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Sj31与鼠IFN-γ基因融合DNA疫苗免疫保护效果的研究
被引量:
2
1
作者
罗永慧
易新元
曾宪芳
《中国热带医学》
CAS
2005年第7期1401-1404,1514,共5页
目的构建表达mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗,并探讨其免疫保护作用。方法在Sj31基因上游引物与mIFN-γ下游引物的5’分别设计与克隆载体相匹配的酶切位点,在mIFN-γ上游引物与Sj31基因下游引物的5’设计相同的酶切位点。分别进行...
目的构建表达mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗,并探讨其免疫保护作用。方法在Sj31基因上游引物与mIFN-γ下游引物的5’分别设计与克隆载体相匹配的酶切位点,在mIFN-γ上游引物与Sj31基因下游引物的5’设计相同的酶切位点。分别进行PCR扩增,再通过引物的5’端相同的酶切位点进行2个PCR产物的酶切与连接,以连接产物为模板,应用Sj31的上游引物和mIFN-γ下游引物进行PCR扩增,将此次PCR产物经常规方法克隆入载体pcDNA3.0(简称为pc),构建成多价DNA疫苗pc-Sj31-mIFN-γ。对重组质粒鉴定后,大量制备纯化质粒免疫昆明小鼠,48只小鼠分为A、B、C、D4组,对照组的小鼠于股四头肌注射质粒pcDNA3.0100μg,3个免疫组的小鼠分别注射pc-Sj31、pc-mIFN-γ和pc-Sj31-mIFN-γ质粒DNA各100μg。在0、2、6周免疫共3次,第3次免疫后2周,每只小鼠经腹部贴片感染尾蚴40±1条,感染后第42天剖杀,计数各小鼠检获成虫数及肝卵数。结果pc-Sj31-mIFN-γ(D组)免疫组的减虫率和肝组织减卵率分别为28.56%和60.20%,但是表达鼠mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗并未明显优于单纯表达日本血吸虫组织蛋白酶B(Sj31)DNA疫苗的免疫保护作用。结论pc-Sj31-mIFN-γ多价DNA疫苗构建成功,但其诱导小鼠抗血吸虫病免疫保护效果不明显优于pc-Sj31。
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关键词
日本血吸虫
组织蛋白酶
B
mIFN-γ
多价DNA疫苗
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职称材料
日本血吸虫Mf2基因的亚克隆表达与免疫保护效果研究
2
作者
罗永慧
王庆林
+4 位作者
易新元
曾宪芳
蔡春
张顺科
章洁
《中国热带医学》
CAS
2004年第1期4-6,7,共4页
目的 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum Sj)Mf2蛋白 ,并对表达产物进行免疫保护效果测定。 方法 将SjMf2基因亚克隆至pCEX -5X -3原核表达载体 ,以GST融合蛋白的形式在ER2 688中表达 ,表达产物免疫小鼠 ,免疫...
目的 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum Sj)Mf2蛋白 ,并对表达产物进行免疫保护效果测定。 方法 将SjMf2基因亚克隆至pCEX -5X -3原核表达载体 ,以GST融合蛋白的形式在ER2 688中表达 ,表达产物免疫小鼠 ,免疫用抗原剂量为 5 0 μg 次 鼠 ,对照组分别注射FCA或PBS ,在 0、2、6周共免疫 3次。第 3次免疫后 2周进行攻击感染 ,42d后杀鼠 ,观察减虫和减卵效果。 结果 在IPTG诱导下 ,表达载体中的SjGST基因与重组的SjMf2基因在大肠杆菌中得以高效表达 ,形成了SjGST -Mf2融合蛋白 ,用这种融合蛋白免疫小鼠 ,诱导产生了2 7 75 %的减虫率和 45 7%的每雌肝组织虫卵减少率 (LEPF)。 结论 SjMf2基因亚克隆至pGEX -5X -3载体后可在大肠杆菌中高效表达 ,表达产物能诱导小鼠产生一定程度的抗日本血吸虫保护性免疫力。
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关键词
日本血吸虫
Mf2基因
亚克隆
基因表达
免疫保护
下载PDF
职称材料
题名
Sj31与鼠IFN-γ基因融合DNA疫苗免疫保护效果的研究
被引量:
2
1
作者
罗永慧
易新元
曾宪芳
机构
江西省妇幼保健院检验科
中南大学湘雅医学院寄生虫病研究室
出处
《中国热带医学》
CAS
2005年第7期1401-1404,1514,共5页
基金
WHO/TDR资助项目(No.980268)
文摘
目的构建表达mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗,并探讨其免疫保护作用。方法在Sj31基因上游引物与mIFN-γ下游引物的5’分别设计与克隆载体相匹配的酶切位点,在mIFN-γ上游引物与Sj31基因下游引物的5’设计相同的酶切位点。分别进行PCR扩增,再通过引物的5’端相同的酶切位点进行2个PCR产物的酶切与连接,以连接产物为模板,应用Sj31的上游引物和mIFN-γ下游引物进行PCR扩增,将此次PCR产物经常规方法克隆入载体pcDNA3.0(简称为pc),构建成多价DNA疫苗pc-Sj31-mIFN-γ。对重组质粒鉴定后,大量制备纯化质粒免疫昆明小鼠,48只小鼠分为A、B、C、D4组,对照组的小鼠于股四头肌注射质粒pcDNA3.0100μg,3个免疫组的小鼠分别注射pc-Sj31、pc-mIFN-γ和pc-Sj31-mIFN-γ质粒DNA各100μg。在0、2、6周免疫共3次,第3次免疫后2周,每只小鼠经腹部贴片感染尾蚴40±1条,感染后第42天剖杀,计数各小鼠检获成虫数及肝卵数。结果pc-Sj31-mIFN-γ(D组)免疫组的减虫率和肝组织减卵率分别为28.56%和60.20%,但是表达鼠mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗并未明显优于单纯表达日本血吸虫组织蛋白酶B(Sj31)DNA疫苗的免疫保护作用。结论pc-Sj31-mIFN-γ多价DNA疫苗构建成功,但其诱导小鼠抗血吸虫病免疫保护效果不明显优于pc-Sj31。
关键词
日本血吸虫
组织蛋白酶
B
mIFN-γ
多价DNA疫苗
Keywords
Schistosoma japoncium
Cathepsin B, mIFN - γ
Multivalance
DNA vaccine
分类号
R383.2 [医药卫生—医学寄生虫学]
下载PDF
职称材料
题名
日本血吸虫Mf2基因的亚克隆表达与免疫保护效果研究
2
作者
罗永慧
王庆林
易新元
曾宪芳
蔡春
张顺科
章洁
机构
中南大学湘雅医学院寄生虫病研究室
河北承德
医学院
基础部
出处
《中国热带医学》
CAS
2004年第1期4-6,7,共4页
基金
WHO/TDR资助项目 (980 2 68)
文摘
目的 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum Sj)Mf2蛋白 ,并对表达产物进行免疫保护效果测定。 方法 将SjMf2基因亚克隆至pCEX -5X -3原核表达载体 ,以GST融合蛋白的形式在ER2 688中表达 ,表达产物免疫小鼠 ,免疫用抗原剂量为 5 0 μg 次 鼠 ,对照组分别注射FCA或PBS ,在 0、2、6周共免疫 3次。第 3次免疫后 2周进行攻击感染 ,42d后杀鼠 ,观察减虫和减卵效果。 结果 在IPTG诱导下 ,表达载体中的SjGST基因与重组的SjMf2基因在大肠杆菌中得以高效表达 ,形成了SjGST -Mf2融合蛋白 ,用这种融合蛋白免疫小鼠 ,诱导产生了2 7 75 %的减虫率和 45 7%的每雌肝组织虫卵减少率 (LEPF)。 结论 SjMf2基因亚克隆至pGEX -5X -3载体后可在大肠杆菌中高效表达 ,表达产物能诱导小鼠产生一定程度的抗日本血吸虫保护性免疫力。
关键词
日本血吸虫
Mf2基因
亚克隆
基因表达
免疫保护
Keywords
Schistosoma japonicum
Mf2 protein
Molecular cloning
Immunoprotection
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Sj31与鼠IFN-γ基因融合DNA疫苗免疫保护效果的研究
罗永慧
易新元
曾宪芳
《中国热带医学》
CAS
2005
2
下载PDF
职称材料
2
日本血吸虫Mf2基因的亚克隆表达与免疫保护效果研究
罗永慧
王庆林
易新元
曾宪芳
蔡春
张顺科
章洁
《中国热带医学》
CAS
2004
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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参考文献
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