外源性NGF对大鼠坐骨神经切断缝合术后脊髓和背根节CGRP表达的影响

观察外源性神经生长因子(NGF)对坐骨神经切断立即缝合后大鼠脊髓和背根节(DRG)内不同时间点降钙素基因相关肽(CGRP)表达的影响。成年SD雄性大鼠随机分为NGF组、生理盐水(NS)组、假手术组与正常对照组。实验组动物右侧坐骨神经切断后立即缝合,每天给予NGF(400单位/kg腹腔注射),动物分别存活1、3、5、7、14、21、28d,免疫组织化学方法结合图像分析检测相应节段脊髓和背根节内CGRP的表达。结果表明,NGF处理组术侧背根节与脊髓后角内的CGRP表达明显高于同时间点的NS对照组,平均光密度值相比P<0.05。但各组中脊髓前角运动神经元内的CGRP表达没有明显变化(P>0.05)。结果提示外源性的NGF能明显增加损伤后背根节感觉神经元与损伤侧脊髓后角的CGRP表达,对CGRP在脊髓前角运动神经元内的表达没有明显影响。

周围神经端侧吻合再生纤维来源的实验研究

目的:探索周围神经端-侧吻合后再生纤维(侧芽)的来源。方法:将Wistar大鼠左侧腓总神经切断后端-侧吻合到外膜开窗的胫神经干上,术后8周对胫神经和腓总神经分别用快兰和核黄作神经干注射标记,取脊髓背根神经节(DRG)荧光显微镜下观察被标记细胞;取吻合口附近的胫、腓神经段经锇酸染色后在光镜下观察腓总神经内轴突与胫神经轴突的关系。结果:实验组背根节内未发现双标细胞。光镜下,可清晰地见到左侧腓总神经内的再生纤维来自于胫神经近侧端。结论:周围神经端-侧吻合腓总神经内的再生纤维来自于胫神经的侧芽缺乏依据,因而无法排除来自腓总神经近端生长锥和受损胫神经纤维生长锥的可能。

十二指肠返(升)动脉的解剖学

目的:调查国人十二指肠返(升)动脉的起源、分支、分布规律,为胃、胰、十二指肠手术提供解剖学资料。方法:动脉乳胶灌注的尸体标本在直视和手术显微镜下行解剖学观察和测量。结果:十二指肠返(升)动脉恒定出现。主要呈二支型(58％)。多数起源于胃十二指肠动脉末端或胃网膜右动脉、胰十二指肠上前动脉近端。根据其分支、分布情况,有3类:幽门十二指肠支(87％)、十二指肠胰支(79％)及单独起源的幽门下动脉(50％)。结论:十二指肠返(升)动脉是幽门及十二指肠上部血供重要来源,建议在PPPD术中尽量保护胃十二指肠动脉主干、胃网膜右动脉及胰十二指肠上前动脉起始部,以保障被保留的幽门及十二指肠残端的血供。

肝细胞生长因子在正常大鼠腰段脊髓和背根神经节的表达

目的:观察肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在大鼠脊髓和背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)的表达。方法:取健康成年6只SD大鼠运用免疫组织化学染色技术检测HGF在腰段脊髓、背根神经节内的表达和分布。结果:在L4-6段脊髓,HGF免疫阳性产物可见于各板层神经元,尤以脊髓前角运动神经元明显;在DRG中,HGF免疫阳性物质可见于以大、中型为主的神经元的胞浆及突起中。结论:脊髓和背根神经节内的HGF通过与受体c-Met结合可能在神经再生及突触可塑性方面起一定作用。

糖尿病兔脑皮质神经元的微管相关蛋白-2表达

目的:探讨糖尿病对脑皮质神经元及其突起形态学的影响。方法:采用高糖高脂饮食喂养新西兰兔,建立Ⅱ型糖尿病兔模型。28周末断头取脑,冠状切片作尼氏染色及微管相关蛋白-2(MAP-2)免疫组织化学染色,检测糖尿病兔脑皮质神经元MAP-2的表达。结果:糖尿病兔大脑皮质大锥体细胞明显减少,神经元突起扭曲、断裂,胞浆内MAP-2阳性表达明显加强,细胞灰度与对照组比较显著降低。结论:高血糖影响神经元骨骼蛋白MAP-2的变化,其神经毒性和血管性并发症可能有协同作用,是否为糖尿病脑病的发病基础有待进一步研究。

猫胚神经加自体雪旺氏细胞桥接大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的:研究修复周围神经缺损新材料。方法:Wistar大鼠80只,切断左大腿坐骨神经,造成15 mm缺损,分别用自体神经(C组)、液氮冷冻猫胚神经(B组)、液氮冷冻猫胚神经加自体雪旺氏细胞粗制品(C组)桥接。术后4,12,24周取桥体、桥体远端坐骨神经分别行光镜观察、图像分析、电生理检测。所得数据经多因数方差分析和q检验。结果:加入自体雪旺氏细胞猫胚神经组(C组)有髓纤维数目、复合动作电位峰值恢复率、传导速度恢复率与自体神经移植组(A组)比较无显著性差异;而单纯猫胚神经组(B组)大多数指标均不及A、C两组(P<0.01)。结论:植入自体雪旺氏细胞的胚胎神经桥接周围神经缺损效果优于单纯胚胎神经,是一种良好的替代自体神经的桥接物。

自体神经-变性骨骼肌并联复合桥接物修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的:研究自体神经-变性骨骼肌并联复合桥修复大鼠坐骨神经缺损的效果及可行性。方法:成年Wistar大鼠54只,雌雄不限,随机分为3组。各组动物均切除一段坐骨神经形成10mm缺损,A组(n=18)行缺损远端神经原位束间分离后,切取10mm一束,与经过热变性处理的自体骨骼肌条“并联”形成复合桥桥接缺损坐骨神经;B组(n=18)行自体神经桥接;C组(n=18)行单纯变性骨骼肌桥接。术后24周,对各组胫前肌湿重恢复率,桥体再生神经纤维数目、直径和髓鞘厚度进行图像测量分析。结果:胫前肌湿重恢复率、桥体单位面积再生有髓神经纤维数量(密度)、纤维直径和髓鞘厚度统计学分析显示:A、B两组与C组相比有统计学差异(P<0.05),A、B两组再生效果优于C组;A、B组的胫前肌恢复率和单位面积再生有髓神经纤维数目比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:损伤神经远端束间分离自体神经与变性骨骼肌“并联”复合桥修复大鼠坐骨神经缺损效果接近自体神经,优于变性骨骼肌桥,有深入研究的必要。

Roundabout1对大鼠周围神经再生轴突导向的影响

目的:探讨Roundabout1(Robo1)对周围神经再生轴突的导向作用。方法:利用坐骨神经压榨和切断后立即缝合模型,将可溶性Robo1-Fc融合蛋白注入到压榨或缝合部位,形成压榨组和缝合组;以人的Fc蛋白注入上述模型形成两对照组。对术后不同时间点行再生纤维半薄切片、图像分析、步态分析。结果:术后21d两实验组再生纤维数均明显少于对照组;至术后42d,与对照组比较差异无统计学意义。术后14、21d,压榨实验组坐骨神经功能指数(SFI)明显不及压榨对照组。术后14、21d,缝合实验组与缝合对照组比较,SFI差异无统计学意义;而在术后35、42d明显少于缝合对照组。结论:Robo1可能促进周围神经再生并参与调控再生轴突生长方向。

血管内皮生长因子在海马伞-穹窿横断后隔区神经干细胞增殖分化中的作用

背景:目前已经证实成熟脑中存在神经干细胞,如何定向诱导其分化为某种特异性神经元从而替代损伤神经元有效治疗神经系统疾病非常关键。目的:探讨血管内皮生长因子对体内神经干细胞增殖和分化的作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-06/2008-06在中南大学湘雅医学院人体解剖学及神经生物学系完成。材料:健康雄性SD大鼠24只,随机分为模型对照组、抗体处理组、假手术组,8只/组。方法:模型对照组、抗体处理组大鼠建立海马伞-穹窿横断模型,假手术组大鼠仅做开颅手术。造模后即刻,抗体处理组吸取抗血管内皮生长因子抗体4μL,于损伤侧前囟+0.6mm,外侧+0.6mm,腹侧-5.5mm插入进针;模型对照组、假手术组注射等量生理盐水。主要观察指标:免疫组织化学法观察隔区血管内皮生长因子、巢蛋白、增殖细胞核抗原的表达,计算增殖细胞核抗原增殖指数。结果:与假手术组比较,模型对照组海马伞-穹窿横断后隔区血管内皮生长因子及巢蛋白的表达强度均明显增高(P<0.01);与模型对照组比较,抗体处理组巢蛋白表达强度明显降低(P<0.01)。假手术组增殖细胞核抗原在神经元胞浆内呈弥漫表达,表现为非特异性染色,增殖指数几乎为0;模型对照组出现少量增殖细胞核抗原阳性的神经元,增殖指数为1%;经抗体处理后增殖指数又降为0。结论:隔区损伤后血管内皮生长因子表达增加的同时确实有神经干细胞的出现。血管内皮生长因子的高表达可能是神经干细胞生成与分化的促进因素,是脑损伤后自我修复的基础。

肝铸型标本肝静脉吻合的观测及临床意义

目的:观察肝静脉之间的吻合情况;方法:观察88个铸型标本中肝静脉侧支吻合的出现率,并对一例有丰富吻合支的肝脏用游标卡尺测量吻合中点处的直径;结果:88个肝铸型标本中有侧支吻合22例,显示率25%;1例丰富吻合标本,其中有17处吻合,最大直径为2.28mm,最小直径为0.62mm,副肝静脉与肝静脉吻合3处;结论:在肝静脉结扎或病理变化后,侧支循环开放、增多,受累肝段与未受累肝段间发生浅表和深部肝静脉侧支吻合,使得肝内血管解剖变得异常复杂而完全不同于正常解剖结构,为肝外科手术中处理肝静脉提供了解剖学依据。

先天性无脾伴右位心及动脉导管未闭一例

尸检1岁3个月女婴标本,发现心右侧转位,脾缺如,肝水平分叶,现报道如下. 解剖胸腹部,心位于右侧胸腔,单心尖指向右侧.与正常心结构比较,本例心的心房、心室及大血管结构、位置与正常心呈镜像关系,呈右位心解剖特点.打开心包,发现主动脉弓右转,胸主动脉沿胸椎右侧下行.沿界沟、冠状沟、室间沟打开左、右心房、心室,发现室间隔、房间隔结构完整,主动脉、肺动脉发起正常,分别从左心室和右心室发出,无骑跨,但动脉导管未闭.

血管性痴呆模型大鼠海马CA3区微管相关蛋白-2的表达及其意义

目的:探讨海马CA3区神经元微管相关蛋白-2(MAP-2)表达变化与学习记忆功能的关系。方法:采用大白鼠大脑中动脉线栓法(MCAO)缺血再灌模型,分为缺血2h再灌(I/R)1d、7d、14d、30d、90d组和假手术组,免疫组织化学方法观察海马CA3区MAP-2表达,并用图像分析系统作定量分析;同时用Morris水迷宫检测再灌7d、14d、30d、90d组大鼠行为学变化。结果:缺血再灌1d海马CA3区MAP-2呈高表达突起断裂不均匀,再灌7d和14d表达最高,突起出现螺旋样变,再灌30d后MAP-2的表达开始恢复,突起依然断裂,再灌90d后突起形态基本恢复正常。行为学检测发现,大白鼠缺血再灌7d和14d组定位航行试验潜伏期明显延长,空间探索试验中跨平台次数减少,再灌30d开始恢复,再灌90d与假手术组无差别。结论:缺血再灌后,海马CA3区神经元处于高度可塑性状态,可能是神经元新的突触连接形成的结构基础之一,可部分代偿缺血敏感区CA1神经元丧失引起的学习记忆功能的下降。