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抗日本血吸虫pVAX1/SjHGPRT·SDISP多价疫苗对昆明小鼠的保护作用及其机制探讨
被引量:
1
1
作者
罗四维
汪世平
《现代生物医学进展》
CAS
2011年第18期3413-3416,共4页
目的:探讨抗日本血吸虫生殖产卵编码基因多价疫苗pVAX1/SjHGPRToSDISP对昆明小鼠的保护作用及其机制。方法:选取昆明小鼠30只,分别使用pVAX1/SjHGPRToSDISP、pVAX1以及生理盐水,每只小鼠100μg或等量经左腿股四头肌注射。处理2周后,采...
目的:探讨抗日本血吸虫生殖产卵编码基因多价疫苗pVAX1/SjHGPRToSDISP对昆明小鼠的保护作用及其机制。方法:选取昆明小鼠30只,分别使用pVAX1/SjHGPRToSDISP、pVAX1以及生理盐水,每只小鼠100μg或等量经左腿股四头肌注射。处理2周后,采集动物模型血样检测IgG、IL-2,IL-4,IL-10以及INF-γ表达量。处理4周后,以20±1条尾蚴贴腹感染,感染6周后检测减虫率、减卵率。结果:尾蚴攻击动物后6周,pVAX1/SjHGPRToSDISP免疫组的肝脏减虫率为42.2%,子宫与肝脏减卵率分别为68.04%以及72.96%。与对照组比较,差异有显著性。pVAX1/SjHGPRToSDISP免疫组虫体内IgG、IL-4以及INF-γ表达量明显升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:pVAX1/SjHGPRToSDISP多价疫苗具有较好的免疫保护作用,且该类作用的机制与IgG、IL-4以及INF-γ的表达升高存在关联。
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关键词
血吸虫
多价疫苗
pVAX1/SjHGPRToSDISP
机制
原文传递
抗日本血吸虫pVAX1/SjHGPRT·SDISP多价疫苗的构建方法探讨
2
作者
罗四维
汪世平
《现代生物医学进展》
CAS
2011年第19期3629-3631,共3页
目的:探讨抗日本血吸虫生殖产卵编码基因多价疫苗pVAX1/SjHGPRT.SDISP的构建方法并从基因与蛋白水平验证该构建方法是否成功。方法:分别以pcDNA3.0/SjHGPRT、pcDNA3.0/SjSDISP为模板,设计引物扩增SjHGPRT、SjSDISP,采用overlap方法扩增...
目的:探讨抗日本血吸虫生殖产卵编码基因多价疫苗pVAX1/SjHGPRT.SDISP的构建方法并从基因与蛋白水平验证该构建方法是否成功。方法:分别以pcDNA3.0/SjHGPRT、pcDNA3.0/SjSDISP为模板,设计引物扩增SjHGPRT、SjSDISP,采用overlap方法扩增全长SjHGPRT.SDISP。将纯化后的产物SjHGPRT.SDISP以及pVax1质粒采用Kpn I和Xba I双酶切,1%低熔点胶回收目的 DNA片段以及酶切后Pvax1载体片段双胶连。连接产物转化至DH5α细胞。挑选阳性克隆采用双酶切以及测序方法从基因水平鉴定是否构建成功。将构建产物免疫观察动物,采用免疫组化方法从蛋白水平鉴定疫苗pVAX1/SjHGPRT.SDISP是否构建成功。结果:酶切方法以及测序结果均显示重组质粒的插入序列分别与目的基因完全一致,昆明小鼠肌肉组织酶免疫组织化学染色显示免疫组小鼠肌细胞中呈现较强的棕黄色颗粒,而阴性对照组肌细胞呈阴性。结论:真核重组质粒pVAX1/SjHG-PRT.SDISP构建成功,且在昆明鼠肌肉细胞内能够获得良好的表达。
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关键词
血吸虫
pVAX1/SjHGPRT·SDISP
多价疫苗
构建
原文传递
题名
抗日本血吸虫pVAX1/SjHGPRT·SDISP多价疫苗对昆明小鼠的保护作用及其机制探讨
被引量:
1
1
作者
罗四维
汪世平
机构
永州职业技术
学
院基础
医学
系
中南大学湘雅医学系寄生虫学系
出处
《现代生物医学进展》
CAS
2011年第18期3413-3416,共4页
基金
国家重点基础研究发展(973)计划(No.2007CB513108)
国家科技支撑计划(No.2009BAI78B05)
+1 种基金
湖南省血吸虫病免疫与传播控制重点实验室
湖南省重点学科建设专项经费(No.07-985-2)
文摘
目的:探讨抗日本血吸虫生殖产卵编码基因多价疫苗pVAX1/SjHGPRToSDISP对昆明小鼠的保护作用及其机制。方法:选取昆明小鼠30只,分别使用pVAX1/SjHGPRToSDISP、pVAX1以及生理盐水,每只小鼠100μg或等量经左腿股四头肌注射。处理2周后,采集动物模型血样检测IgG、IL-2,IL-4,IL-10以及INF-γ表达量。处理4周后,以20±1条尾蚴贴腹感染,感染6周后检测减虫率、减卵率。结果:尾蚴攻击动物后6周,pVAX1/SjHGPRToSDISP免疫组的肝脏减虫率为42.2%,子宫与肝脏减卵率分别为68.04%以及72.96%。与对照组比较,差异有显著性。pVAX1/SjHGPRToSDISP免疫组虫体内IgG、IL-4以及INF-γ表达量明显升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:pVAX1/SjHGPRToSDISP多价疫苗具有较好的免疫保护作用,且该类作用的机制与IgG、IL-4以及INF-γ的表达升高存在关联。
关键词
血吸虫
多价疫苗
pVAX1/SjHGPRToSDISP
机制
Keywords
Schistosoma japonicum
Multivalent DNA vaccine
pVAX1/SjHGPRToSDIS
Mechanism
分类号
Q95-3 [生物学—动物学]
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
抗日本血吸虫pVAX1/SjHGPRT·SDISP多价疫苗的构建方法探讨
2
作者
罗四维
汪世平
机构
永州职业技术
学
院基础
医学
系
中南大学湘雅医学系寄生虫学系
出处
《现代生物医学进展》
CAS
2011年第19期3629-3631,共3页
基金
国家重点基础研究发展(973)计划(No.2007CB513108)
国家科技支撑计划(No.2009BAI78B05)
+1 种基金
湖南省血吸虫病免疫与传播控制重点实验室
湖南省重点学科建设专项经费(No.07-985-2)
文摘
目的:探讨抗日本血吸虫生殖产卵编码基因多价疫苗pVAX1/SjHGPRT.SDISP的构建方法并从基因与蛋白水平验证该构建方法是否成功。方法:分别以pcDNA3.0/SjHGPRT、pcDNA3.0/SjSDISP为模板,设计引物扩增SjHGPRT、SjSDISP,采用overlap方法扩增全长SjHGPRT.SDISP。将纯化后的产物SjHGPRT.SDISP以及pVax1质粒采用Kpn I和Xba I双酶切,1%低熔点胶回收目的 DNA片段以及酶切后Pvax1载体片段双胶连。连接产物转化至DH5α细胞。挑选阳性克隆采用双酶切以及测序方法从基因水平鉴定是否构建成功。将构建产物免疫观察动物,采用免疫组化方法从蛋白水平鉴定疫苗pVAX1/SjHGPRT.SDISP是否构建成功。结果:酶切方法以及测序结果均显示重组质粒的插入序列分别与目的基因完全一致,昆明小鼠肌肉组织酶免疫组织化学染色显示免疫组小鼠肌细胞中呈现较强的棕黄色颗粒,而阴性对照组肌细胞呈阴性。结论:真核重组质粒pVAX1/SjHG-PRT.SDISP构建成功,且在昆明鼠肌肉细胞内能够获得良好的表达。
关键词
血吸虫
pVAX1/SjHGPRT·SDISP
多价疫苗
构建
Keywords
Schistosoma japonicum
PVAX 1/SjHGPRT-SDISP
Multivalent vaccine
Construction
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗日本血吸虫pVAX1/SjHGPRT·SDISP多价疫苗对昆明小鼠的保护作用及其机制探讨
罗四维
汪世平
《现代生物医学进展》
CAS
2011
1
原文传递
2
抗日本血吸虫pVAX1/SjHGPRT·SDISP多价疫苗的构建方法探讨
罗四维
汪世平
《现代生物医学进展》
CAS
2011
0
原文传递
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