-NC组、miR-24-3p mimic组、si-MAFG-AS1+anti-miR-NC组、si-MAFG-AS1+miR-24-3p inhibitor组,分别转染si-NC、si-MAFG-AS1、miR-NC、miR-24-3p mimic、si-MAFG-AS1+anti-miR-NC和si-MAFG-AS1+miR-24-3p inhibitor。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、流式细胞术、蛋白质印迹实验(Western blot)分别测定细胞增殖、凋亡、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达。双荧光素酶报告实验进行MAFG-AS1和miR-24-3p靶向关系的验证。结果在白血病患者血清、细胞中MAFG-AS1表达升高,miR-24-3p表达降低(P<0.01)。与si-NC组相比,si-MAFG-AS1组Molt4细胞24 h、48 h和72 h的细胞抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达量增加,Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.01)。MAFG-AS1可以靶向miR-24-3p。与miR-NC组相比,miR-24-3p mimic组Molt4细胞24 h、48 h和72 h的细胞抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达量增加,而Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.01)。si-MAFG-AS1+miR-24-3p inhibitor组Molt4细胞24 h、48 h和72 h的细胞抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达量均低于si-MAFG-AS1+anti-miR-NC组,Bcl-2蛋白表达量高于si-MAFG-AS1+anti-miRNC组(P<0.01)。结论MAFG-AS1在白血病患者中高表达,干扰其表达可通过靶向miR-24-3p抑制急性淋巴细胞白血病细胞Molt4的增殖和促进凋亡。

脂蛋白a及同型半胱氨酸与心血管疾病的相关性分析

目的:探讨脂蛋白a及同型半胱氨酸与心血管疾病发病及其进展的相关性。方法:选取2020年4月—2021年4月我院收治的100例心血管疾病患者作为观察组;另从本院同期进行健康体检的人员中选取100名体检健康者作为对照组。所有观察对象均接受脂蛋白a、同型半胱氨酸的检测,分析其指标水平高低、阳性率及与心血管疾病发病的相关性和对心血管发病的影响。结果:观察组脂蛋白a、同型半胱氨酸指标水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组脂蛋白a、同型半胱氨酸阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,心血管疾病发病风险与脂蛋白a、同型半胱氨酸指标水平呈正相关(P<0.05);以脂蛋白a、同型半胱氨酸为自变量,心血管疾病为因变量,回归分析显示脂蛋白a、同型半胱氨酸升高是心血管疾病发病的危险因素(P<0.05)。结论:脂蛋白a、同型半胱氨酸指标水平影响心血管疾病的风险。本次结果显示,心血管疾病患者的脂蛋白a、同型半胱氨酸水平高于正常人群,并且指标水平与心血管疾病的发病风险呈正相关,同时脂蛋白a、同型半胱氨酸升高也是心血管疾病发病的危险因素。

卵巢早衰患者AMH、FSH、LH检测与超声联合诊断价值

目的探讨卵巢早衰患者AMH、FSH、LH检测与超声联合诊断价值。方法选择2018年7月至2020年2月期间我院收治的卵巢早衰患者作为观察组,另选择同期来本院检查的健康体检者作为对照组,均检测AMH、FSH、LH以及超声检查,每组56例。对两组检查结果进行评估,比较两组AMH、FSH、LH的水平及超声相关指标。结果观察组FSH、LH的水平分别为(8.44±1.35)、(8.26±1.49),对照组分别为(5.23±1.36)、(4.93±1.02),明显高于对照组,观察组AMH的水平为(5.63±1.76),对照组为(8.70±1.89),明显低于对照组(P<0.05);观察组阻力指数、收缩期峰值流速、舒张末期流速低于对照组,观察组搏动指数高于对照组(P<0.05)。结论卵巢早衰患者检测AMH、FSH、LH并结合超声检测,有助于帮助医师了解卵巢早衰患者的各项激素水平,明确血清相关指标,为临床上的诊断、治疗提供可靠的信息,具有较高的临床价值,值得推广应用。

山豆根对金黄色葡萄球菌毒力表达的影响

目的探究山豆根对金黄色葡萄球菌(以下简称为金葡菌)毒力表达的影响,为临床用药进一步提供实验数据,丰富山豆根抗菌药用价值参考资料。方法分别采用紫外吸光度法、扫描电镜、溶血试验法和Western Blot检测了山豆根作用后金葡菌细胞膜通透性、菌体形态变化,溶血活性和外毒素的表达。结果亚抑菌浓度的山豆根能破坏细胞膜完整性并引起菌体变化,降低溶血能力和α-溶血素、金葡菌A型肠毒素(SEA)和金葡菌B型肠毒素(SEB)分泌。结论山豆根对金葡菌毒力有抑制作用。

4种抗菌洗液对金黄色葡萄球菌的抑制作用

目的探讨4种不同抗菌洗液对金黄色葡萄球菌生长及毒力表达的影响,分析不同成分的洗液对金黄色葡萄球菌抑制原理。方法通过微量肉汤稀释法测定4种抗菌洗液最低抑菌浓度,用紫外吸收光谱法检测细菌细胞质膜的完整性,最后采用肿瘤坏死因子(TNF)-α检测试剂盒(ELISA)测定洗液作用后的金黄色葡萄球菌对人单核细胞分泌TNF-α水平的影响。结果B洗液、D洗液的最低抑菌浓度为6.20 mg/mL。A洗液、C洗液的最低抑菌浓度为3.10 mg/mL,抑制效果分别为A>C>B>D,差异有统计学意义(P<0.05)。结论4种抗菌洗液具有一定的抑菌效果,其中C抗菌洗液具有良好的抗菌效果,应用广泛,价格适中,适宜推广。

PCT联合IgM检测小儿肺炎的诊断价值

目的探究PCT联合IgM检测小儿肺炎的诊断价值。方法回顾性分析东莞市滨海湾中心医院2017年2月至2019年11月接收180例小儿肺炎患儿的临床资料,根据细菌感染情况,将其分为非细菌组88例与细菌组92例,并选择同期健康体检儿童85例作为参照组,均进行IgM、PCT检查。比较3组研究对象PCT水平以及阳性检出率;比较细菌组与非细菌组患儿IgM与痰培养阳性率;比较PCT、IgM单独检测及联合检测诊断灵敏度、特异度。结果与参照组儿童比,细菌组和非细菌组患儿PCT水平、阳性率均升高,细菌组PCT水平、阳性率高于非细菌组(P<0.05);细菌组患儿IgM阳性率高于非细菌组,细菌组患儿痰培养阳性率高于非细菌组(P<0.05);PCT联合IgM灵敏度、符合率均显著高于PCT、IgM单独检测(P<0.05)。结论采用PCT联合IgM检测小儿肺炎具有一定的临床意义,不仅能够反映患儿的感染情况,也可提供指导价值。

外排泵抑制剂CCCP对阿奇霉素外排阳性耐药痤疮丙酸杆菌的影响

目的 挖掘痤疮丙酸杆菌外排泵耐药相关基因及通路。方法 对阿奇霉素外排表型阳性的耐药痤疮丙酸杆菌,使用外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)处理,分别提取处理前后的痤疮丙酸杆菌总RNA进行转录组测序与基因本体(GO)、基因组百科全书(KEGG)分析。结果 转录组测序中共发现755条差异表达基因。其中下调表达427条(56.56%),在GO数据库中注释到250个,在KEGG数据库中注释到182个,上调表达的基因有328条(43.44%),在GO数据库中注释到266个,在KEGG数据库中注释到236个。KEGG分析中下调表达基因富集最显著的通路为ABC转运蛋白通路,此通路共55个基因,差异表达基因含有27个,其中下调的前十个基因为:gtsC、ngcF、cycB、cebF、ngcE、gtsB、gtsA、oppB、oppA、ecfT。结论 CCCP对阿奇霉素外排阳性耐药痤疮丙酸杆菌的影响,主要以下调基因表达为主,且下调表达基因中以ABC转运蛋白通路最为显著,推测痤疮丙酸杆菌外排泵耐药与该通路及相关基因有密切关系。

镁离子转运蛋白1在脓毒症患者外周血CD8^(+)T淋巴细胞中的表达及其意义

目的:探讨镁离子转运蛋白1(MagT1)在脓毒症患者外周血CD8^(+)T淋巴细胞中的表达水平及其作用。方法:收集2018年3月至2021年5月于东莞市滨海湾中心医院就诊的96例脓毒症患者资料,根据感染及循环衰竭程度将脓毒症患者分为普通脓毒症组(n=39)、严重脓毒症组(n=33)和脓毒性休克组(n=24),另取同期健康者为对照组(n=30)。分离培养各组患者外周血CD8^(+)T细胞,检测外周血和CD8^(+)T细胞中Mg^(2+)浓度;qRT-PCR检测CD8^(+)T细胞中多种Mg^(2+)转运体(TRPM7、TRPM6、Mrs2p、SLC41A1、SLC41A2、MagT1及ACDP2)mRNA表达水平;Western blot检测CD8^(+)T细胞中MagT1表达水平;流式细胞术检测CD8^(+)T细胞表面抑制受体PD-1、Tim-3和活化受体NKG2D、HLA-DR表达水平;Pearson相关性分析MagT1与PD-1、Tim-3、NKG2D及HLA-DR表达水平相关性。结果:与对照组比较,脓毒症患者CD8^(+)T细胞中Mg^(2+)浓度显著降低(P<0.05),且病情越重,浓度越低,而外周血中Mg^(2+)浓度差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,脓毒症患者CD8^(+)T细胞中仅MagT1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),而其他6种Mg^(2+)转运体mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,脓毒症患者CD8^(+)T细胞中MagT1表达水平也显著降低(P<0.05),且其细胞表面抑制分子PD-1和Tim-3表达水平显著增加(P<0.05),而活化分子NKG2D和HLA-DR表达水平显著降低(P<0.05)。Pearson相关分析显示,MagT1与PD-1和Tim-3呈显著负相关,而与NKG2D和HLA-DR呈显著正相关(P<0.05)。结论:MagT1在脓毒症患者CD8^(+)T细胞中低表达,且通过降低胞内Mg^(2+)浓度,调控CD8^(+)T细胞表面分子表达,导致脓毒症患者CD8^(+)T细胞耗竭。

采用抗核抗体、抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断中的效果对比

目的:对比采用抗核抗体、抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断中的效果。方法:选取2020年1月至2021年6月期间于本院接收的200例确诊为自身免疫性疾病的患者作为此次研究对象,回顾性分析其抗核抗体检测、抗核抗体谱检测、抗核抗体联合抗核抗体谱检测结果,比较上述三种检测方法在自身免疫性疾病诊断中的准确率。结果:经分析,抗核抗体检测准确率为53.5%(107/200),抗核抗体谱检测准确率为86.0%(172/200),抗核抗体联合抗核抗体谱检测准确率为97.00%(194/200),联合检测的准确率明显高于单一抗核抗体检测、抗核抗体谱检测(P<0.05);抗核抗体谱检测的准确率高于抗核抗体检测(P<0.05)。结论:在自身免疫性疾病诊断中采用抗核抗体和抗核抗体谱联合检测,能获得较高的诊断准确率,应用效果显著。