河豚鱼皮胶原寡肽的毒理学安全性评价

以河豚鱼皮作为原料采用两步酶解法制备河豚鱼皮胶原寡肽,分子量分布主要集中在100 u^1 000 u。根据《食品安全性毒理学评价程序和方法》和《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》的要求,利用动物试验对河豚鱼皮胶原寡肽的安全性进行评价。急性经口、经皮毒性试验选用SD大鼠,大鼠经口LD_(50)>5 000 mg/kg,经皮LD_(50)均>2 000 mg/kg;皮肤、眼刺激试验选择健康白色家兔皮肤刺激强度平均分值为0,平均眼刺激积分指数(I.A.O.I)为0,眼刺激平均指数(M.I.O.I)48 h为5。皮肤变态反应(致敏)试验选用豚鼠,致敏强度为Ⅰ级。

基于问题导向的毒理学基础实验教学模式探讨

毒理学基础是预防医学本科生的一门重要的专业基础课程,兼具理论性和应用性。在传统的教学模式下,学生在理论课上被动接收知识,在实验课上重复示教操作完成实验,其知识应用能力和综合能力无法得到有效提升。针对毒理学基础实验教学中存在的具体问题,以问题导向学习(PBL)为理念,增加综合设计性实验环节,探索新的实验教学模式,为预防医学本科生的毒理学理论和研究方法的学习提供新的解决方案。

Cr(Ⅵ)诱导肝细胞凋亡与氧化损伤、p53和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的关系

目的 探讨6价铬（Cr（Ⅵ））在不同暴露水平诱导细胞凋亡的途径有无差异。方法 L-02肝细胞暴露于不同浓度Cr（Ⅵ）24h。用琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡；化学比色法检测SOD，CAT活性与GSH含量；RT-PCR检测p53，caspase 3 mRNA表达水平；免疫组化检测p53蛋白含量。结果 Cr（Ⅵ）诱导L-02肝细胞凋亡率浓度依赖性增加（r=0．997），6～12μmol·L^-1Cr（Ⅵ）处理组与对照组比差异有显著性（P〈0．05）；琼脂糖凝胶电泳表现DNA特征性梯形条带；SOD与CAT活性和GSH含量均下降，Cr（Ⅵ）处理组GSH含量与CAT活性水平明显低于对照组（P〈0．05）；3～9μmol·L^-1 Cr（Ⅵ）处理组细胞p53 mRNA，caspase 3 mRNA，p53蛋白表达水平明显高于对照组（P〈0．05）。细胞凋亡率与SOD活性、CAT活性呈负相关（r分别为-0．952和-0．885）；p53 mRNA表达与caspase 3 mRNA表达正相关（r=0．890）；p53蛋白表达与GSH含量呈负相关（r=-0．929）。结论 氧化损伤即细胞内抗氧化系统平衡的破坏在Cr（Ⅵ）诱导肝细胞凋亡中具有重要作用；在低浓度水平Cr（Ⅵ）诱导细胞凋亡具有p53和caspase 3依赖性，但在较高Cr（Ⅵ）处理水平，不排除非p53及caspase 3途径的存在。

Cr(Ⅵ)对肝细胞线粒体ATP酶6和ATP酶8基因表达的影响以及与能量代谢障碍的关系

目的探讨Cr(Ⅵ)对肝细胞线粒体ATP酶6和ATP酶8基因表达水平与能量代谢的影响及其相互联系。方法用Cr(Ⅵ)2,8和32μmol·L-1分别处理体外培养的人胚L-02肝细胞24 h后,用细胞总RNA提取试剂盒分离RNA,线粒体ATP酶6和ATP酶8 mRNA表达水平用逆转录-荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定;细胞ATP含量、线粒体呼吸链复合体酶Ⅴ活性与细胞活性氧(ROS)含量分别用化学发光法、紫外分光光度法和荧光分光光度法检测。结果与正常对照组相比,Cr(Ⅵ)2,8和32μmol·L-1使ROS显著升高(P<0.05);与正常对照组相比,Cr(Ⅵ)2μmol·L-1可使ATP酶6和ATP酶8基因表达水平增高(P<0.05),Cr(Ⅵ)8和32μmol·L-1使之明显降低(P<0.05);而呼吸链复合体酶Ⅴ活性及细胞内ATP含量均随Cr(Ⅵ)浓度的增加而显著降低(P<0.05)。ATP酶6和ATP酶8基因表达与呼吸链复合体酶Ⅴ活性及细胞内ATP含量呈正相关(r=0.858,0.795,0.809,0.766,P<0.01),与ROS水平呈负相关(r=-0.738,-0.801,P<0.01)。结论 Cr(Ⅵ)能诱导肝细胞ATP酶6和ATP酶8基因表达水平改变,导致线粒体呼吸链复合体酶Ⅴ活性及细胞内ATP含量降低。

基于抗炎、抗氧化反应探讨石斛多糖改善对乙酰氨基酚致肝损伤的作用机制

目的探讨石斛多糖(dendrobium polysaccharide,DOP)拮抗对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)致小鼠肝损伤的作用及其机制。方法将健康雄性昆明种小鼠随机分为对照组,APAP模型组,DOP低、中、高剂量干预组(225、450、900 mg·kg^(-1))、DOP对照组,其中APAP组每天灌胃300 mg·kg^(-1),DOP干预组灌胃DOP 2 h后再灌胃APAP,其余组灌胃等体积生理盐水,各组连续灌胃7 d,末次给药后20 h处死小鼠收集血清、肝脏。检测小鼠肝脏大体形态及肝脏系数;TUNEL和HE染色观察肝脏细胞凋亡和病理组织学;试剂盒检测相关指标;Western blot分析肝脏中氧化应激、炎症和凋亡相关蛋白水平。结果APAP组小鼠肝脏系数明显增加,肝脏空泡性坏死、凋亡细胞数增多,血清ALT、AST水平明显增加;与APAP组相比,DOP干预后尤其以900 mg·kg^(-1)组小鼠肝脏系数、血清ALT、AST水平明显降低,肝脏病理变化得到改善;且APAP组氧化应激、炎症水平升高,肝脏中凋亡、炎症和氧化应激相关蛋白表达失衡;DOP干预后尤其以900 mg·kg^(-1)组能够明显逆转APAP诱导的肝脏氧化应激、凋亡增加及炎症反应,并升高Nrf2、HO-1表达但降低NLRP3、HMGB1表达水平。结论DOP的保肝作用机制主要在于其抗氧化与抗炎反应,可能与DOP激活Nrf2/HO-1通路及抑制HMGB1/NLRP3通路相关。

神经酰胺在炎症反应及相关疾病中的作用研究进展

神经酰胺是鞘磷脂信号通路代谢的中心分子,可参与调控细胞增殖、分化、衰老和凋亡等细胞生命活动及多种炎症反应。神经酰胺的合成主要有从头合成途径、鞘磷脂代谢途径和补救途径,其代谢途径主要涉及神经酰胺酶和神经酰胺激酶。神经酰胺与多种炎症相关性疾病的发生发展关系密切,如慢性阻塞性肺疾病、类风湿性关节炎、炎症性肠病、多发性硬化症和阿尔茨海默病等。本文主要综述神经酰胺与不同炎症相关性疾病发生发展的关系,旨在为炎症相关疾病的防治提供新的思路。

硅沉着病患者和实验模型动物不同生物样本中氧化应激生物标志物及其应用研究进展

硅沉着病(矽肺)是在生产环境中长期吸入游离二氧化硅(SiO_(2))含量较高的粉尘(又称矽尘)导致肺部广泛结节性纤维化为主的疾病,随着纤维化的发展逐渐损害肺功能。研究表明,氧化应激是硅沉着病发病的重要机制。在硅沉着病患者或实验动物模型的不同生物样本中存在许多氧化应激生物标志物,其对硅沉着病的发生发展可能具有重要诊断和治疗价值。本文对硅沉着病患者或实验模型动物的血液、尿液、肺组织、呼出气体及支气管肺泡灌洗液中氧化应激标志物的类型、潜在生物学意义、以及优点和局限性进行综述,为其可能应用于临床实践和设定职业暴露限值提供新的方向和线索。

PI3K/Akt/mTOR通路介导巨噬细胞自噬影响矽尘致肺成纤维细胞表型转化

目的:磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol-3-kinase-protein kinase B-mammalian target of rapamycin,PI3K/Akt/mTOR)信号通路是自噬相关主要信号通路之一。自噬在硅沉着病纤维化形成过程中发挥关键作用。肺成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化是硅沉着病由炎症期进入纤维化期的标志之一。本研究旨在探讨PI3K/Akt/mTOR通路是否通过介导巨噬细胞自噬影响矽尘诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化。方法:采用100 ng/mL佛波酯诱导人单核细胞白血病细胞系THP-1细胞24 h获得巨噬细胞。以不同浓度(0、25、50、100、200、400μg/mL)二氧化硅(silicon dioxide,SiO_(2))粉尘悬浮液染毒巨噬细胞不同的时间(0、6、12、24、48 h)。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测巨噬细胞存活率,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测巨噬细胞上清液中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量。采用Transwell技术建立巨噬细胞和HFL-1细胞共培养体系,设空白对照组、SiO_(2)组、LY294002组、SC79组、LY294002+SiO_(2)组、SC79+SiO_(2)组。LY294002+SiO_(2)组、SC79+SiO_(2)组分别用LY294002(PI3K抑制剂)、SC79(Akt激活剂)预处理巨噬细胞18 h、24 h,再用SiO_(2)(100μg/mL)粉尘悬浮液染毒巨噬细胞12 h。采用免疫荧光法检测巨噬细胞中微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达情况;蛋白印迹法检测巨噬细胞PI3K、Akt、mTOR、Beclin-1、LC3的蛋白质表达水平及HFL-1细胞中Ⅲ型胶原蛋白(collagen Ⅲ,Col Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue matrix metalloproteinase inhibitor-1,TIMP-1)的蛋白质表达水平。结果:用不同浓度的SiO_(2)粉尘悬浮液染毒巨噬细胞12 h,巨噬细胞的存活率随SiO_(2)浓度的增加逐渐降低,与0μg/mL组比较,100、200、400μg/mL组细胞存活率均明显降低,细胞上清液中TGF-β1和TNF-α含量均明显增加(均P<0.05);用100μg/mL SiO_(2)粉尘悬浮液染毒巨噬细胞,巨噬细胞的存活率随染毒时间的延长逐渐降低,与0 h组比较,6、12、24、48 h组细胞存活率明显降低(均P<0.05),细胞上清液中TGF-β1和TNF-α含量均明显增加,Beclin-1和LC3Ⅱ的蛋白质表达水平均明显上调(均P<0.05)。免疫荧光法结果显示:100μg/mL的SiO_(2)粉尘处理巨噬细胞12 h后LC3的荧光呈点状聚集,且荧光强度明显高于空白对照组(P<0.05)。与空白对照组相比,SiO_(2)组HFL-1细胞中Col Ⅲ、FN、α-SMA、MMP-1、TIMP-1的蛋白质表达均上调(均P<0.05);与SiO_(2)组相比,LY294002+SiO_(2)组中巨噬细胞PI3K、Akt、mTOR的蛋白质表达均下调(均P<0.05),LC3Ⅱ和Beclin-1的蛋白质表达均上调(均P<0.05),细胞上清液中TGF-β1和TNF-α含量均降低(均P<0.01),HFL-1细胞中Col Ⅲ、FN、α-SMA、MMP-1、TIMP-1的蛋白质表达均下调(均P<0.05);SC79+SiO_(2)组巨噬细胞PI3K、Akt、mTOR的蛋白质表达均上调(均P<0.05),LC3Ⅱ和Beclin-1的蛋白质表达均下调(均P<0.05),细胞上清液中TGF-β1和TNF-α含量均增加(均P<0.01),HFL-1细胞中Col Ⅲ、FN、α-SMA、MMP-1、TIMP-1的蛋白质表达均上调(均P<0.05)。结论:矽尘染毒引起巨噬细胞的PI3K/Akt/mTOR通路抑制、自噬发生及炎症因子分泌增加,进而促进HFL-1细胞向肌成纤维细胞表型转化;调控PI3K/Akt/mTOR通路可通过影响矽尘对巨噬细胞的自噬诱导及炎症因子分泌,从而调节HFL-1细胞向肌成纤维细胞表型转化。

甲醛对雌性大鼠卵巢组织Fas凋亡途径相关基因表达的影响

目的:观察甲醛对雌性大鼠卵巢组织Fas,caspase-8和caspase-3表达的影响,探讨甲醛对雌性大鼠卵巢毒性的分子机制。方法:将40只雌性SD大鼠随机分为正常对照组和3个不同浓度甲醛处理组,腹腔注射甲醛,剂量分别为20.0,2.0和0.2mg/kg,每天1次,连续14d后处死所有大鼠后取卵巢组织,用RT-PCR检测Fas和caspase-8mRNA表达,Western印迹检测Fas蛋白表达,分光光度法检测caspase-8和caspase-3的活性。结果:甲醛染毒组动物卵巢组织Fas与caspase-8mRNA表达以及caspase-8和caspase-3活性明显高于对照组,且随剂量的增加而增加(P<0.05)。结论:Fas基因表达与caspase活性的增强可能是甲醛诱导雌性动物卵巢毒性的重要机制。

草甘膦对GC-1小鼠精原细胞的毒性作用及N-乙酰半胱氨酸的干预效应

摘要：为探讨41％草甘膦水溶液（农达）对雄性生殖细胞的毒性及其作用机制以及N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）的干预效应。以GC．1小鼠精原细胞为受试细胞，设正常对照组、草甘膦染毒组（60、90、120、150、180mg·L-1）、NAC干预组（10mmol·L NAC＋90mg·L-1农达）。MTT法检测细胞存活率，Giemsa染色法观察细胞的形态学改变，彗星试验检测细胞DNA损伤，比色法检测细胞培养液乳酸脱氢酶（LDH）以及细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）及丙二醛（MDA）水平的变化。结果显示，随着草甘膦染毒浓度增加，细胞存活率逐渐下降妒〈0．01），彗星阳性率逐渐升高（P〈0．01）；与对照组相比，草甘膦染毒组LDH活性增加（P〈0．05，60mg·L-1组除外），MDA生成量增多（P〈0．05），GSH含量降低（P〈0．05）和SOD活性降低（P〈0．05）。抗氧化剂NAC预处理具有相应的拮抗作用。研究表明，60～180mg·L。浓度草甘膦对GC-1细胞有明显的损伤作用，其机制可能是草甘膦诱导氧化应激，导致细胞通透性增加和DNA损伤。抗氧化剂NAC对草甘膦的细胞毒性具有一定保护作用。

草甘膦对小鼠的致突变作用研究

背景与目的:研究草甘膦对小鼠的致突变作用。材料与方法:采用骨髓微核试验:以不同剂量(2320、1160、580mg/kg)的草甘膦分2次经口灌胃染毒小鼠,每次间隔24h,于末次染毒后6h处死小鼠,检测骨髓嗜多染红细胞微核率;雄性小鼠精子畸形试验:设1160、580、290mg/kg的3个草甘膦剂量组,经口灌胃连续染毒5d,于首次染毒后第1、4周分2批处死动物,常规观察精子畸形率、精子数和睾丸、附睾重量及其脏器系数的变化。两种实验同时设阴性对照组(蒸馏水)和阳性对照组(CP40mg/kg)结果:2320mg/kg剂量组的微核率明显高于阴性对照组(P<0.01),染毒剂量与骨髓微核率呈现剂量依赖关系(r=0.588,P<0.01)。草甘膦染毒后1周,与阴性对照组比较,580mg/kg、1160mg/kg剂量组的精子畸形率增加而精子数减少(P<0.05,P<0.01),1160mg/kg剂量组的附睾重量及附睾系数明显下降(P<0.05);草甘膦染毒后4周,与阴性对照组比较,1160mg/kg剂量组的精子畸形率增高,精子数减少(P<0.05),睾丸和附睾重量减轻。结论:在本实验条件下,草甘膦对小鼠具有生殖毒性并具有一定的致突变作用。

钩吻提取液对Hela细胞生长增殖和细胞周期的影响

目的探讨钩吻(GelsemiumelegansBenth)提取液对Hela细胞生长增殖以及细胞周期的影响。方法采用XTT法分析细胞增殖,Timelapse显微镜形态观察,流式细胞仪检测凋亡和细胞增殖状态,综合评价钩吻提取液抗Hela细胞生长和增殖的作用。结果钩吻B组分具有明显的抑制Hela细胞增殖和诱导凋亡,且存在明显的剂量和时间-效应关系。经钩吻B处理的Hela细胞周期发生明显变化,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例增加,而G2/M期细胞比例变化不明显。结论钩吻B组分可抑制Hela细胞增殖、诱导凋亡,具有明显的抗肿瘤细胞的作用;钩吻B组分主要阻止细胞由G1期向S期转化,并在此阶段诱发凋亡。

五氯酚钠对雄性小鼠的生殖毒性作用

为研究五氯酚钠(PCP-Na)对雄性小鼠的生殖毒性作用,将100只昆明雄性小鼠随机分为5组:3个染毒组、1个阴性对照组(蒸馏水)和1个阳性对照组(环磷酰胺40mg·kg-1).以不同剂量(13.44、26.88、53.76mg·kg-1)PCP-Na经口染毒,连续染毒5d,每天1次.染毒结束后第2d和第23d分两批处死动物,检测精子数量、精子畸形率以及睾丸、附睾重量及其脏器系数的变化.结果表明,PCP-Na染毒结束后第2d,与阴性对照组相比,高剂量组(53.76mg·kg-1)精子畸形率显著增加(p<0.05),睾丸、附睾重量及附睾系数显著下降(p<0.05),其他指标无显著变化(p>0.05).中、低剂量组(26.88、13.44mg·kg-1)各检测指标与阴性对照组均无显著性差异(p>0.05);PCP-Na染毒结束后第23d,与阴性对照组相比,高剂量组(53.76mg·kg-1)精子畸形率显著增加、精子密度显著减少、睾丸和附睾重量显著下降(p<0.05),中剂量组(26.88mg·kg-1)附睾重量显著下降(p<0.05),其他指标均无显著变化(p>0.05);PCP-Na引起的精子畸形以头部畸形为主,主要为无定形,其次为无钩形、香蕉形和尾折叠.以上结果提示,在本实验条件下,PCP-Na对雄性小鼠具有明显的生殖毒性.

三价铬与六价铬化合物对L-02肝细胞毒性的比较

目的 评价三价铬 (Cr(III) )和六价铬 (Cr(VI) )对L -0 2肝细胞的细胞毒效应差异。 方法 以L -0 2肝细胞为研究对象 ,用MTT法检测L -0 2肝细胞死亡指数 ,比色法检测细胞内乳酸脱氢酶 (LDH)、天冬氨酸氨基转移酶(ALT)、丙氨酸氨基转移酶 (AST)的渗出程度。 结果 细胞处理 12h ,Cr(VI)处理组的细胞死亡指数明显高于Cr(III)细胞处理组 ,在 4～ 2 5 6μmol/L浓度范围具有明显的浓度 -效应关系 (相关系数r =0 .945 ,P <0 .0 5 )。细胞处理 5h后 ,Cr(VI)低剂量和高剂量组 (16μmol/L和 12 8μmol/L)LDH的漏出比均明显高于相应剂量的Cr(III) (P <0 .0 5 ) ;在Cr(VI)高剂量组 (12 8μmol/L)ALT与AST的漏出比显著高于相同剂量的Cr(III) (P <0 .0 5 )。 结论 Cr(VI)对L -0 2肝细胞的细胞毒效应明显大于Cr(III)。

对化学毒物诱导肝细胞线粒体损伤的保护作用机制研究进展

肝脏是化学毒物攻击的主要靶器官,线粒体作为细胞生命活动的主要亚细胞器,是许多外源化合物最敏感、也是最早侵入的靶点。探讨化学毒物诱导的肝细胞线粒体代谢障碍及保护剂的拮抗作用具有重要意义。本文从减轻氧化损伤、稳定线粒体膜功能、抑制线粒体钙超载、维持线粒体电子传递链功能和调节线粒体依赖性相关因子等方面对化学毒物造成的肝细胞线粒体损伤的相关保护机制进行了综述。

六价铬对肝细胞内活性氧和腺苷酸转运体1转录水平的影响

目的探讨重金属六价铬[Cr(Ⅵ)]的体外肝毒性。方法 L-02肝细胞经Cr(Ⅵ)0,2,4,8,16和32μmol.L-1分别染毒12,24或36 h后,采用逆转录-荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和荧光光度法分别对腺苷酸转运体1(ANT1)mRNA表达水平和活性氧簇(ROS)水平进行检测。结果 Cr(Ⅵ)32μmol.L-1处理细胞12和24 h后,ROS水平明显升高,而处理36 h后,ROS水平明显下降。Cr(Ⅵ)2～32μmol.L-1处理细胞12和24 h后,细胞内ANT1 mRNA呈明显低表达水平,而处理36 h后,细胞内ANT1 mRNA表达水平明显增高,达正常对照组的2倍左右。结论 Cr(Ⅵ)在早期(12,24 h)可使L-02肝细胞内ROS水平升高,发生氧化应激,在后期(36 h)可诱导ANT1 mRNA表达水平升高,发生能量代谢应激,可能是Cr(Ⅵ)诱导细胞线粒体损伤的分子毒性机制之一。

电压依赖性阴离子通道在线粒体依赖性细胞凋亡中作用的研究进展

电压依赖性阴离子通道(VDAC)是线粒体外膜上含量极为丰富的孔状蛋白,是细胞内代谢物分子进出线粒体的必经通道,VDAC的功能状态与线粒体的代谢和功能关系十分密切。VDAC的异常通常会引发线粒体功能紊乱,导致ATP水平或转膜电位下降、细胞色素c释放等凋亡程序的启动。VDAC可与许多物质相互作用而发挥诱导细胞凋亡或抑制细胞凋亡的效应,从而在线粒体依赖性细胞凋亡途径中有着十分重要的作用。VDAC对细胞凋亡的影响机制可应用于药物治疗靶点、外源化学物毒性机制的研究,因此,VDAC的作用是近年来外源化学物所致细胞凋亡机制研究领域中的热点问题。

酸性鞘磷脂酶在二氧化硅致小鼠胚肺成纤维细胞纤维化体外模型中的作用

目的观察酸性鞘磷脂酶(ASM)在二氧化硅(SiO2)粉尘致小鼠胚肺成纤维细胞(NIH3T3)纤维化过程中的变化及规律,探讨ASM在硅尘致肺纤维化体外模型中的作用。方法收集SiO2200 mg·L-1刺激小鼠原代肺泡巨噬细胞(PAM)12 h的培养上清再刺激小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3)6,12,18,24,36和48 h,ELISA法测定PAM培养上清中白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子ɑ(TNF-ɑ)及转化生长因子β1(TGF-β1)的含量;高效液相色谱法测定NIH3T3细胞内的ASM活性;Western蛋白质印迹法测定NIH3T3细胞内Ⅲ型胶原蛋白质的表达。结果 SiO2200 mg·L-1刺激PAM 12 h,培养上清中IL-8,TNF-ɑ及TGF-β1的分泌中明显增加(P<0.01)。PAM上清刺激NIH3T3细胞24,36和48 h,细胞ASM活性明显升高(P<0.05),在36 h达到峰值,加入地昔帕明1.25μmol·L-1细胞ASM活性随着时间延长而显著降低。Western蛋白质印迹法结果显示,PAM上清刺激NIH3T3细胞24,36及48 h,细胞内Ⅲ型胶原蛋白表达明显增加(P<0.05),在36 h达到峰值,加入地昔帕明1.25μmol·L-1组Ⅲ型胶原蛋白表达随着时间延长而降低。结论抑制ASM活性可能对改善肺纤维化有一定的作用。

酒石酸锑钾对肝L-02细胞的抑制和凋亡诱导影响

目的探讨酒石酸锑钾(PAT)对人胚肝L-02细胞的生长、细胞周期和诱导凋亡的影响。方法采用改良的噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度PAT处理24、48、72、96及120 h对L-02细胞的生长抑制效应,用PI单染流式细胞术检测不同浓度PAT处理24 h诱导细胞周期的改变情况,用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测不同浓度PAT作用24 h对细胞凋亡的影响。结果PAT染毒24、48、72、96及120 h,随PAT染毒剂量的增大,L-02细胞生长抑制率明显升高;浓度200μmol/L PAT作用24 h使细胞发生S期阻滞,≥400μmol/LPAT使细胞发生G1期阻滞;浓度200μmol/LPAT作用24h诱导细胞凋亡,≥400μmol/LPAT可导致细胞坏死。结论在一定剂量下,PAT可以显著抑制L-02细胞的生长增殖,低剂量PAT主要引起L-02细胞发生S期阻滞和细胞凋亡,高剂量PAT主要引起L-02细胞发生G1期阻滞和细胞坏死。