洋香瓜黑点根腐病菌子囊孢子在土壤中的分布与发芽

在全球发生严重的洋香瓜黑点根腐病的病原菌是属于子囊真菌的Monosporascus cannonballus,其每个子囊内仅产生一个、或偶有两个子囊孢子为其主要特征.该子囊孢子被认为是本病原菌在土壤中的存活单位及最初感染源,由于子囊孢子不易发芽,故它在土壤中之生态行为仍尚未全明了.本研究利用一般的网筛法发现其在田间土壤中的子囊孢子数不超过5.2 ascospores/g soil,而使用新研发的循环沉淀法发现子囊孢子在田间表土0-10 cm的水平分布介于3.3-20.2(平均9.9)ascospores/g soil,而垂直分布(0-50 cm)则介于4.1-12.3 ascospores/g soil,经统计分析,差异不显著(p=0.05).在实验室内比较网筛法与循环沉淀法从人工病土中萃取子囊孢子的回收率,则分别为27.5与98.6%.在子囊孢子发芽方面,利用Stanghellini等人研发的土壤试管法发现供试之葫芦科作物皆能促使黑点根腐病子囊孢子发芽,非葫芦科作物则否.但本法仅能观察到已发芽的子囊孢子对植株根部之侵入率,未能反应准确的发芽率,因此本研究新研发包埋子囊孢子试管法,试验结果显示子囊孢子的发芽受到时间、植株根圈效应与土壤等多因子的影响,越靠近根表的子囊孢子越早发芽,且发芽率越高,其中处理后第21与28天,在距离根表2 mm内子囊孢子发芽率皆高达83%以上.

线虫捕捉性真菌对叶芽线虫(Aphelenchoides besseyi)及根瘤线虫(Meloidogyne incognita)捕捉力的探讨

线虫捕捉性真菌广泛分布于世界各地,目前种类包括壶菌、结合菌、不完全菌、子囊菌及担子菌等,其中不完全菌丝孢纲线虫捕捉菌依据分生孢子、捕捉构造型态可以分成粘着分枝(ad-hesive branch)、粘着网(adhesive net)、粘着球(adhesive knobs)、非收缩环(non-constricting ring)、收缩环(constricting ring)五类.本研究即至本省各地不同寄主及土壤质地作物区采集作物根圈土壤共58个样本,利用土壤洒布法分离不完全菌丝孢纲线虫捕捉菌,同时测定采集土的pH值、有机质、土壤质地.样本分离到线虫捕捉菌的比率为68.97%,且54.24%为网形成菌.土壤有机质含量高于4%较易分离到线虫捕捉菌,而土壤pH值与线虫捕捉菌的存在无明显相关性.Monacrosporium eudermata、Arthrobotrys musiformis、A.cladodes、M.ellipsosporum、Dacty-laria brochopaga为最常见的5种故针对它们进行最适生长温度、pH和不同碳、氮素源种类下对此5种线虫捕捉菌生长及捕捉力的影响.结果显示网形成菌生长速度最快,M.ellipsosporum、D.brochopaga在含有3%xylose的查派克-道克斯琼脂(Czapek-Dox medium)培养基中生长完全受到抑制.此5种线虫捕捉菌以M.eudermata捕捉叶芽线虫效果最好,其次为D.brochopaga.M.eudermata培养在0.5%、1% sucrose、Glucose、Galactose、mannitol、maltose、Starch、Saccharose的查派克-道克斯琼脂中具有捕捉叶芽线虫(Aphelenchoides besseyi)的能力.D.brochopaga在实验中对于南方根瘤线虫(Meloidogyne incognita)有最好的捕捉能力.

病毒颗粒的存在与其对水稻纹枯病菌的影响

存在有14.0 kb dsRNA的水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1 IA)Rs17菌株与存在有2.0 kb dsR-NA的Rs1M-3菌株经由菌丝融合试验结果发现,Rs1M-3菌株中2.0 kb dsRNA片段可经由菌丝融合而转移,融合试验中获得的6个融合成功的菌株与2个未融合成功的菌株在生长速度上并没有差异,但是6个带有2.0 kbdsRNA融合菌株在色素产生与菌核数目比未带有2.0 kb菌株少,初步认为2.0 kb dsRNA片段对色素产生、菌核数目多寡有影响.在Rs1M-3菌株中可以分离到球形、直径大小约20～25 nm的类似病毒颗粒(virus-like particle,VLP)其分子量大小约为60-70 kDa左右,此外经由Rs1M-3中类似病毒颗粒直接抽取病毒核酸进行电泳分析,发现其类似病毒颗粒的核酸为dsRNA,且两条分子量相近约2.0 kb dsRNA片段大小与直接由Rs1M-3菌丝中所抽取到的dsRNA是一致的.从本实验初步研究证实dsRNA可经由菌丝融合传播,2.0 kbdsRNA可能影响菌株菌核的形成且有病毒颗粒存在,对于dsRNA在水稻纹枯病菌上的作用与关系及其属于何属病毒有待未来更进一步的研究.

数据库搜索及ISSR-抑制PCR法开发香菇微卫星标记

采用数据库搜索及ISSR-抑制PCR法开发香菇微卫星标记。由数据库搜索法开发出21对引物,11对有多态性,各位点平均产生3.3个等位基因;通过ISSR-抑制PCR法开发出8对引物,5对具多态性,各位点平均产生3个等位基因。结果表明,在香菇SSR开发中,两种方法均是行之有效的。