有吸烟史的口腔白斑病患者microRNA异常表达及癌变相关生物信息学分析

目的研究有吸烟史的口腔白斑病(oral leukoplakia,OLK)患者病损组织microRNA(miRNA)的异常表达,并对差异miRNAs进行癌变相关生物信息学分析。方法利用人miRNA OneArray?v5.1微阵列芯片检测吸烟组(n=6)和非吸烟组(n=4)OLK石蜡标本间差异表达的miRNA,并运用生物信息学方法从中筛选出与OLK癌变密切相关的目标miRNA,随后对目标miRNA的靶基因进行基因本体数据库(gene ontology,GO)富集分析和KEGG通路分析以预测其可能的作用机制。结果吸烟组与非吸烟组OLK组织中共检出174个差异表达的miRNAs(P<0.05),其中,39个miRNAs在吸烟组表达上调(log2(FC)≥0.585),135个miRNAs表达下调(log2(FC)≤-0.585)。运用生物信息学方法从中筛选出8个与OLK癌变密切相关的目标miRNAs,包括:hsa-miR-6857-5p、hsa-miR-6745、hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-363-5p、hsa-miR-6867-3p、hsa-miR-95-3p、hsa-miR-3607-5p、hsa-miR-9500。对上述目标miRNAs的靶基因行GO富集分析,结果显示大部分基因参与调控细胞增殖、凋亡、刺激反应等生物学活动。KEGG通路分析发现上述基因高度相关的作用通路为癌信号通路、PI3K-Akt及FoxO信号通路。结论吸烟可通过改变OLK组织miRNA表达水平进而改变特定基因功能促进白斑癌变进程。

微血管吻合器在游离股前外侧皮瓣修复口腔癌术后软缺损中的应用

目的探讨微血管吻合器在游离股前外侧皮瓣修复口腔癌术后软缺损中的应用。方法回顾性分析2013年9月至2014年9月52例在中南大学湘雅二医院口腔颌面外科就诊的口腔癌患者的临床资料,全部患者行功能性颈清扫+原发灶切除+游离股前外侧皮瓣修复术,其中27例患者游离股前外侧皮瓣修复术中的静脉采用手工显微外科行端端吻合,25例患者游离股前外侧皮瓣移植后的静脉应用微血管吻合器行端端吻合。结果以微血管吻合器行静脉吻合时间为(6.3±1.9)min,较手工吻合时间(12.3±1.4)min缩短,差异具有统计学意义(P=0.001)。25例患者应用25枚微血管吻合器行静脉端端吻合,血管吻合后术中所有游离股前外侧皮瓣静脉吻合口均未出现漏血、吻合器脱落、张力过大而撕裂、血栓形成导致皮瓣静脉危象等情况,术后亦未出现动、静脉血管危象;27例患者采用手工显微外科吻合40根静脉,术后有2例患者出现静脉血管危象。结论微血管吻合器在游离股前外侧皮瓣修复口腔癌术后软组织缺损中静脉吻合质量高、时间短,术后并发症少。

微管相关蛋白1轻链3和雷帕霉素靶蛋白在吸烟与不吸烟口腔白斑患者中的表达及临床意义

目的研究自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(LC3B)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在吸烟与不吸烟口腔白斑(OLK)患者中的表达情况及相互关系,探讨吸烟与OLK恶变潜能的关系。方法采用免疫组织化学法检测LC3B和mTOR在120例OLK组织中的表达,回顾性分析吸烟者与不吸烟者的临床资料,探讨吸烟与LC3B和mTOR表达及其与各临床因素之间的关系。结果吸烟与不吸烟OLK患者在性别、年龄、病变部位、病理分型及恶变情况均存在差异,LC3B在不吸烟组中的阳性率高于相应的吸烟组,而mTOR在吸烟组中的阳性率则高于相应的不吸烟组,差异均有统计学意义(P<0.05),吸烟情况与mTOR阳性率呈正相关(P<0.05),与LC3B的表达无明显相关性,LC3B与mTOR阳性表达率随吸烟情况的加重呈负相关(P<0.05)。结论吸烟对OLK的影响可能与自噬相关蛋白的表达有关。

HGF/c-met在口腔黏膜下纤维化组织中表达的研究

收集早、中、晚期口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibrosis,OSF)组织各10例及正常的口腔颊黏膜组织5例,采用免疫组化SABC法对各种组织中的HGF及c-met的表达情况进行检测。结果显示在正常的口腔颊黏膜组织中HGF和c-met呈阳性表达,早、中、晚期OSF组织中表达明显降低(P<0.05)。说明HGF/c-met在OSF组织中表达受到抑制,促进了OSF的发病。

口腔白斑和口腔鳞状细胞癌中微管相关蛋白1轻链3和雷帕霉素靶蛋白的表达及临床意义

目的探究自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在正常口腔黏膜、口腔白斑(OLK)及口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达情况及相互关系,评估其作为OLK恶变早期诊断指标的临床价值。方法采用免疫组化法检测LC3B和m TOR在20例正常口腔黏膜组织、120例OLK及30例OSCC组织中的表达,回顾性分析120例OLK患者的临床资料,探讨LC3B和mTOR及其与各临床因素之间的关系。结果正常口腔黏膜、OLK和OSCC组中LC3B阳性率分别为85.0%、65.8%和33.3%(P<0.05),mTOR的阳性率分别为20.0%、48.3%和76.7%(P<0.05)。LC3B与mTOR二者间的表达具有相关性(P<0.05),且其表达都与OLK的临床类型相关(P<0.05)。结论 LC3B和mTOR可作为早期监测口腔OLK恶变的分子生物学指标。

C-met与Cox-2在口腔白斑和口腔鳞状细胞癌组织中的表达研究

目的:探讨肝细胞生长因子受体(C-met)与环氧合酶-2(Cox-2)在口腔白斑(OLK)及口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其相关性。方法:应用免疫组化法检测10例口腔正常黏膜组织(NOM),22例OLK组织和20例OSCC组织中C-met和Cox-2蛋白的表达情况。结果:C-met和Cox-2蛋白在NOM,OLK,OSCC中的表达强度依次增高(P<0.05)。C-met和Cox-2蛋白在OLK组织和OSCC组织中分别相关(P<0.05)。结论:C-met和Cox-2蛋白在口腔黏膜早期癌变进程中表达异常增高,并有明显的协同作用。

ART3在口腔鳞癌组织中的表达及对患者预后的影响

目的研究ART3在口腔鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法选取中南大学湘雅二医院口腔医学中心收治的50例口腔鳞癌患者的口腔鳞癌组织及癌旁组织标本,对其进行石蜡包埋,预切片染色。采用免疫组织化学方法检测ART3蛋白的表达,分析其在口腔鳞癌组织中的表达与各临床病理学参数的关系。结果相比于正常的口腔黏膜及异常增生的口腔黏膜,ART3在口腔鳞癌(OSCC)肿瘤细胞中表达呈强阳性。Kaplan-Meier生存曲线显示,ART3表达阳性的患者生存率较低(P<0.01)。多变量Cox回归分析显示,ART3表达阳性是口腔鳞癌预后的独立危险因素(P=0.003)。ART3表达与淋巴结转移直接关联(P<0.001),而与OSCC肿瘤分级无直接关联。结论检测ART3蛋白的表达对口腔鳞癌诊断具有重要意义,并可有效地预测其转移与预后。

抑制细胞自噬显著增加二甲双胍诱导的口腔癌细胞凋亡

目的研究二甲双胍对人口腔癌细胞增殖及凋亡的影响,为口腔癌的治疗开辟新的路径。方法采用不同浓度(5、10、20 mmol/L)二甲双胍处理CAL27细胞24、48、72 h;流式细胞术和TUNEL检测细胞凋亡数;免疫荧光观察自噬小体;Western blot法检测凋亡和自噬标志物的表达。结果不同浓度二甲双胍处理CAL27细胞可显著诱导其凋亡;CL-PARP、Bcl-2等凋亡标志物也显著增高。二甲双胍可以刺激CAL27细胞产生自噬,细胞荧光检测到增多的GFP-LC3小点;LC3、Beclin1等自噬标志蛋白也显著变化。二甲双胍诱导CAL27细胞STAT3表达下调的同时可以抑制mTOR信号通路是其产生自噬的可能原因。抑制自噬能够显著加强二甲双胍诱导的肿瘤细胞凋亡。结论二甲双胍能诱导口腔癌细胞凋亡,可使口腔癌细胞自噬水平上升,其机制与STAT3及mTOR信号通路有关,抑制自噬能够显著加强二甲双胍诱导的肿瘤细胞凋亡。

软衬材料在上颌骨缺损早期修复中的应用

目的:观察软衬材料应用于上颌骨缺损早期修复的临床效果。方法:应用软衬材料对6例上颌骨缺损患者进行早期修复,并与同期在上颌骨切除术后3个月以上,进行常规硬性基托修复的患者进行比较,比较两组患者的主观感觉、面型。结果:应用软衬材料进行早期修复的患者主观感觉好,口角无明显歪斜,面型较理想。结论:软衬材料应用于上颌骨缺损早期修复,能在术后早期恢复患者的生理功能,减轻面部畸形,改善其生存质量。

牙周炎大鼠正畸性牙根吸收中RANKL、TNF-α在牙周膜压力侧的表达

目的:探讨核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在牙周炎大鼠正畸性牙根吸收中牙周膜压力侧的表达。方法:40只SD雄性大鼠随机分为牙周炎组和对照组,每组20只。近移上颌第一磨牙,在加力后0、3、7、14 d各处死5只,苏木精-伊红(HE)染色观察牙根吸收、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色测破牙骨质细胞数目、免疫组织化学法检测压力侧牙周膜中RANKL、TNF-α的表达。结果:牙根吸收随加力时间延长而增加,且加力7、14 d时牙周炎组高于对照组(P<0.05);加力3、7、14 d时牙周炎组RANKL、TNF-α表达高于对照组(P<0.05)。结论:牙周炎可加重牙根吸收,可能与牙周炎症状态下牙周膜中RANKL、TNF-α表达上调有关。

不同桩核修复方法对前磨牙根管微渗漏的研究

目的比较同种纤维桩核采用不同修复方法修复下颌第一前磨牙之间微渗漏的差异。方法收集30颗正畸拔除的下颌第一前磨牙,完善根充后,随机分成A、B、C 3组,每组10个试件,包埋于石膏标准模型内。A组采用直接法完成桩核修复,B组采用半间接法修复,C组采用间接法修复。水侵袭6个月后,所有试件经过2%亚甲基蓝染色,近远中向剖开,体式显微镜下对比观察3组试件微渗漏的程度。结果体视显微镜下记录3组渗漏深度,A组微渗漏程度明显大于C组(P<0.05),B组与A、C组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论间接法制成的个性化纤维桩核修复前磨牙的微渗漏程度显著优于直接法,具有良好的边缘封闭作用,更适合临床应用。

反义长链非编码RNA在肿瘤发生和发展中的研究进展

反义长链非编码RNA(long non coding RNA,lncRNA)是一类全新的RNA分子,在包括肿瘤的发生和发展在内的众多生命活动中发挥着重要作用。多种反义lncRNA在肿瘤患者组织中特异性表达,并且和患者的临床资料密切相关,是一种潜在的肿瘤分子标志物。Lnc RNA可以通过miRNA海绵和RBP结合等方式参与基因的调控,在肿瘤的细胞周期、凋亡、血管生成、侵袭与转移等过程中发挥重要功能。进一步研究反义lncRNA在肿瘤中的作用机制,对深入了解恶性肿瘤的病因发病学和RNA语言具有重要理论意义;同时,反义lncRNA作为分子标志或者潜在的靶点,在恶性肿瘤的早期诊断、疗效判断、预后预测,乃至基因治疗等方面也将具有广阔的临床应用前景。

不同矢状骨面型后牙微种植体植入安全区研究

目的:CBCT探究不同矢状骨面型后牙区植入微种植体的安全区域特征。方法:纳入骨性Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类患者各20名的CBCT数据,运用In Vivo 5.0软件重建,选择上下颌第一前磨牙远中至第二磨牙近中区域,分别测量距牙槽嵴顶2、4、6、8、10mm处的近远中向宽度,采用SPSS 19.0对测量结果进行统计学分析。结果:上颌距牙槽嵴高度4~8 mm,下颌距牙槽嵴高度超过4 mm根尖间隔区域是安全适宜的微种植体植入部位。上颌第一前磨牙和第二前磨牙根间骨量在骨性Ⅰ、Ⅱ类组>骨性Ⅲ类组(P<0.05),其它测量部位各组间无统计学差异。下颌后牙区各根间骨量多数表现为骨性Ⅲ类组>骨性Ⅰ、Ⅱ类组(P<0.05)。结论:上颌距牙槽嵴高度4~8 mm的第二前磨牙和第一磨牙间,下颌距牙槽嵴高度超过4 mm的第一和第二磨牙间的根尖间隔区域是相对安全的植入部位,不同骨面型存在一定差异。

种植体支抗稳定性的三维有限元分析

微种植体支抗技术是一种有效增强支抗的方法,其稳定性是获得可靠支抗的必要条件。三维有限元分析法是进行生物力学分析最有效的方法之一,可模拟复杂的口颌系统,被广泛应用于正畸领域。本文就三维有限元法分析微种植体支抗初期稳定性的微种植体因素、骨因素和操作因素等研究进展进行概述,以提高微种植体支抗的成功率。

单侧完全性唇腭裂患者前牙区牙槽骨开窗、骨开裂的锥形束CT研究

目的:利用锥形束CT(cone-beam CT,CBCT)研究单侧完全性唇腭裂(unilateral cleft lip and palate,UCLP)患者前牙区牙槽骨开窗、骨开裂的发生率。方法:选取2014年6月-2017年9月就诊于中南大学湘雅二医院的UCLP患者42例(男25例,女17例)。匹配性别和年龄,纳入42例骨性Ⅲ类非唇腭裂患者为对照组。利用CBCT评估UCLP组与对照组前牙区骨开窗和骨开裂的发生率,采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:裂隙侧、非裂隙侧及对照组前牙骨开裂发生率分别为50.88%、42.39%和28.77%。UCLP组裂隙侧上颌前牙同名牙骨开裂的发生率均显著高于对照组(P<0.05),非裂隙侧上颌侧切牙骨开裂的发生率显著高于对照组(P<0.05),裂隙侧上颌中切牙骨开裂发生率显著高于非裂隙侧(P<0.05)。裂隙侧、非裂隙侧与对照组前牙区骨开裂均好发于唇侧。骨开窗的发生率在裂隙侧、非裂隙侧及对照组间无显著差异(P>0.05)。结论:在UCLP患者中,牙槽骨开窗和骨开裂较常见,临床治疗中应引起重视。

MAPK信号通路在力学刺激对MG-63成骨样细胞护骨素表达中的作用

目的观察力学刺激对MG-63成骨样细胞护骨素(osteoprotegrin,OPG)表达及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响,以及探讨MAPK信号通路在OPG表达中的作用。方法将不同作用时间的机械应变分别作用于MG-63成骨样细胞,采用免疫印迹(Western blot)法检测OPG蛋白、磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2 (p-ERK1/2)、p38MAPK (p-p38MAPK)、JNK (p-JNK)表达,采用RT-PCR方法检测OPG mRNA的表达,同时应用信号通路阻断剂观察MAPK各信号通路在OPG表达中的作用。结果机械力学刺激明显促进了MG-63成骨样细胞OPG蛋白及mRNA的表达,加力1、3、6、12 h后OPG蛋白表达分别是对照组的2. 3、4. 2、5. 9、6. 6倍(P<0. 05),加力3、6、12 h后OPG mRNA表达分别是对照组的4. 8、6. 8、7. 5倍(P<0. 05),加力12 h组作用最明显。力学刺激能够激活ERK1/2信号通路,加力60 min后激活最显著,p-ERK1/2表达是对照组的3. 2倍(P <0. 05)。力学刺激也能激活JNK信号通路,加力10 min后开始活化,加力30 min后最显著,加力10、15、30 min后p-JNK表达分别是对照组的2. 9、4. 3、5. 1倍(P<0. 05)。但力学刺激不能激活p38MAPK信号通路。分别应用ERK1/2、JNK的信号通路阻断剂后,发现当抑制ERK1/2信号通路时,OPG蛋白表达也受到了抑制,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论机械力学刺激上调了MG-63成骨样细胞OPG蛋白及mRNA的表达,ERK1/2信号通路可能参与了此过程。

隐形矫治技术推磨牙远移机制与疗效的研究进展

隐形矫治技术作为新型的正畸矫治技术,其美观、舒适、方便等特点受到患者与医生的青睐,经过十几年的技术改进、材料更新,隐形矫治的效果逐渐优化。通过其特殊的矫治力施加方式,配合附件、辅助装置对转矩和支抗的精细控制,在推磨牙远移时,磨牙接近整体移动,同时能避免下颌旋转,减小前牙支抗丢失。本文对隐形矫治技术推磨牙远中的机制与疗效作一综述,提出现阶段研究的不足和临床应用中的限制,为临床应用和技术改进提供参考依据。

不同托槽处理方法及牙釉质酸蚀时间对再粘接强度影响的比较

目的:比较磨除和喷砂去除托槽底板残余树脂后在不同釉质酸蚀时间下托槽的再粘接强度(RBS)。方法:54颗离体牙釉质表面去除残留粘接材料,随机分成3组采取不同时长的酸蚀处理,分别为30、60 s和不酸蚀,每组随机选取一半粘接喷砂处理的托槽,分别记为SD3组、SD6组和SD组,另一半粘接磨除处理的托槽,分别记为DD3组、DD6组和DD组(n=9)。测得RBS和粘接剂残余指数(ARI)。电镜扫描托槽脱位后的釉质表面。结果:(1)SD6组RBS值高于DD组及SD组,ARI有统计学差异(P<0.05);(2)SD3组RBS值高于其他组,SD3组与SD6组,DD3组与DD6组均无统计学差异(P>0.05)。结论:托槽底板使用50μm氧化铝喷砂处理,釉质去除粘接材料后用35%磷酸酸蚀30 s,再粘接效果较好。

数字化设计与3D打印在自体牙移植术的应用

目的探讨术前数字化设计结合3D打印供体牙模型及受区牙槽窝模型辅助自体牙移植术的效果。方法收集12例因牙折或牙槽骨广泛吸收而无法保留的第一或第二磨牙,将其锥形束CT数据导入Mim⁃ics数字化设计软件中,选取匹配度最高的第三磨牙作为供体牙,3D打印出供体牙及受区牙槽窝模型进行术前模拟移植术。术中在供体牙模型引导下进行受区牙槽窝及供体牙的预备,将供体牙移植于受区。术后3、6、12个月复查锥形束CT评估骨重建及牙周膜状况。结果12例患者均选择根尖孔已完全闭合的第三磨牙作为供体牙即刻移植于磨牙区。7例受区牙槽窝术前存在感染,其中1例因受区患牙感染致牙槽骨广泛吸收。12例手术短期恢复良好,均完成12个月以上随访,其中11例移植牙成功,能正常行使咀嚼功能,1例在术后14个月时出现牙根吸收。结论数字化设计结合3D打印技术能够辅助匹配最合适的供体牙,术前完成受区牙槽窝精准预备,减少供体牙在体外的暴露时间和移植到牙槽窝内的试放次数,有助于自体牙移植成功。