二甲双胍遗传药理学研究进展

遗传药理学研究发现药物代谢酶、受体和转运体基因遗传多态性是药物作用个体差异的重要决定因素。二甲双胍是治疗2型糖尿病(type2diabetes mellitus,T2DM)的一线药物,同时还可治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syn-drome,PCOS)等其他与胰岛素抵抗有关的疾病。二甲双胍在临床使用中表现出显著的药物反应个体差异,这种差异性导致药物反应性降低或药物毒副反应的发生。有机阳离子转运体(organiccation transporters,OCTS)遗传多态性对二甲双胍药物反应个体差异有重要影响。本文阐述了OCTS等多个药物相关基因的遗传多态性对二甲双胍药代动力学和药效学的影响,可为临床制定二甲双胍的个体化用药提供参考。

8个家族性特发性基底节钙化家系患者的临床研究

目的探讨8个家族性特发性基底节钙化(familial idiopathic basal ganglia calcification,FIBGC)家系患者的临床特点。方法收集8个FIBGC家系患者的临床资料,分析患者的临床检验结果、头颅CT及MRI改变、发病年龄、临床表现与患者基底节钙化体积(the volume of basal ganglia calcification,VBGC)的关系。结果家系患者和健康成员血清钙、铝、砷、钴、镁、磷、铁、甲状旁腺激素和降钙素的值比较均无显著性差异(P>0.05)。8个家系包括两个近亲结婚的家系均呈现常染色体显性遗传;运动受损患者的病情严重程度与基底节区钙化的病灶大小相关;精神症状的患者有无症状与VBGC的大小无关;运动受损与精神症状的患者间发表年龄(43.954±2.473 vs.31.319±10.156 y,t=4.438,P=0.001)和VBGC(1.748±0.622 vs.0.392±0.276 cm3,t=2.518,P=0.028)比较有统计学差异。结论 8个FIBGC家系患者呈现常染色体显性遗传的特点,运动受损的患者基底节区钙化的病灶大,发病年龄较晚;精神症状的患者基底节区钙化的病灶小,发病年龄较早。

miRNA在糖尿病中的研究进展

已发现大量微小RNA(microRNA,miRNA)调节编码糖尿病相关蛋白基因的表达。miRNA表达量或功能的变异与多种疾病相关。已有研究报道miRNA与糖尿病相关,miRNA参与调节胰岛β细胞的功能且糖尿病状态下组织内miRNA会发生变化。miRNA成为糖尿病治疗的潜在靶点。本文就近年来miRNA在糖尿病方面的研究进展进行综述。

弥漫性胶质瘤生物标志物的发现及研究进展

弥漫性胶质瘤是成人中最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,分为星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤和少突星形细胞瘤,病理级别为Ⅱ-Ⅳ级,其中Ⅳ级的胶质母细胞瘤是最常见的高级别胶质瘤。传统上弥漫性胶质瘤的诊断主要是基于其组织病理学特征,但是仍有很多生物学特点无法很好地解释。而以异柠檬酸脱氢酶（IDH）为代表的生物标志物已被证明对脑胶质瘤分子特征的分类和患者预后情况都有不可忽视的作用。IDH在成人Ⅱ级和Ⅲ级弥漫性胶质瘤及继发性胶质母细胞瘤中突变频率较高。IDH突变的浸润性星形细胞瘤和继发性胶质母细胞瘤具有TP53和ATRX突变的特点。少突胶质细胞瘤也伴随IDH突变并以1p/19q联合性缺失和CIC、FUBP1、Notch1、TERT启动子突变为特征。胶质瘤的生物标志物有望成为临床诊断的新标准。

人类白细胞抗原基因多态性与药物不良反应研究进展

药物不良反应已成为危害人类健康的重要公共卫生问题。人类白细胞抗原基因(HLA)是目前已知的人类最复杂基因系统。近年来研究发现,人类白细胞抗原基因多态性与药物不良反应之间有着很强的遗传相关性,且部分研究成果在临床已得到很好地应用。本文就人类白细胞抗原基因多态性与药物不良反应之间的研究及其临床应用进行阐述。

洛索洛芬钠分散片在健康人体的相对生物利用度研究

目的研究洛索洛芬钠分散片的相对生物利用度。方法采用双周期随机交叉试验设计。分别给予18名男性健康受试者试验制剂或参比制剂洛索洛芬钠60mg,采用HPLC法测定给药后不同时间的血药浓度。结果参比制剂与试验制剂的主要药物动力学参数Cmax、tmax、AUC0～6和AUC0～∞(均数±标准差)分别为:(5 221.3±1 726.1)和(5 309.0±1 946.1)ng.mL-1,(0.61±0.26)和(0.69±0.30)h,(9 507.2±4 062.0)和(9 380.5±3 765.3)ng.h.mL-1,(10 580.8±4 385.6)和(10 552.4±3 852.8)ng.h.mL-1。试验制剂对参比制剂的相对生物利用度F(以AUC0～6作为评价依据)为106.7%(94.8%～120%)。结论经统计学分析,广东先强药业有限公司生产的洛索洛芬钠分散片与上海三共制药有限公司生产的洛索洛芬钠片剂具有生物等效性。

HERG钾通道与QT综合征的药物基因组学研究进展

HERG基因多态性与QT综合征的患病风险及作用于该离子通道的药物的敏感性有关。对HERG基因多态性检测用于QT综合征的防治,相关药物的安全性再评估及个体化治疗服务具有深远的意义。因此该文主要对HERG钾通道与QT综合征的药物基因组学研究进行综述,旨在为HERG钾通道相关药物的个体化治疗和安全性评估提供参考和依据。

星形胶质细胞瘤甲基化和非编码RNA表观基因组学研究

目的星形胶质细胞瘤是一种常见的胶质瘤,患者的生存期及预后情况十分堪忧。本研究旨在发现影响星形胶质细胞瘤发生发展的重要生物标志物及通路,并根据星形胶质细胞瘤的分子遗传学特征初步建立分子分型的方法,以提高诊疗的有效性,改善患者的生存状况。方法本次研究通过Illumina 450K Infinium Methylation Bead Chip、Agilent miR NA芯片及Agilent lncR NA+mR NA表达谱芯片对33例星形胶质细胞瘤肿瘤组织及9例对照脑组织的甲基化、miR NA、m RNA及lnc RNA进行全基因组检测。通过生物信息学方法发现肿瘤组与对照组间的差异化位点及通路,并结合患者病例信息对星形胶质细胞瘤样本进行分子分型。结果通过肿瘤组与对照组的差异化分析发现,钙信号通路相关的基因、甲基化、mi RNA及lnc RNA的表达均对星形胶质细胞瘤的发生发展产生了显著的影响,并与患者的总体生存期相关。利用多平台数据整合分析方法,可将IDH基因野生型星形胶质细胞瘤分为表达特征不同的两个亚型,并且两亚型间钙信号通路的表达水平具有显著性差异。结论本课题研究结果表明,钙信号通路在星形胶质细胞瘤发生发展的过程中起到了重要的作用,可作为IDH基因野生型星形胶质细胞瘤亚型的标志物,并对患者的预后水平产生了一定的影响,具有成为新治疗靶标的潜力。

一氧化氮合酶和血管紧张素转换酶基因多态性与冠心病相关性研究进展

冠状动脉性心脏病(coronary heart dis-ease,CHD)是全球关注的公共卫生问题,是影响人类健康和寿命的关键疾病之一。一氧化氮合酶(eNOS)和血管紧张素转换酶(ACE)是体内对心血管系统具有重要作用的两种酶。基因组学研究发现eNOS和ACE基因多态性与CHD的发生具有相关性,本文就eNOS和ACE基因多态性与冠心病的易感性进行综述。

大黄酚对糖尿病脑病大鼠海马中BDNF、iNOS和氧化应激的影响

目的探讨大黄酚对糖尿病脑病的神经保护作用及其分子机制。方法应用水迷宫实验检测大黄酚对糖尿病大鼠模型学习记忆的影响;应用试剂盒法检测不同实验组海马中胆碱酯酶(AChE),胆碱乙酰基转移酶(ChAT),脑源性神经营养因子(BDNF),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和氧化应激相关指标(CAT、SOD、GSH)的活性。结果大黄酚改善了糖尿病大鼠模型的学习记忆能力,增强了糖尿病大鼠模型组海马中AChE和BDNF的活性,抑制了模型组海马中ChAT、iNOS、CAT、SOD和GSH的活性。结论大黄酚可能通过增强BDNF的活性,下调iNOS的功能及抗氧化途径从而对糖尿病脑病产生保护作用,其可能成为临床上治疗糖尿病脑病的新型药物。

药物基因组学在药物研发中的转化与应用

药物安全性和有效性是新药开发和临床用药的核心问题,也是药物基因组学研究的主要内容。目前,已阐明影响药物安全性有效性及个体化差异的首要因素是药物相关生物标记。近年来,药物基因组学各机构正式成立,各发达国家也纷纷出台各种规章,对药物研发中药物基因组学的应用进行规定。药物基因组学在上市药物的评价中已获得巨大的成功,并成功指导了数例肿瘤靶向药物从研发到上市的全过程,缩短了药物开发周期、降低了研究成本及毒副反应。

蛇床子素通过抑制PI3K/Akt信号通路减轻糖尿病脑病的炎症反应

目的探讨蛇床子素(OST)对糖尿病脑病的神经保护作用及其分子机制。方法应用水迷宫实验检测OST对糖尿病大鼠模型学习记忆的影响;应用试剂盒法检测不同实验组海马中胆碱酯酶(ACh E)和胆碱乙酰基转移酶(Ch AT)、炎症因子(包括NF-κB p65、TNF-α和IL-1β)和caspase-3的活性;应用Western印迹方法检测检测不同实验组海马中磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达。结果 OST改善了糖尿病大鼠模型的学习记忆能力,降低了糖尿病大鼠模型组海马中ACh E和炎症因子(包括NF-κB p65、TNF-α和IL-1β)及cascapse-3的活性(P<0.01),提高了Ch AT的活性(P<0.01),降低了p-Akt蛋白的表达(P<0.01)。同时,当使用LY294002阻断PI3K后,OST抑制炎症的作用更为明显,且进一步下调了p-Akt蛋白的表达。结论 OST对糖尿病脑病大鼠模型具有神经保护作用,这种保护作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路减轻炎症反应来实现的,其可能成为临床上缓解糖尿病患者并发学习记忆障碍的新型治疗药物。

UPLC-MS/MS同时测定血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用

目的:建立UPLC-MS/MS法测定人体血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用。方法:采用Waters AcQuity型超高效液相色谱联用API4000型三重四级杆质谱仪,样品处理采用固相萃取的方法,采用Thermo hypurity C18(150mm×2.1mm,5μm)色谱分析柱,流动相为10mmol/L甲酸胺-乙腈(40∶60,V/V),流速为0.3mL/min,进样体积为10μL,柱温为30℃,样品室温度为5℃,质谱应用ESI源、正离子模式、多反应监测(MRM)方式检测他莫昔芬及各代谢产物的浓度。结果:他莫昔芬、ND-Tam和TamNox线性范围为1～400ng/mL,4-OH-Tam线性范围为0.4～160ng/mL,4-OHND-Tam线性范围为2～800ng/mL,可以满足样本浓度定量检测的需要,方法稳定、特异性高,并成功地应用到用药后他莫昔芬及各代谢产物血浆浓度的检测。结论:该方法简便、准确、重复性好,可以准确地定量人体血浆他莫昔芬和代谢产物的浓度,除了为临床血药浓度监测及他莫昔芬药效学研究提供服务外,也可为遗传药理学科研提供技术方法。

蛇床子素通过激活PI3K/Akt通路减轻谷氨酸诱导的海马神经元损伤

目的:研究蛇床子素(osthole,OST)减轻谷氨酸诱导的HT22细胞损伤的机制。方法:建立谷氨酸诱导的HT22细胞损伤模型;HT22损伤细胞经OST处理,MTS法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验检测HT22细胞LDH漏出率;caspase-3活性检测试剂盒测定各组caspase-3活性;Western印迹法测定细胞内磷脂酰肌醇(-3)激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K),蛋白激酶B(protein kinase B,Akt),磷酸化PI3K(p-PI3K)和磷酸化Akt(pAkt)蛋白表达情况。结果:OST在0~10 mmol/L范围内呈剂量依赖性提高谷氨酸诱导的HT22细胞活力,降低LDH漏出率,改善HT22细胞损伤。此外,OST显著上调谷氨酸损伤细胞p-PI3K和p-Akt蛋白表达,而PI3K抑制剂LY294002明显抑制OST谷氨酸损伤细胞p-Akt蛋白表达的上调作用。结论:OST对谷氨酸损伤的HT22细胞具有保护作用,其保护作用机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。

LC-MS/MS内标法测定人血浆中西地那非的浓度

目的:建立LC-MS/MS法检测人血浆中西地那非的浓度。方法:以地西泮为内标,血浆样品经MTBE液液萃取后,采用Waters XTerraMS C18(150mm×2.1mm,5μm)柱分离,流动相为甲醇:10mmol/L醋酸铵=85∶15(V/V),流速为0.30mL/min。然后采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,西地那非和内标地西泮的离子选择通道分别为:m/z475.3→58.1和285.5→154.0。结果:西地那非的线性范围为1.50～765.90ng/mL,最低检测浓度为1.50ng/mL,日内和日间变异均<15%。结论:本法适用于西地那非的人体药物代谢动力学研究。

miRNA与药物反应个体差异

目前关于药物反应个体差异研究集中在药物代谢和药物靶点基因的单核苷酸多态性位点(SNPs)和其他基因突变(例如拷贝数的变化)的表型效应,而仅分析DNA序列不能完全解释药物反应个体差异。miRNA的发现,为其提供了新的研究方向。miRNA是一类内源性的非编码小RNA,其与靶基因mRNA 3'非翻译区(3'UTR)互补结合,引起mRNA切割或翻译抑制,从而在转录后水平下调基因表达。miRNA可负调控大量人类基因的表达,其中包括许多药物疗效相关基因。越来越多的研究结果表明,miRNA是导致药物反应个体差异的又一重要因素。本文从miR-NA调控药物代谢、药物转运和药物靶点,miR-NA及其结合位点多态性等方面对miRNA在药物反应个体差异中所起作用进行综述。

LC-MS/MS法测定人体氟桂利嗪浓度及生物等效性评价应用

目的：建立LC-MS/MS法测定人体血浆氟桂利嗪的浓度,并研究由扬子江药业集团有限公司生产的盐酸氟桂利嗪滴丸的相对生物利用度。方法：色谱柱为Thermo Hypurity C18（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为乙腈-10 mmol/L甲酸铵（含0.1%甲酸）（65∶35,V/V）;流速：0.3 mL/min;进样量：10μL;柱温：40℃,样品室温度为15℃。采用双周期随机交叉试验设计。分别给予18名男性健康受试者试验制剂或参比制剂氟桂利嗪20 mg,采用LC-MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度。结果：氟桂利嗪线性范围为0.38-196 ng/mL,氟桂利嗪最低检测限为0.1 ng/mL,方法灵敏、稳定、特异性高。试验制剂与参比制剂的主要药代动力学参数Cmax、tmax、AUC0-24和AUC0-∞分别为：（86±36）和（82±34）ng/mL、2.5 h（1-3 h）和3 h（2~5 h）、（725±338）和（709±320）ng.mL-1.h、（811±375）和（780±330）ng.mL-1.h。氟桂利嗪受试制剂与参比制剂具有生物等效性。结论：该方法简便、准确、重复性好,并成功地应用到人体盐酸氟桂利嗪生物等效性评价。

蛋白酪氨酸磷酸酶在胰岛素信号转导通路中的作用

蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phos-phates,PTPs)是调节胰岛素信号转导的关键酶。PTPs通过对胰岛素受体和胰岛素受体底物蛋白磷酸化和去磷酸化调控胰岛素信号转导。PTPs抑制剂是潜在的治疗糖尿病和肥胖症的靶点药物,可以延长胰岛素信号的转导,加速葡萄糖的吸收,使血糖降低。本文主要概述PTPs在胰岛素信号转导通路中的作用及其作为新的治疗糖尿病药物靶点的研究进展。

药物基因组转化医学教育策略

药物基因组转化医学的主要目的是根据药物基因组学知识的发展让患者获得最佳的治疗方式、最合适的药物种类和药物剂量。通过分析我国医学生教育体系存在的主要问题和目前药物基因组转化医学知识普及的迫切需要,我们总结了国内外的教学经验,对医学生开展药物基因组转化医学教学策略进行了初步探讨。

非小细胞肺癌患者DNA错配修复基因多态与铂类化疗药物毒副反应的关系

背景与目的化疗毒性是一个令非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者深受困扰的严重问题。在NSCLC患者中,错配修复(mismatch repair, MMR)系统与铂类化疗药物的毒性相关。本研究旨在探讨NSCLC患者MMR通路的基因多态性与铂类化疗药物毒性的关系。方法本研究共纳入220例中国肺癌患者,他们曾接受过至少两个周期的铂类化疗药物治疗。两个化疗周期后,对每个患者的毒性反应进行评价。我们选择了44个单核苷酸多态性研究它们与铂类化疗药物毒性的关系。结果在显性模型中,人类错配修复基因2(MutS homolog 2, MSH2)rs6544991[优势比(OR)=2.98, 95%置信区间(CI):1.20–7.40, P=0.019]与胃肠道毒性有关;MSH3 rs6151627(OR=2.38, 95%CI:1.23–4.60, P=0.010)、rs6151670(OR=2.05, 95%CI:1.07–3.93, P=0.031)和rs7709909(OR=2.38, 95%CI:1.23–4.64, P=0.010)与血液学毒性有关。此外,MSH5 rs805304与整体毒性显著相关(OR=2.21, 95%CI:1.19–4.09, P=0.012),MSH5 rs707939与整体毒性(OR=0.42, 95%CI:0.23–0.76, P=0.004)和胃肠道毒性(OR=0.44, 95%CI:0.20–0.96, P=0.038)均显著相关。结论 MMR通路的基因多态性是潜在的预测NSCLC患者化疗毒性的临床标志物。