表没食子儿茶素没食子酸酯对阿米卡星诱导大鼠螺旋神经元Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对阿米卡星(amikacin,Amk)诱导的大鼠耳蜗螺旋神经元(spiral ganglion neuron,SGN)Bcl-2和Bax表达的影响。方法设生理盐水对照组、Amk[450mg/(kg·d)×14d]损伤组和Amk加EGCG[50mg/(kg·d)×14d]保护组。各组动物均深度麻醉后半身灌注固定处死,取右侧耳蜗标本固定、脱钙、石蜡轴位包埋、轴位切片,近中轴位切片行Bcl-2和Bax免疫组化染色,光学显微镜下检测耳蜗SGN表达情况、并通过切片图像分析进行半定量处理比较。结果对照组SGN Bcl-2染色胞浆有棕黄色或黄色颗粒或斑片呈中度着色、Bax染色胞浆有棕黄色或黄色颗粒或斑片呈轻度着色[SGN Bcl-2和Bax染色平均灰度值分别为(81.24±3.10)和(90.92±3.62)],损伤组SGN Bcl-2染色胞浆着色减轻、Bax染色胞浆着色加深[SGN Bcl-2和Bax染色平均灰度值分别为(99.58±3.97)和(71.12±2.98)],保护组SGN Bcl-2染色胞浆着色加深、Bax染色胞浆着色减轻[SGN Bcl-2和Bax染色平均灰度值分别为(82.86±8.10)和(89.15±2.85)],图像分析结果显示损伤组与对照组、损伤组与保护组之间的SGN Bcl-2和Bax染色平均灰度值差异有显著性。结论Amk耳中毒诱导耳蜗螺旋神经元氧化损伤时Bcl-2表达下调,Bax表达增强,EGCG可以减弱Amk耳中毒时耳蜗螺旋神经元Bax的表达,同时增强Bcl-2的表达,从而减轻Amk耳毒性。

EGCG对阿米卡星诱导大鼠螺旋神经元凋亡的保护作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)。对阿米卡星诱导的大鼠耳蜗螺旋神经元凋亡是否具有保护作用。方法设生理盐水对照组、阿米卡星(450 mg.kg-1.d-1共14 d)损伤组和阿米卡星加EGCG(50 mg/kg.kg-1.d-1共14 d)保护组。各组动物均深度麻醉后半身灌注固定处死,取右侧耳蜗标本固定、脱钙、石蜡轴位包埋、轴位切片,近中轴位切片行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记(TUNEL)免疫组化染色,光学显微镜下检测耳蜗螺旋神经节细胞表达情况、并通过切片图像分析进行半定量处理比较。结果正常组螺旋神经元胞浆及细胞核基本上均不着色,损伤组部分螺旋神经元胞核着色,保护组亦少部分螺旋神经元胞核着色,图像分析结果显示损伤组与对照组、损伤组与保护组之间的染色阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。结论EGCG可以减轻阿米卡星诱导大鼠耳蜗螺旋神经元凋亡。

EGCG对阿米卡星所致大鼠听功能损害的保护作用

目的:本实验研究表没食子儿茶素没食子酸酯对阿米卡星诱导的大鼠听觉功能损害的保护作用。方法:设生理盐水对照组、Amk(450mg/kg.d×14d)损伤组和Amk加EGCG(10mg/kg.d,50mg/kg.d,100mg/kg.d×14d)保护组。五组动物各6只分别于试验前和试验的第7天、14天、21天以及35天行听觉脑干反应阈值检测。结果:第7天、14天、21天以及35天Amk损伤组跟对照组比较10kHz及20kHz阈移显著,10mg/kg EGCG保护组与损伤组比较10kHz及20kHz阈移不显著,损伤组与50mg/kg和100mg/kg EGCG保护组比较10kHz及20kHz阈移显著。结论:EGCG可以减轻阿米卡星诱导的ABR阈移,有效地抑制Amk所诱导的耳毒性。

EGCG对阿米卡星诱导大鼠螺旋神经元诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对阿米卡星(amikacin,Amk)诱导的大鼠耳蜗螺旋神经元(spiral ganglion neuron;SGN)诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法将30只SD大鼠分为生理盐水对照组、Amk(450mg/kg.d×14d)损伤组和Amk加EGCG(50mg/kg.d×14d)保护组。各组动物均经深度麻醉后,半身灌注固定处死,取右侧耳蜗标本固定、脱钙、石蜡轴位包埋、轴位切片,近中轴位切片行iNOS免疫组化染色,光学显微镜下检测耳蜗SGN表达情况,并通过切片图像分析进行半定量处理比较。结果对照组SGN胞浆及细胞核基本上不着色(SGNiNOS染色平均灰度值为111.04±3.15),损伤组SGN部分神经元胞浆内有棕黄色或黄色颗粒或斑片(SGNiNOS染色平均灰度值为90.32±5.26),保护组胞浆及细胞核无明显着色(SGNiNOS染色平均灰度值为109.35±4.89),图像分析结果显示,损伤组与对照组、损伤组与保护组之间的SGNiNOS染色平均灰度值差异有统计学意义。结论iNOS参与Amk耳中毒时耳蜗螺旋神经元的氧化损伤,EGCG可以减弱Amk耳中毒时耳蜗螺旋神经元iNOS的表达,从而减轻Amk耳毒性。