综合性大学医学检验专业培养方案的制订

中南大学在2002年对所有本科专业的培养方案进行了修订。笔者通过阐述计划修订的指导思想、计划修订的基本原则,并根据医学检验专业特点,进行了一些改革,对新培养方案的制订进行探讨。

医学检验专业研究生参与实验教学的做法与体会

中南大学检验系医学检验专业研究生积极参与检验专业本科生的实验教学．并对实验教学进行了适当改革，为实验教学更好发展提供活力。通过实验教学，研究生在一定程度上提高其自身的能力．又以其自身的优势和能力感染本科生、激励本科生学习，有利于科技人才的培养。

母血、羊水中IGF水平与胎儿宫内生长受限关系的研究

目的 探讨胰岛素样生长因子 -Ⅰ (IGF -Ⅰ )和IGF -Ⅱ与胎儿生长发育的关系。 方法 抽取 15例分娩IUGR胎儿 (IUGR组 )及 2 0例分娩正常儿 (对照组 )产妇肘静脉血、新生儿脐静血及羊水。采用放射免疫法及免疫放射法分别测定其IGF -Ⅰ、IGF -Ⅱ水平。 结果 IUGR组产妇血清IGF -Ⅰ水平低于对照组 ,IGF -Ⅱ水平无显著差异 ;IUGR组脐血及羊水中IGF -Ⅰ、IGF -Ⅱ水平较对照组显著降低。 结论 检测母血及羊水中IGF -Ⅰ、IGF -Ⅱ水平可监测胎儿生长发育 ,早期诊断IUGR。

女性系统性红斑狼疮病人性激素水平

目的:探讨女性系统性红斑狼疮(SLE)病人性激素水平及其在SLE发病中的作用。方法:采取电化学法检测98例SLE病人血清雌二醇(E2)、雌三醇(E3)、睾酮(T)、孕酮(Prog)和泌乳素(PRL),并与36例健康妇女作对照。结果:SLE病人组E2,E3,Prog和PRL明显高于对照组(P<0.05);25～34岁SLE病人E2,Prog,PRL水平较其它年龄组和对照组为高(均P<0.05),且活动期E2和PRL明显高于稳定期(P<0.05)。结论:性激素与SLE的发生发展密切相关。

临床分离革兰阴性杆菌耐药性分析及金属β-内酰胺酶检测

目的了解临床标本分离的革兰阴性（G^-）杆菌的耐药性及产金属β-内酰胺酶现状，为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法应用MicroScan及TDR-100微生物鉴定系统，结合K-B纸片扩散法对分离菌株进行鉴定和药物敏感性测定；采用双纸片协同法检测金属B一内酰胺酶。结果839株G^-杆菌中，肠杆菌科细菌450株，非发酵菌389株。肠杆菌科以大肠埃希菌为主，占17．52％，其次为肺炎克雷伯菌，占11．80％；非发酵菌以铜绿假单胞菌为主，占24．43％，其次为鲍曼不动杆菌，占8．58％。肠杆菌科细菌对美罗培南耐药率为0～11．8％，而对美洛西林、头孢哌酮、氨苄西林／舒巴坦、复方磺胺甲曙唑及庆大霉素耐药率达41．2％～91．3％；非发酵菌对头孢吡肟和美罗培南耐药率分别为0-20．0％以及0～30．0％，而对美洛西林、复方磺胺甲嗯唑及庆大霉素耐药率达40．0％-93．3％。在耐头孢他啶和／或美罗培南的258株G^-杆菌中，共检出17株（6．59％）金属β-内酰胺酶阳性菌，产该酶菌株对多种抗菌药物耐药。结论临床分离的G^-杆菌耐药已十分严重，并出现产金属β-内酰胺酶菌株；应加强对细菌耐药性监测，防止耐药菌株播散，尤其是产金属β-内酰胺酶菌株感染的暴发。

车前草、车前籽抗氧自由基作用的比较研究

目的 研究车前草、车前籽抗氧自由基作用及其清除氧自由基的能力是否存在差异。 方法 利用过硫酸铵 /N ,N ,N ,N -四甲基乙二胺 (AP -TEMED)体系产生超氧阴离子自由基 (O .2 )及邻二氮菲H2 O2 /Fe2 + 体系产生羟自由基(·OH) ,采用分光光度法 (波长 5 3 0nm和 5 3 6nm )测定车前草、车前籽对O .2 和·OH的清除作用。 结果 车前草、车前籽对O .2 和·OH均有明显清除作用 (P <0 .0 1) ,车前籽清除O .2 作用强于车前草 (P <0 .0 1)。 结论 车前草、车前籽清除氧自由基作用可望用于临床。

双吲哚马来酰亚胺抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性的实验研究

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂双吲哚马来酰亚胺对鼻咽癌细胞CNE2端粒酶活性的影响 ,为体内端粒酶活性的调节机制的研究提供理论基础。方法 用不同浓度双吲哚马来酰亚胺处理鼻咽癌细胞CNE2不同时间后 ,用台盼蓝染色法检测细胞生存能力 ,用PCR EIA法检测端粒酶活性。结果 PKC抑制剂双吲哚马来酰亚胺能显著地抑制鼻咽癌细胞CNE2端粒酶活性 ,且具有时间和剂量依赖性。该抑制剂不影响被处理细胞的生存能力 ,因为大多数被处理细胞能生存 (>80 % ) ,不同浓度双吲哚马来酰亚胺处理鼻咽癌细胞CNE2不同时间后细胞生存能力无统计学差异 (F =2 .4 4 ,P >0 .0 5 )。结论 双吲哚马来酰亚胺能显著抑制鼻咽癌细胞CNE2端粒酶活性 ,且具有时间和剂量依赖性。

重症监护病房细菌耐药性监测

目的了解湘雅医院重症监护病房(ICU)临床分离病原菌的分布及其对抗菌药物的耐药性,为临床经验性使用抗菌药物提供依据。方法对该院ICU2003年1月￣2005年12月分离病原菌的分布及耐药情况进行回顾性分析。结果共分离出847株病原菌,其中革兰阴性杆菌573株(67.7%),以铜绿假单胞菌为主(16.5%);革兰阳性球菌265株(占31.3%),以凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)为主(13.6%);其它棒状杆菌及真菌9株(1.1%)。呼吸道标本分离病原菌以非发酵菌为主,占43.1%;血液标本以微球菌为主,占41.7%;革兰阴性菌对美罗培南敏感性较高,耐药率为1.1%～12.5%。革兰阳性球菌对万古霉素高度敏感,耐药率为0%～2.7%。鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对6种常用抗菌药物的耐药率超过了50.0%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分别高达95.8%和82.6%。结论该院ICU分离病原菌以革兰阴性杆菌为主,尤以铜绿假单胞菌常见。病原菌多重耐药十分严重。及时监测ICU病房细菌分布及耐药性对指导临床选用抗菌药物十分重要。

458株临床分离菌的种类分布及耐药性分析

目的 通过对 45 8株临床分离菌的细菌种类分布及耐药性研究 ,指导临床合理用药。 方法 细菌鉴定采用常规方法 ,药敏试验采用纸片扩散法 (K -B法 ) ,并按 1999年美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)标准进行分析和质控。 结果 最常见的临床分离菌依次为大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌、凝固酶阴性的葡萄球菌、克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、肠杆菌属细菌等。 45 8株临床分离菌对常用较新 17种抗生素均有不同程度的耐药。 结论 临床微生物实验室应及时总结并不断监测临床分离菌对常用较新抗生素的耐药性 ,临床医生必须关注病原菌的分布及耐药情况 。

母血、羊水中胰岛素样生长因子测定及羊膜腔内给药早期诊治胎儿生长

目的探讨胰岛素样生长因子(IGFs)与胎儿生长受限(FGR)的关系以及胎儿生长受限早期治疗的方法。方法挑选FGR孕妇44例和正常孕妇36例,抽取中、晚期母血及羊膜腔穿刺术抽取羊水检测IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平。同时将44名FGR孕妇随机分为治疗组和对照组,FGR治疗组行羊膜腔内输注小儿氨基酸治疗,而FGR对照组采用孕妇静脉滴注复方氨基酸治疗,并运用多参数B超比较其疗效。结果(1)FGR孕妇母血中IGF-Ⅰ水平、羊水中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平显著低于同期正常孕妇(P<0.01),而两组孕妇母血中IGF-Ⅱ水平无显著性差异(P>0.05)。(2)经治疗后,FGR治疗组羊水中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平显著升高(P<0.01),母血IGF-Ⅰ水平也明显升高(P<0.01);而FGR对照组IGF水平无明显改变(P>0.05)。(3)FGR治疗组羊水中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平,母血IGF-Ⅰ水平较FGR对照组显著升高(P<0.01);FGR治疗组孕妇宫高、腹围,胎儿双顶径、股骨长度净增长值及新生儿出生体重均显著高于对照组(P<0.01),且治疗组胎儿出生体重接近正常水平。结论检测母血IGF-Ⅰ及羊水中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平可早期诊断FGR及监测胎儿宫内生长。羊膜腔内输注小儿氨基酸是治疗FGR的有效方法。

细胞色素P4502E1基因多态性对再生障碍性贫血易感性的影响

目的探讨CYP2E1基因多态性对再障遗传易感性的影响。方法应用病例对照分子流行病学研究方法,采用PCR-RFLP和PCR方法分别分析72例再障病人和80例健康对照的CYP2E1的PstΙ和CYP2E1的96bp插入多态性。结果CYP2E1(c1c2,c2c2)基因型在再障组和对照组的频率分别为50.00%,45.00%,差异无显著性(P>0.05);CYP2E1的96bp插入多态在再障组和对照组的频率分别为41.67%,27.50%,亦差异无显著性(P>0.05);联合分析时,发现CYP2E1(c1c2,c2c2)+Ins96(+/+,+/-)基因型的个体较正常野生型个体患再障危险性升高(OR值为4.88,P<0.05)。结论CYP2E1(c1c2,c2c2)+Ins96(+/+,+/-)基因型与再障遗传易感性有关,可能在再障的发病过程中起重要作用。

原发性高血压病的病因及发病机制与哲学

人体是一个开放的系统，与周围环境发生相互作用．决定着健康状况。原发性高血压病是一种由多种因素诱发的疾病，其发病原因可概括为外界因素即外因和机体内部的致病因素即内因。许多基因，如：AGP，ACE．ATIR，AT2R，GNU3，Insulin Receptr，ADD，eNOS与原发性高血压病息息相关.原发性高血压病的危险因素还包括不合理膳食，心理压力.不良嗜好等。

胎儿生长受限孕妇血及脐血内脂质过氧化物和一氧化氮水平

目的探讨母血及脐血中脂质过氧化物(LPO)和一氧化氮(NO)水平与胎儿生长受限(FGR)发生的关系及其临床应用价值。方法取38例妊娠合并FGR(FGR组)及50名正常孕妇(对照组)肘静脉血及其新生儿脐血,应用改良的硫代巴比妥酸(TBA)法测定血清LPO水平;应用硝酸盐还原酶法测定血清NO水平。结果FGR组患者血LPO和NO水平与对照组相比均显著升高(P<0.01),其新生儿脐血LPO和NO水平也显著升高(P<0.001)。两组孕妇母血、脐血中LPO和NO水平均呈正相关(P均<0.01)。结论LPO和NO均可能参与了FGR的发病,检测母血及脐血中LPO和NO水平可作为FGR的辅助诊断指标之一。

端粒酶检测方法的改进

TRAP-PCR法是端粒酶检测的经典方法,在此基础上,对细胞裂解液成分、PCR等作了进一步的改进,改进后细胞裂解效率更高,而端粒酶的活性并没有受到影响,同时电泳条带更为清晰。

抗富组氨酸糖蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的 :制备抗富组氨酸糖蛋白 (HRG)单克隆抗体 ,用于建立夹心ELISA方法检测血浆HRG浓度。方法 :用淋巴细胞杂交瘤技术 ,制备单克隆抗体 ,并对其免疫学特性进行了研究。结果 :建立了二株稳定分泌抗HRG单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (9E7C9和 3C6 F3) ,染色体数分别为 10 2和 96条 ,免疫球蛋白亚类均为IgG1。以羟基磷灰石法从腹水纯化McAb 9E7C9,SDS -PAGE检测其纯度 ,Westernblotting分析表明其可特异性地识别分子量为 670 0 0的抗原分子。用辣根过氧化物酶标记hcAb ,建立双抗夹心ELISA法 ,测定正常人血浆HRG含量为 110 .3± 9.7mg/L。结论 :所得McAbs特异性强 ,用其建立的夹心ELISA检测HRG的方法线性较好 ,灵敏度达 1ng/ml。

FGR的孕妇血清脂质过氧化物水平检测及意义

目的 探讨血清脂质过氧化物 (LPO)与胎儿宫内生长受限 (FGR )发生的相关性。 方法 抽取 5 0例胎儿生长受限的孕妇 (FGR组 )及 5 0例正常孕妇 (对照组 )肘血 ,采用改良的硫代巴比妥酸 (TBA)法测定血清脂质过氧化物水平。 结果 FGR组LPO水平明显增高。 结论 氧自由基与胎儿宫内生长受限的发生有关 ,检测孕妇血清LPO可作为胎儿生长受限诊断依据之一。

人源性基质金属蛋白酶-1原核表达载体的构建与鉴定

目的 构建人源性基质金属蛋白酶 -1(MMP -1)原核表达载体。 方法 从人肝组织提取总RNA ,以此为模板 ,逆转录巢式PCR扩增MMP -1全编码区基因片段 ,构建含目的片段的T载体克隆及原核表达载体 pMAL -C2x重组质粒亚克隆 ,经双酶切及核苷酸测序进行分析鉴定。 结果 成功地构建了人MMP -1原核表达载体。 结论 构建的人MMP -1原核表达载体 ,为以后MMP -1融合蛋白的表达并获得具有抗原性的MMP -1融合蛋白奠定了基础。

加强基本技能训练，规范研究生管理制度

研究生教育作为大学教育的最高层次，主要培养各学科的高级专门人才．要达到高起点、严要求，培养德才兼备的优秀医学科技人才的目的，研究生培养管理工作是不可或缺的。要保证研究生顺利完成硕士论文，建立并执行实验室规章制度以及对研究生进行实验培训是必不可少的。

蛋白激酶C抑制剂对人肺腺癌细胞端粒酶活性的影响

目的：探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂Bisindolylm—aleimidel对培养人肺腺癌细胞A549的端粒酶活性的影响，为体内端粒酶活性的调节机制的研究提供理论基础。方法：用不同浓度Bisindolylmaleimide I处理培养人肺腺癌细胞A549不同时间后，用台盼蓝染色法检测细胞生存能力，用PCR-EIA(polymerase chain reaction-based enzyme immunoassay)法检测端粒酶活性。结果：PKC抑制剂Bisindolylm-aleimideI能特异地抑制培养人肺腺癌细胞A549端粒酶活性，且具有时间和剂量依赖性。该抑制剂不影响被处理细胞的生存能力，因为大多数被处理细胞能生存(>80％)，不同浓度Bisindolylmaleimide I处理培养人肺腺癌细胞A549不同时间后细胞生存能力无统计学差异(F=2．44，P>0．05)。此外，PCR—EIA法具有较高的灵敏度(最低检出限为15ng／μL的细胞提取物蛋白浓度)和特异性。结论：Bisindolylma-leimide I抑制培养人肺腺癌细胞A549端粒酶活性可能是通过PKC而起作用，PKC可能参与体内端粒酶活性的调节。PCR-EIA法具有较好的灵敏度与重复性，无同位素污染，简便、快速，检测成本低，无需特殊仪器，适合于各级医院推广。