P-EGFR、P-ERK和NF-κB在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义

目的研究磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)、磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)和细胞核转录因子κB(NF-κB)在中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况,探讨EGFR/ERK/NF-κB信号通路在中耳胆脂瘤发病机制中的作用。方法应用免疫组织化学SP法及Western blot(WB)免疫印迹法检测30例中耳胆脂瘤标本及15例正常外耳道皮肤组织中P-EGFR、P-ERK和NF-κB蛋白的表达。结果(1)P-EGFR蛋白阳性表达主要定位于细胞质和(或)细胞膜,在胆脂瘤组的阳性表达率为63%,明显高于正常外耳道皮肤组的20%(P<0.05);P-ERK蛋白阳性表达主要定位于细胞质和(或)细胞核,在胆脂瘤组的阳性表达率为70%,明显高于正常外耳道皮肤组的20%(P<0.05);NF-κB蛋白阳性表达主要定位于细胞核,在胆脂瘤组的阳性表达率为60%,明显高于正常耳道皮肤组的13.3%(P<0.05)。在30例中耳胆脂瘤组织中,P-EGFR、P-ERK和NF-κB两两之间呈正相关关系(P<0.05)。(2)Western blot免疫印迹法检测结果显示:中耳胆脂瘤组中P-EGFR、P-ERK和NF-κB的表达量明显高于正常外耳道皮肤组的表达量。结论 P-EGFR、P-ERK和NF-κB在中耳胆脂瘤上皮中表达增强,EGFR/ERK/NF-κB信号通路可能在中耳胆脂瘤组织的形成和发展过程中起重要作用。

骨髓间充质干细胞治疗感音神经性耳聋相关实验技术体系建设概要

感音神经性耳聋是由于内耳感觉细胞的损伤造成的,其治疗一直是耳科医生十分棘手的问题。近年来,利用干细胞修复内耳感觉细胞在国内外大量的研究中取得了诸多重要进展,特别是骨髓间充质干细胞,有易分离、低免疫源性、无致瘤性等优点,极具临床应用价值。但目前国内外各个研究小组从干细胞的制备,诱导到移植内耳的方法均有差异,未形成统一的流程,不利于其学术交流和实验结果大样本收集。本文集中介绍谢鼎华课题组在国家973项目干细胞治疗耳聋的实验技术体系标准制定课题的基础研究方法,并综述目前本领域国际最新动态,初步提出骨髓间充质干细胞治疗感音神经性耳聋的技术方法和质量控制措施的推荐方案,为最终临床安全、规范化运用干细胞治疗耳聋提供依据。

非编码RNA在中耳胆脂瘤发病机制中的研究进展

中耳胆脂瘤是耳鼻咽喉科常见病,是致聋的主要疾病之一,具有过度增殖性、迁移侵袭性、复发性等临床特征。目前,还没有有效的药物治疗方法,手术切除仍然是唯一可行的治疗策略。非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是一种本身不翻译为蛋白质但可在转录及转录后水平调控基因表达的内源性RNA,参与了发育、器官形成、细胞增殖与凋亡等多种生理过程。近年来,越来越多的研究显示,ncRNA与中耳胆脂瘤的发生发展密切相关,涉及多种生物学过程。我们针对ncRNA在中耳胆脂瘤角质形成细胞的增殖、迁移和凋亡、局部炎症反应及骨质破坏等过程中的作用及相关机制进行综述,为中耳胆脂瘤非手术治疗提供新的思路和靶点。

逆行荧光标记观察猫上橄榄复合体向内耳的投射

目的探讨猫橄榄耳蜗神经元的分布和向内耳的投射特征。方法11只成年猫随机分为两组，实验组8只，左侧耳蜗鼓阶内注射1％霍乱毒素B亚单位，右侧耳蜗鼓阶注射5％荧光金，对照组3只，双侧耳蜗均注射生理盐水。动物饲养7d后处死，脑干连续冰冻切片，免疫荧光处理，荧光显微镜观察被标记的橄榄耳蜗神经元。结果实验组每只动物被霍乱毒素B亚单位和荧光金标记的橄榄耳蜗神经元平均总数为（3210±168）个，分为外侧橄榄耳蜗神经元[（2298±120）个]和内侧橄榄耳蜗神经元[（913±64）个]。根据投射特征可将被标记的神经元分为三种不同类型：只投射到同侧耳蜗的神经元，只投射到对侧耳蜗的神经元，既向同侧又向对侧耳蜗投射的双标记神经元，其中双标记神经元在外侧橄榄耳蜗神经元和内侧橄榄耳蜗神经元中分别占3．9％和15．1％。对照组未观察到被标记的橄榄耳蜗神经元。结论猫的橄榄耳蜗系统中存在三种不同投射特征的神经元，其中双侧投射的神经元在外侧橄榄耳蜗神经元和内侧橄榄耳蜗神经元中均有分布。