2011-2013年中南大学湘雅三医院烧伤科病房致病菌耐药情况及流行病学分析

目的总结201 1-2013年中南大学湘雅三医院烧伤科病房致病菌的分布及耐药情况,为临床提供最新的流行病学资料,以优化临床用药方案。方法收集2011年1月-2013年12月烧伤科送检的1240例患者的2025份标本的细菌培养及药敏检测资料,并与1995-2000年烧伤科送检标本的细菌培养及药敏检测结果进行对比分析。结果近3年烧伤科检出病原菌以革兰阴性菌为主,检出率最高者为铜绿假单胞菌,其次为鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌。铜绿假单胞菌对多黏菌素B耐药率最低,为48.4%;鲍曼不动杆菌对替加环素耐药率最低,为48.8%;金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药率最低,为5.3%。与1995-2000年的检测结果相比,革兰阴性菌检出率呈上升趋势,革兰阳性菌及真菌检出率呈下降趋势,且优势菌及其抗菌谱变化较大。结论中南大学湘雅三医院烧伤科病房近年来的细菌学分布有所变化,整体上呈现出多重耐药、高耐药性的特征,对临床控制和治疗耐药菌株感染提出了严峻的考验。

中药合剂对特重度烧伤患者免疫功能的影响

目的 :探讨中药合剂清火败毒饮对特重度烧伤患者免疫功能的调理作用。方法 :将 30例特重度烧伤患者分成两组 ,两组均进行常规治疗 ,中药组加用中药合剂治疗 ,治疗前及治疗后各时间段测定外周血中T淋巴细胞亚群和体液免疫功能 ,并判定两组治疗效果。结果 :与对照组比较 ,中药组CD3、CD4 、CD4 /CD8值下降程度轻 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,CD8升高程度轻 (P <0 0 1) ,但均恢复快 ;IgG、IgA、IgM、C3、C4 值均有不同程度降低 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,但中药组回升早 ,恢复快而好。结论 :中药合剂对特重度烧伤患者的细胞、体液免疫功能均有调理作用。

中药对特重度烧伤患者T淋巴细胞亚群的调理作用

目的 :探讨中药合剂对特重度烧伤患者T淋巴细胞亚群的调理作用。方法 :用 5种中药配制成的合剂治疗特重度烧伤患者 ,并测定外周血中T淋巴细胞亚群 ,以判定其疗效。结果 :中药喂服治疗组CD3 、CD4、CD4/CD8值降低程度轻 ,回升早 ,恢复快 ,CD8增高程度小 ,恢复快。结论 :中药合剂对特重度烧伤患者的T淋巴细胞亚群具有明显调理作用。

中药合剂对大鼠严重烧伤后炎症反应的保护作用研究(英文)

目的 应用严重烧伤大鼠模型 ,研究中药合剂对烧伤炎症反应的保护作用。方法 Ⅲ度 30 %TB SA大鼠随机分为假烫组 (N组 )、单纯烫伤组 (S组 )和烫伤后中药合剂喂服组 (C组 ) ,采用放射免疫法 ,分别于伤后 6h、1、5、10、2 0d时检测大鼠血清TNFα、IL - β、IL - 6、IL - 8、IL - 4和IL - 10含量。 结果 S组和C组血清中各指标伤后明显升高 ,C组促炎因子 (TNFα、IL - β、IL - 6、IL - 8)分别在不同时相点低于S组 ,而抗炎因子 (IL- 4、IL - 10 )分别在不同时相点高于S组。结论 中药合剂对严重烧伤大鼠炎症反应具有明显保护作用 ,且为双向性调理。

严重烧伤病人营养支持的临床护理体会

目的 探讨严重烧伤病人营养疗法中的护理经验。方法 回顾性总结和分析158例病人的营养护理疗法，休克纠正过后，实行早期胃肠道营养，4～7d静脉营养液以能量为主，此后注意加强蛋白质，氨基酸、及脂肪乳剂的补充。结果 158例病人均未出现体重明显下降及营养不良，治疗中也未发生严重并发症，全部治愈。创面愈合时间为36-82d。结论 严重烧伤的营养支持宜采用胃肠道与静脉营养相结合的原则，而护理工作至关重要。

烧伤换药时使用度冷丁有关问题的思考

对于烧伤换药伴随的操作痛,医生应积极地预防和处理。使用度冷丁控制操作痛有效且合理。度冷丁依赖的问题不容忽视,但重视度冷丁的依赖性并不意味着抵制度冷丁科学、规范地使用。烧伤换药前使用度冷丁的镇痛效果好于烧伤换药中患者出现剧痛后使用度冷丁的镇痛效果。

MEBT/MEBO对小鼠烧伤创面组织中K19表达的影响及作用机制

目的探究烧伤创疡再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对烧伤创面组织中角蛋白19 (keratin 19, K19)表达的影响及可能的作用机制。方法选取15只健康雄性昆明小鼠,按照随机数表法随机选取5只作为对照组,10只建立深Ⅱ度烫伤模型后随机分为模型组与治疗组,其中治疗组小鼠创面采用湿润烧伤膏进行处理、模型组小鼠创面采用生理盐水进行处理、对照组小鼠背部脱毛后不做任何处理,1周后取皮肤或创面组织并通过免疫组织化学染色、蛋白质印迹(Western blot)及定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, Q-PCR)等技术检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3及K19的表达水平。结果治疗第1-7天,治疗组小鼠创面清洁,并始终保持湿润状态,且随着治疗时间的延长逐渐呈现上皮化状态;模型组小鼠创面逐渐加深,并出现感染征象。治疗1周后,免疫组织化学染色法及Western blot法检测结果显示,3组小鼠皮肤或创面组织中Beclin-1、LC3及K19表达水平对比,治疗组>模型组>对照组,P均<0.01,差异具有统计学意义;除Western blot法检测结果显示治疗组与模型组小鼠创面组织中LC3表达水平对比,P>0.05外,其余各检测结果均显示小鼠皮肤或创面组织中Beclin-1、LC3及K19表达水平两两对比,P<0.01,差异具有统计学意义。Q-PCR技术检测结果显示,3组小鼠皮肤或创面组织中K19 mRNA表达水平对比,治疗组>模型组>对照组,P <0.01,差异具有统计学意义;3组小鼠皮肤或创面组织中K19mRNA表达水平两两对比,P均<0. 01,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO促进烧伤创面愈合可能与增加创面组织中K19的表达有关,而诱导自噬相关蛋白的高表达可能是其具体机制之一。

成批烧伤的应急救治进展

成批烧伤是一种特殊的急性灾害性创伤,往往伤情严重、救治困难,严重影响了人们的生命健康,百年来随着科学技术的不断发展,各项政策法规的逐步出台,成批烧伤救援指挥系统不断完善、救援仪器设备不断充足、救援人员专业素质不断提高,使成批烧伤的应急救援效率和救治效果得到了大幅度提升,但仍存在烧伤专业人才储备薄弱、应急救援人员能力有待提升、个性化应急救援指挥系统尚不完善等不足,相信在党和政府的领导之下,其救援系统、救援装备、救援人员专业素质必将更加完善、出色,能够更加高效地应对每一次突发事件。

烧伤合并腹部外伤的诊治体会

烧伤合并腹部外伤的诊治较单纯性腹部外伤或烧伤复杂，特别是在早期诊治时有其特殊性。我院自1999年1月-2009年1月共收治烧伤合并腹部外伤患者26例，现对其临床资料进行回顾性分析如下。

负压引流与创面修复

探讨负压引流(VSD)促进创面修复的可能机制,寻找促进创面修复的最佳负压引流条件。本文回顾性分析了众多学者的研究成果,总结VSD技术促进创面修复的最佳条件。

重组Akt腺病毒的构建及其在肝硬化大鼠肝脏中的表达

目的探讨持续活化Akt且带有HA标签(myr-HA-Akt)基因的重组腺病毒在肝硬化大鼠肝脏中的表达特性。方法酶切正向插入目的基因的真核表达载体pcDNA3.1-myr-HA-Akt,获得myr-HA-Akt cDNA后,将其定向克隆到穿梭质粒pDC316中,然后将重组质粒与病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染293细胞,获得复制缺陷型重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt,并进行扩增、纯化。通过观察腺病毒感染293细胞后是否出现细胞病变效应;PCR和基因测序方法对所构建病毒进行鉴定,并采用TCID50法检测病毒滴度。自尾静脉注射重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt感染肝硬化模型大鼠。免疫印迹法检测大鼠肝组织内Akt和p-Akt蛋白的表达。结果感染的293细胞出现明显的细胞病变效应,PCR产物电泳证实重组腺病毒的存在,基因测序证实myr-HA-Akt的cDNA正确插入穿梭质粒且与pBHGloxΔE1,3Cre正确同源重组;病毒滴度为5.5×1011vp/mL。从蛋白水平证实感染病毒的肝硬化模型大鼠有外源性Akt基因的表达。结论构建的重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt能有效地感染肝硬化模型大鼠,并可在模型大鼠中正确转录和翻译,为进一步研究腺病毒介导的Akt基因对肝硬化的治疗奠定了实验基础。

激光佐治慢性皮肤溃疡疗效观察及诱导HSP_(70)表达研究

目的:探讨激光治疗慢性皮肤溃疡的疗效及诱导创面组织热休克蛋白70(heat shock prote in 70,HSP70)表达情况。方法:将64例84处慢性皮肤溃疡创面随机分为传统治疗组和激光治疗组,激光治疗组在传统治疗基础上加用激光治疗,所有创面在治疗三周进行疗效判定;同期随机切取5例创面组织,并设正常皮肤为对照,行组织切片HSP70免疫组化染色,计数HSP70阳性细胞数并检测阳性细胞灰度值进行统计学分析;设计引物行RT-PCR检测HSP70mRNA表达情况。结果:两组慢性皮肤溃疡患者经相应治疗均较治疗前明显改善,但激光治疗组创面的治愈率和总有效率明显高于传统治疗组(P<0.05或P<0.01);免疫组化染色显示,正常皮肤和慢性溃疡组织中未见明显HSP70阳性表达细胞,激光治疗后三周后可见较多量的HSP70表达阳性细胞,其阳性细胞计数明显高于其它两组(P<0.01),细胞信号灰度表达明显低于其它两组(P<0.05),而传统治疗组与正常对照组无显著差异;RT-PCR结果发现激光治疗组组织中扩增到一条特异性泳带,大小约268 bp,正常皮肤和传统治疗组组织中未扩增到明显HSP70mRNA基因片段。结论:激光佐治慢性皮肤溃疡具有良好临床疗效,可能与激活创面细胞的热休克内源性保护机制而发挥抗感染和促进愈合作用有关。

小鼠HMGB1启动子荧光素酶报告基因的构建及功能鉴定

利用PCR技术扩增小鼠高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因启动子序列,构建小鼠HMGB1启动子荧光素酶报告基因pGL3-basic-HMGB1.经PCR、酶切及测序鉴定后,用脂质体法将pGL3-basic-HMGB1转入巨噬细胞264.7中,并应用萤光素酶测定系统检测其活性.检测结果显示pGL3-basic-HMGB1具有启动子活性.小鼠HMGB1启动子荧光素酶报告基因pGL3-basic-HMGB1的成功构建,为进一步研究HMGB1提供基本材料.

超声引导下血管缝扎并铜针介入栓塞治疗海绵状血管瘤

目的 更准确、有效地对皮下深部软组织中海绵状血管瘤进行铜针介入栓塞治疗。方法 自 2 0 0 1年 8月～ 2 0 0 3年 3月 ,对 18例深部软组织中弥漫型海绵状血管瘤患者 ,在高频彩色超声引导下行粗大或主干血管缝扎和铜针介入栓塞术治疗 ,术后 1～ 2 0个月随访 ,彩超复查对治疗效果进行判定和检测。结果 该组18例均取得较好疗效 ,总有效率 10 0 %。结论 在非创伤性高频彩超引导下皮下深部软组织弥漫型海绵状血管瘤显示清楚 ,粗大血管缝扎和铜针刺入准确、安全有效 ,具有独到之处。

人内皮抑素基因转染原代成人黑色素瘤细胞

目的:研究人内皮抑素(hum an endostatin,hEndo)基因转染的原代黑色素瘤细胞的体外和体内生物学特性。方法:先构建重组人内皮抑素的真核表达载体pcDNA3.1-hEndo,将人内皮抑素基因导入原代成人黑色素瘤细胞,检测转基因细胞hEndo蛋白的表达、分泌和抑制细胞增殖活性,并验证转基因细胞在体外和裸鼠体内的生长特性。结果:载体pcDNA3.1-hEndo经酶切后获得5.4 kb和624 bp条带,电转后G418筛选获得克隆;RT-PCR检测到转染细胞表达hEndomRNA,W estern b lot检测到转染细胞分泌hEndo蛋白,MTT表明转基因细胞上清可抑制细胞增殖;裸鼠体内生长实验显示转基因黑色素瘤生长速度明显低于对照组(P<0.05),肿瘤组织RT-PCR示hEndo基因稳定表达。结论:转hEndo基因原代黑色素瘤细胞可有效、稳定地表达有生物学活性的hEndo,hEndo能抑制瘤细胞在动物体内的生长速度。

小鼠热休克转录因子1真核表达载体的构建

背景:研究表明,热休克转录因子1具有热休克应答效应。目的:构建小鼠热休克转录因子1(heat shock transcription factor1,HSF1)真核表达载体。方法:克隆小鼠HSF1cDNA,将其插入载体pcDNA3.1,构建热休克转录因子1真核表达载体pcDNA3.1-HSF1。结果与结论:构建的pcDNA3.1-HSF1重组体双酶切电泳后出现大小约5.5kb与1.5kb的2个片段,测序结果显示克隆的小鼠HSF1序列与Genbank中的一致,采用Westernblot法可检测到一条相对分子质量约72000的重组HSF1蛋白条带,说明成功构建小鼠HSF1真核表达载体pcDNA3.1-HSF1。

铜针治疗体表海绵状血管瘤168例报告

采用手法触摸盲视下留置铜针治疗 10 5例体表海绵状血管瘤 ,63例采用在探头频率为 7.0MHz彩色多普勒超声引导下铜针留置术。 5～ 7d为一疗程 ,间隔一月重复治疗 ,通常治疗 2～ 3个疗程。盲视组一年后复发 15例 ,复发率为 14 .3 % ;超声引导一年后复发 2例 ,复发率为 3 .2 %。铜针治疗体表海绵状血管瘤操作简便易行 ,超声引导下铜针留置术治疗海绵状血管瘤较盲视法操作更安全 ,对于组织深部及位于大主干血管。

小鼠肿瘤坏死因子α启动子荧光素酶表达载体的构建及鉴定

目的构建小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)启动子荧光素酶表达载体。方法利用PCR技术扩增小鼠TNF-α启动子序列,将其插入荧光素酶表达载体pGL3-basic中。将经过鉴定的重组载体pGL3-TNFα-promoter转染巨噬细胞264.7,应用萤光素酶检测系统检测其活性。结果测序结果表明,扩增的启动子序列正确。荧光素酶活性检测表明,pGL3-TNFα-promoter具启动荧光素酶基因表达的活性。结论成功构建小鼠TNF-α启动子荧光素酶表达载体pGL3-TNFα-promoter,为进一步研究TNF-α奠定了物质基础。

热休克转录因子1对高迁移率族蛋白B1的转录调控作用及机制

目的:探讨烧伤血清诱导下热休克转录因子1(HSF1)对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的转录调控作用及其机制。方法:构建热休克转录因子1真核表达载体pcDNA3.1-HSF1,HMGB1野生型启动子荧光素酶报告基因pGL3-HMGB1-Y,HMGB1突变型启动子荧光素酶报告基因pGL3-HMGB1-T。pcDNA3.1-HSF1转染巨噬细胞RAW264.7,烧伤血清诱导后,半定量RT-PCR检测HMGB1 mRNA的表达。pcDNA3.1-HSF1,HMGB1启动子荧光素酶报告基因共转染RAW264.7,烧伤血清诱导后,检测并比较pGL3-HMGB1-Y和pGL3-HMGB1-T的相对萤光素酶活性。结果:烧伤血清诱导下,HSF1可以下调RAW264.7 HMGB1mRNA的表达。pGL3-HMGB1-T的相对荧光素酶值较pGL3-HMGB1-Y明显下降,P<0.01,差异有显著统计学意义。结论:烧伤血清诱导下,HSF1可能通过与HMGB1启动子区HSE的结合下调小鼠巨噬细胞RAW264.7 HMGB1 mRNA的表达。

双荧光素酶报告质粒检测小鼠巨噬细胞热休克转录因子1调控核转录因子kappa B活性的研究

目的:观察烧伤血清刺激后小鼠巨噬细胞NF-κB活性的变化,以及HSF1对NF-κB可能的凋控作用。方法:制作15%TBSAⅢ°烧伤小鼠模型,提取烧伤血清通过表达质粒与报告质粒共转染,检测烧伤血清诱导下NF-κB活性的变化以及过表达HSF1后NF-κB活性的变化规律结果:对比正常血清,烧伤血清刺激后相时荧光素酶活性早期即明显增加(p<0.05),这种变化在诱导后2 h即达到高峰,12 h后逐渐下降;过表达HSF1可以显著抑制烧伤血清引起这种活性变化(P<0.05)。结论:烧伤后NF-κB早期即活化,热休克反应可能通过HSF1途径抑制NF-κB的活性。