灵芝多糖对小鼠脾脏树突状细胞的增殖作用

目的 观察灵芝多糖（GP）对小鼠脾脏树突状细（dendrirtie cells，DCs）的增殖作用。方法采用MTT法，以细胞因子（GM-CSF＋IL-4）作比较，观察不同质量浓度GP以及细胞因子＋不同浓度的GP对小鼠脾脏DCs的增殖作用。结果GP（5-80μg/mL）可明显刺激小鼠脾脏DCs增殖，与细胞因子组相比，其较高质量浓度组（20、40、80μg／mL）作用明显；GP＋细胞因子，与对照组相比均有显著的增殖作用，且明显高于细胞因子组。结论GP不仅能促进小鼠脾脏DCs的增殖，而且与细胞因子有显著的协同作用。具有类生长因子和协同生长因子的作用。

miRNA-17-92基因簇对大肠癌HT29细胞周期调控机制研究

【目的】探讨miRNA(miR)-17-92基因簇对大肠癌HT29细胞周期的调控机制,为大肠癌临床诊断和治疗提供潜在靶点。【方法】体外培养人结肠癌HT29细胞,转染miR-17-5p和miR-20a后,采用实时荧光定量PCR验证转染效果,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布情况,Western印记法检测E2F1蛋白表达水平。【结果】miR-17-5p和miR-20a分别以50、100 nmol/L浓度转染24 h后的HT29细胞用于后续实验;两者均可促进HT29细胞的增殖,具有时间依赖性;能够将细胞阻滞在S期,抑制靶基因E2F1蛋白的表达水平。【结论】miR-17-92基因簇通过抑制E2F1的翻译促进大肠癌细胞的增殖,提示miR-17-92基因簇在大肠癌细胞周期调控中可能发挥癌基因的作用。

当归多糖对小鼠脾脏树突状细胞增殖的影响

目的:研究当归多糖(ASP)对体外小鼠脾脏树突状细胞(DCs)增殖的影响。方法:采用MTT法,以细胞因子即粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)+白细胞介素4(IL-4)作比较,观察不同浓度ASP以及细胞因子+不同浓度的ASP对小鼠脾脏DCs的增殖作用。结果:ASP 31.25-250μg/ml可明显刺激小鼠脾脏DCs增殖,与细胞因子组相比,其中间浓度62.5-125 μg/ml作用明显;ASP+细胞因子,与对照组相比,均有显著的增殖作用,且其在较低浓度31. 25、62.5、125μg/ml明显高于细胞因子组。结论:ASP不仅能促进小鼠脾脏DCs的增殖,而且与细胞因子有显著的协同作用,具有类生长因子和协同生长因子的作用。

吴茱萸碱联合CDK1抑制剂RO3306对鼠结肠癌CT26的协同杀伤作用

目的:探讨吴茱萸碱(EVO)联合CDK1的特异抑制剂RO3306对鼠结肠癌细胞CT26的生长抑制、诱导凋亡是否有协同增效作用.方法:采用MTT法求出EVO对CT26作用24h的IC50及诱导CT26细胞发生不可逆凋亡的时间点,比较EVO和RO3306同时用药与序贯用药(EVO先作用24h,再加入RO3306共同作用6h)对CT26细胞的抑制作用.采用金正均q值法检验其联合作用是否有协同性(q为实际药效与理论药效比值,q>1.15为协同性).同时用药实验与序贯用药实验的分组情况均为对照组、2mg/LEVO组,4mg/LEVO组,15mg/LRO3306组(加药时间同相应联合组),2mg/LEVO+15mg/LRO3306联合组,4mg/LEVO+15mg/LRO3306联合组.采用克隆集落形成法检测药物单独和联合作用下对CT26细胞的抑制率.采用流式细胞术检测药物作用对CT26凋亡率的影响.结果:MTT法结果显示EVO对结肠癌细胞CT26具有显著抑制作用,其抑制作用有明显的浓度依赖性,作用24h的IC50为10.8mg/L;EVO诱导CT26细胞进入不可逆凋亡的时间点在24h左右.MTT检测EVO和RO3306序贯用药的各组抑制率依次分别是22.0%±4.4%、30.4%±3.2%、12.3%±4.8%、48.0%±3.2%、62.2%±2.2%(序贯用药联合组q=1.52,1.60>1.15,同时加药联合组q=0.68,0.72).克隆集落形成法显示相应各组的抑制率依次分别是9.7%±5.8%、38.9%±3.8%,10.8%±3.7%,29.8%±10.7%,68.3%±12.7%(q>1.15).流式细胞术显示各组细胞凋亡率依次分别是5.5%±1.1%,18.3%±1.9%,25.6%±1.5%,9.2%±1.1%,39.1%±9.8%,54.6%±1.2%(q>1.15).结论:EVO能抑制鼠结肠癌细胞CT26的生长,其作用呈剂量依赖关系,EVO诱导CT26发生不可逆凋亡的时间点约在24h左右;EVO联合CDK1抑制剂RO3306并序贯用药对CT26的抑制作用具有协同增效效应,同时加药联合作用未显示协同性.