网络资源在生理学教学中的应用

应用Internet 为媒介进行教学活动,是对所有从事生理学教学与科研工作的人员改进知识结构,提高教学效果的一项非常重要的手段,结合几个重要网站,介绍了在生理学教学中使用网络资源及注意事项来促进生理学的教与学.

野生动物保护视域下的生理学实验教学思考

“三有动物”中华蟾蜍被广泛应用于医学教学实验及科学研究,且具有重要的药用价值。社会上对蟾蜍的需求日益增长与蟾蜍资源不足相矛盾。文章就国家野生动物保护法及中华蟾蜍的资源现状进行简述,对生理学实验中华蟾蜍替代策略的研究进行综述并提出思考,呼吁高校生理学教学实验采用牛蛙替代中华蟾蜍,以减少蟾蜍资源的消耗,同时加强对医学生野生动物保护意识及相关法律知识的教育,是开展生理学课程思政教育的重要融入路径。

在生理学教学中开展课外讲座的效果调查与思考

目的了解生理学课外讲座的教学效果，学生对讲座的态度，对讲座内容、形式等方面的建议。方法采用典型随机抽样法对中南大学湘雅医学院2008级八年制临床医学专业，2009级五年制临床医学、医学检验、基础改革班、麻醉医学、口腔医学、精神卫生专业500名学生进行问卷调查。计算调查问卷中各选项所占百分比，直接描述调查结果。结果参加讲座的学生均认为有必要举办生理学讲座；教师应对学生感兴趣的方面安排讲座，注意启迪思维，加强师生互动；67．6％的学生认为讲座上所学知识有利于科研思路的拓展。结论课外讲座受到学生普遍欢迎，对培养学生严密的科学思维能力有重要作用。

应用“类比思维”构建组织学PBL模式

构建新的PBL模式是为了探索在我国现有的医学教育条件下,如何在医学基础课程组织学中进行PBL教学的方法。通过创新模式,使之本土化,将有利于PBL教学在我国的使用和推广。

热休克因子1对内毒素血症小鼠的中性粒细胞浸润的影响

目的探讨热休克因子1对内毒素血症小鼠的中性粒细胞浸润的影响。方法采用野生型小鼠和热休克因子1基因敲除小鼠复制内毒素血症模型。运用组织切片HE染色察肺、肝和肾组织的组织形态学变化,通过组织切片抗粒细胞染色的免疫组化和组织的髓过氧化物酶活性分析中性粒细胞浸润的差异。结果 HE染色显示,脂多糖引起野生型小鼠的肺、肝和肾组织中性粒浸润明显增加,肺间质水肿,肾小球充血。而脂多糖引起热休克因子1敲除小鼠的多器官的炎症和组织损伤则更加恶化。抗粒细胞染色和组织髓过氧化物酶活性测定的结果发现热休克因子1缺失引起更多的中性粒细胞浸润内毒素血症的肺、肝和肾组织。对照的野生型小鼠和热休克因子1敲除小鼠,均具有正常的组织形态学,几乎没有或只有几个中性粒细胞浸润,肺、肝和肾组织髓过氧化物酶活性都很低,两组之间没有明显的差异。结论热休克因子1对脂多糖诱导的内毒素血症小鼠的中性粒细胞浸润具有抑制作用。

康复训练对脑出血大鼠室管膜下区NSCs增殖与分化的影响

目的探讨康复训练对大鼠脑出血后室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。方法 75只SD大鼠随机分为康复组、制动组和假手术组(每组25只),康复组和制动组用胶原酶诱导脑出血模型,假手术组用生理盐水替代胶原酶。康复组每天予以抓握、平衡、旋转等训练,制动组置于网状笼内固定,假手术组在笼内自由活动。每组大鼠康复前后进行神经功能评分,分别于康复训练后1、4、7、14和28天处死动物。应用免疫组织化学方法检测大鼠SVZ神经细胞巢蛋白(Nestin)和5-溴脱氧尿核苷(BrdU)表达的变化。结果康复组神经功能缺损评分低于制动组(P<0.05)。康复组大鼠SVZ BrdU阳性、Nestin阳性细胞在不同时间点均多于制动组大鼠(P<0.05),第7天康复组SVZ BrdU阳性、Nestin阳性细胞表达达到高峰,14天时表达逐渐减少(P<0.05,P<0.01)。结论康复训练可促进脑出血后大鼠NSCs增殖,并向神经元分化。

金诺芬在卵巢癌中的作用机制及研究进展

卵巢癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,所致死亡率逐年上升。金诺芬(AF)是一种广泛应用于抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤的金属配合物,在卵巢癌细胞中主要通过抑制增殖,诱导凋亡,诱导氧化应激和逆转耐药等发挥抗肿瘤作用。本综述旨在对AF在卵巢癌治疗中的最新研究进展进行综述,为AF的进一步研究和临床应用提供新思路。

白藜芦醇在子痫前期中的作用机制及研究进展

子痫前期是起源于胎盘功能障碍的全身炎性多系统综合征,严重威胁母婴健康。白藜芦醇(Resveratrol)是一种抗衰老、抗氧化应激、抗炎、诱导细胞凋亡和增强胰岛素敏感性的天然多酚化合物。研究表明,白藜芦醇通过抑制氧化应激,抵抗炎症,调节血管功能,促进滋养细胞侵袭,调节免疫功能等在子痫前期的病理生理过程中发挥有效作用。综述白藜芦醇在子痫前期的潜在作用机制及其研究进展,为白藜芦醇进一步在子痫前期的研究和应用提供参考。

血管内皮生长因子基因沉默抑制人胶质瘤裸鼠移植瘤生长及血管生成的研究

目的观察靶向血管内皮生长因子（VEGF）的短发夹RNA（shRNA）对裸鼠人脑胶质瘤中VEGF基因表达的抑制作用。方法体外培养人脑胶质瘤U251细胞株，建立人脑胶质瘤裸鼠皮下接种模型。将成功造模的30只裸鼠随机分为A、B、C3组（每组10只），分别给予不同处理。观察肿瘤生长。免疫组织化学检测瘤组织中VEGF蛋白表达及组织内的微血管密度（MVD）改变。结果治疗5周后，VEGF shRNA组（A组）的肿瘤体积为654．0mm^3、抑瘤率达65．2％，与空质粒组（B组）1790．4mm^3、4．7％或PBS组（C组）1880．3mm^3、0％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。A组荷瘤组织中VEGF和MVD分别为9．52、22．02，与B组17．18、43．58或C组17．82、45．32比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。VEGF蛋白表达与MVD间存在正相关性（r=0．721，P〈0．01）。结论应用RNAi技术沉默VEGF基因能明显抑制人脑胶质瘤细胞株U251裸小鼠移植瘤的生长。

表皮生长因子对肿瘤坏死因子α致HaCaT细胞凋亡的抑制作用

目的了解肿瘤坏死因子α(TNF-α)导致HaCaT细胞凋亡过程中过氧化物酶体增殖物激活受体B(PPARB)的表达情况,探讨表皮生长因子(EGF)对HaCaT细胞的保护机制。方法将培养的HaCaT细胞分为正常对照组(不作任何处理)、TNF-α小剂量组(10 ng/ml TNF-α处理)、TNF-α大剂量组(20 ng/ml TNF-α处理)、EGF+TNF-α小剂量组、EGF+TNF-α大剂量组,后2组先用20 ng/ml EGF培养4 h后,再分别予以10、20 ng/ml TNF-α处理。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)荧光检测试剂盒测定caspase-3的活性,噻唑蓝比色法检测细胞存活率。以5、10、20、40 ng/ml的EGF处理HaCaT细胞,采用反转录-PCR和蛋白质印迹法检测PPARβmRNA及其蛋白的表达。结果与TNF-α小剂量组[(32±6)%]、TNF-α大剂量组[(57±6)%]比较,EGF+TNF-α小剂量组、EGF+TNF-α大剂量组细胞凋亡率[(20±3)%、(28±4)%]明显下降(P<0.01),caspase-3活性降低、存活率上升(P<0.01)。20 ng/ml EGF处理细胞时,PPARβmRNA及其蛋白表达最强。结论EGF在抑制TNF-α导致的HaCaT细胞凋亡的同时,亦增强细胞中PPARβ的表达。

转铁蛋白受体介导的Survivin对U251细胞生长的抑制作用

目的构建Survivin短发夹状RNA（shRNA）序列的表达载体并观察其对神经胶质瘤细胞U251生长的抑制作用。方法针对Survivin基因编码shRNA的序列，克隆到携带绿色荧光蛋白基因的载体，经酶切电泳和DNA测序鉴定。采用转铁蛋白-多聚乙烯亚胺（Tf-PEI）介导的转染方法将重组的shRNA质粒转入U251细胞后，通过倒置荧光显微镜和流式细胞仪观察绿色荧光蛋白的表达，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Westernblot分别检测SurvivinmRNA和蛋白表达；采用MTF法测定细胞增殖。结果编码短发夹状的RNA序列被成功地插入到预期位点。转染SurvivinshRNA1、shRNA2载体分别入U251细胞后，其bcl-2蛋白表达水平均显著降低，P〈0．05。U251细胞在48、72和96h细胞生长明显受到抑制，分别与转染阴性shRNA组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论构建的Surcivin shRNA可特异性地抑制U251细胞生长。

机能实验教学现状分析与学生科研能力培养对策

本文作者以在校七年制医学生的身份调查发现,中南大学湘雅医学院现行的机能实验教学体系(包括生理学、病理生理学和药理学的实验)虽然在训练七年制医学生科研能力方面进行了积极有效的探索与尝试,但仍然无法满足学生的需求,尚需要进一步加强。对此,作者结合自己的学习经历和体会进行了初步分析与思考,并设想建立一种“组织课外科研小组,开放机能实验室”的创新人才培养模式,为确保人才培养质量探索一条新路。

姜黄素逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药的机制研究

目的:建立抗人紫杉醇的人卵巢癌细胞株(OVCAR3/T)。研究姜黄素逆转对紫杉醇耐药的卵巢癌细胞株(OVCAR3/T)的作用,并探讨其相关的分子机制。方法:通过紫杉醇浓度梯度递增法诱导构建OVCAR3/T细胞株。MTT法检测OVCAR3/T对紫杉醇的IC50;比较耐药细胞和敏感细胞的细胞形态、自噬相关基因及蛋白质;MTT检测不同作用时间、不同浓度姜黄素作用于OVCAR3/T后细胞增殖生长情况;平板克隆实验检测OVCAR3/T细胞集落形成能力;RT-qPCR分析自噬相关基因的mRNA表达情况;Western blot检测自噬相关蛋白的表达情况。结果:成功构建出对紫杉醇耐药的人卵巢癌细胞株OVCAR3/T(耐药株指数为6.87);OVCAR3/T细胞形态不规则,集落形成能力减弱,自噬增加;姜黄素呈时间、浓度梯度抑制耐药细胞生长;姜黄素处理后的耐药细胞自噬呈剂量依赖性降低,且使耐药细胞对紫杉醇重新敏感。结论:姜黄素能有效逆转OVCAR3/T细胞耐药,且这可能与抑制细胞自噬相关,姜黄素有望成为逆转卵巢癌耐药的抗肿瘤药物。