浅议细胞生物学理论教学的技巧

本文根据多年的生物学教学经验,总结了细胞生物学理论教学中的方法和技巧,涉及到课前准备、课后总结的必要性,精心组织课堂教学的技巧,合理使用多媒体教具的作用等.

早期干预对促进HIE患儿智能发育的影响

目的 了解早期干预对缺氧缺血性脑病 (HIE)患儿智能发育的影响。探求早期干预的最佳时间。方法 门诊确诊的未行早期干预的HIE患儿 36例为对照组 ,已行早期干预的 32例随访的HIE患儿为干预组 ,分别行婴幼儿智能发育测验 (CDCC)。结果 干预组智能发育指数 (MDI)在临界水平者 1例 ,精神运动发育指数(PDI)在临界水平者 2例 ,其余患儿MDI和PDI检测结果均在中等范围以上 ;对照组 36例患儿均为智能缺陷患儿。智能发育两者间比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。结论 早期干预能够促进HIE患儿智能发育。

雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL-60的生长抑制及凋亡诱导作用

目的 :探讨雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL 6 0细胞的增殖及凋亡的影响。方法 :应用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法、荧光染色法、流式细胞仪 (FCM )检测、DNA片段化分析等方法研究雷公藤多甙对HL 6 0细胞的影响。结果 :雷公藤多甙能显著抑制白血病细胞的增殖 ,降低肿瘤细胞的存活率 ,其半数细胞抑制剂量 (IC50 )为5 .0 μg/ml,阻滞细胞周期于G2 /M期 (P <0 .0 5 )。雷公藤多甙实验组在形态学上可见明显凋亡细胞 ,且凋亡细胞百分率显著上升 (P <0 .0 5 ) ,凝胶电泳分析有DNA梯状条带出现。结论 :雷公藤多甙能显著抑制人急性髓性白血病细胞株HL 6

底泥重金属铅对鲤鱼红细胞遗传物质的损伤

目的 研究河流底泥重金属污染对水生生物遗传物质的损伤。 方法 在含不同浓度 Pb2 +的底泥环境下饲养鲤鱼 ,取其红细胞涂片、染色 ,测定其微核细胞率。 结果 底泥 Pb2 + 含量在 1 96.2 3～ 2 51 9.60 mg/kg范围内时 ,随Pb2 +浓度升高 ,鲤鱼红细胞的微核细胞率也升高 (P<0 .0 1 ) ,表现出明显的量效关系。同时观察到 ,随高浓度的 Pb2 +作用时间延长 ,红细胞的微核细胞率有升高的趋势。

底泥重金属镉对鳙鱼血细胞微核率的影响

目的 研究河流底泥重金属镉污染对鳙鱼血细胞微核率的影响。 方法 在含不同浓度 Cd2 + 底泥环境下饲养鳙鱼 ,并分别于实验的 15、2 5、35、4 5、5 5、6 5、75和 85 d,每次每组随机取 4尾鱼 ,取其血细胞涂片、染色 ,测定其微核细胞率。 结果 底泥 Cd2 + 含量与水体中 Cd2 + 浓度正相关 ;随水体中 Cd2 + 浓度升高 ,鳙鱼血细胞的微核细胞率也升高 ,表现出明显的量效关系。

重复应激对5-羟色胺耗竭大鼠海马皮质类固醇受体表达的影响

目的研究重复应激对5-羟色胺(5-HT)耗竭大鼠海马糖皮质激素(GR)、盐皮质激素(MR)受体表达的影响。方法按体重匹配原则将大鼠随机分为应激组、5-HT耗竭组、5-HT耗竭应激组和对照组各12只。采用限制应激模型,5-HT耗竭组采用连续2d对氯苯异丙胺(p-PCA)200mg/kg腹腔注射,非5-HT耗竭组采用生理盐水注射对照;以免疫组化法比较海马各区GR/MR蛋白免疫反应性。结果应激组海马CA1、CA2、CA3、CA4区和齿状回(DG)GR免疫反应性分别高于对照组的CA1(P<0.05)、CA2(P<0.05)、CA3(P<0.01)、CA4(P<0.01)和DG(P<0.01),在5-HT耗竭组与对照组、5-HT耗竭组与5-HT耗竭应激组之间差异无统计学意义(P>0.05);海马各区MR灰度值在上述4组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论5-HT耗竭大鼠在重复应激中海马GR受体功能受到抑制,可能是5-HT水平低下个体对应激适应能力下降、从而导致应激相关障碍易感性增加的生物学基础。

边缘癫痫实验模型海马内突触体素表达

目的 探讨癫痫时突触体素 ( P38)在海马表达的时间变化及意义。方法 建立匹罗卡品边缘癫痫模型 ,用图像分析系统测定海马不同时间点 P38免疫反应吸光度值。结果 P38免疫反应性在海马呈现两次高峰 :致痫后3～ 6h在海马门区及 CA3区 P38短期升高 ,3 0～ 60 d CA3区呈现第 2次高峰。在内分子层 ,从第 7天开始直至第60天 P38呈进行性增多 ,且与 Neo-Timm染色结果相平行。结论 P38在海马第 2次表达增高 ,平行于苔藓纤维出芽 ,与自发性发作形成有关。急性期表达增高则与癫痫持续状态的产生与维持有关。

白色念珠菌分泌物对人类多发性骨髓瘤细胞作用机制的初步研究

目的 :探讨白色念珠菌 (ID16V1)分泌物对人类多发性骨髓瘤细胞 (ARH - 77)的作用。方法 :荧光染色观察对照组和实验组细胞形态变化 ;FCM检测凋亡细胞百分率。结果 :荧光显微镜下观察到白色念珠菌分泌物处理组的凋亡细胞增多 ;FCM检测实验组凋亡细胞百分率上升。结论 :白色念珠菌分泌物能促进ARH - 77细胞凋亡。

SD大鼠吗啡条件性位置偏爱易感性差异的内侧前额皮质多巴胺D2受体和多巴胺转运体机制

目的：通过研究高低吗啡条件性位置偏爱（conditioned place preference,CPP）易感性大鼠内侧前额皮质区（mPFC）的多巴胺D2受体和多巴胺转运体差异,以探讨吗啡精神依赖易感性差异的多巴胺D2受体和多巴胺转运体机制。方法：160只雄性大鼠随机分为实验组（n=130）和对照组（n=30）。建立大鼠吗啡CPP动物模型,根据吗啡处理后CPP值将大鼠分为高、中、低偏爱组。其中高、低偏爱组大鼠进入以下研究。分别于末次注射后3 h,72 h和第14天处死高偏爱组、低偏爱组和对照组各8只大鼠,利用组织原位杂交技术检测mPFC脑区多巴胺D2受体（dopamine D2recepter,D2R）mRNA和多巴胺转运体（dopamine transporter,DAT）mRNA的表达。结果：高偏爱组、低偏爱组和对照组的CPP预测试值无统计学差异（P=0.470）;CPP训练后,末次注射后3 h、末次注射后72 h和第14天,高偏爱组的CPP值与预测试值的差值均高于低偏爱组（P=0.000）。mPFC的D2RmRNA灰度值：末次用药后3 h,72 h和第14天,高偏爱组（125.43±2.90-142.92±3.32）均高于低偏爱组（122.25±2.20-136.67±5.39）（P=0.000）。DATmRNA灰度值：末次注射后3 h,高偏爱组（157.00±3.55）高于低偏爱组（150.69±3.12）（P=0.000）;在末次注射后72 h,高偏爱组（145.15±3.69）高于低偏爱组（138.84±3.99）（P=0.000）;在末次注射后第14天,高偏爱组、低偏爱组及对照组的mPFC区DATmRNA灰度值无统计学差异（P=0.458）。结论：mPFC的D2RmRNA和DATmRNA低表达可能与吗啡高易感性有关。

SjAWMAg免疫血清和吡喹酮联用体内杀不同发育期血吸虫的实验研究

目的 观察日本血吸虫成虫表膜抗原(SjAWMAg)免疫血清与吡喹酮合用对不同发育期血吸虫的杀虫效果,探讨体液免疫在吡喹酮杀虫中的作用。 方法 提取 SjAWMAg,并用 SDS PAGE 对其进行鉴定,制备高滴度(1∶25 600)SjAWMAg抗血清,采用Western blot分析该血清与肺期童虫、肝期童虫及成虫抗原的反应性;将 SjAWMAg抗血清与吡喹酮合用治疗血吸虫感染后第2 d、第14 d和第35 d的小鼠,在感染后第49 d剖杀小鼠收获虫体,计算减虫率和减卵率。结果 Western blot分析表明,SjAWMAg抗血清与肺期及肝期童虫抗原存在交叉反应; 联合用药的 3 个治疗组(感染2、14、35 d)与单用吡喹酮组比较杀虫作用均有显著提高,减虫率分别提高了 38.79%、29.80%和 46.82%,其中以感染35 d治疗组提高最显著;减卵率分别提高了 62.04%,42.78%和 29.81%,以感染 2 d治疗组更为显著。结论抗SjAWMAg多克隆抗体与吡喹酮联合使用,均可提高吡喹酮对不同发育期血吸虫的杀灭效果,揭示体液免疫在吡喹酮杀血吸虫过程中具有重要作用,同时提示这种联合用药可能解决单用吡喹酮治疗血吸虫早期感染效果不佳的难题。

水仙提取物对人类多发性骨髓瘤细胞系ARH-77增殖和凋亡的作用

目的研究水仙提取物对人类多发性骨髓瘤细胞系ARH-77的增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法检测水仙提取物(1.25、2.5、5、10、20μg/mL)作用ARH-77细胞3d后细胞存活率的变化;采用荧光染色法观察水仙提取物(10μg/mL)作用3d对ARH-77细胞凋亡的影响;流式细胞仪分析细胞周期时相变化和检测细胞凋亡率;核仁组织区(NOR)相关嗜银蛋白(AgNOR)染色法检测细胞NOR的改变;透射电镜观察细胞亚微结构变化。结果水仙提取物能明显抑制ARH-77细胞增殖,降低细胞存活率(P<0.01),其IC50为4.8μg/mL;促进肿瘤细胞凋亡(P<0.05),阻滞细胞周期于G2/M期(P<0.01);降低AgNOR的数目(P<0.001)和促进AgNOR的融合(P<0.01);引起细胞亚微结构改变。结论水仙提取物能抑制ARH-77细胞增殖,诱导ARH-77细胞凋亡。

日本血吸虫染色体核型及其G带带型分析

目的 探索日本血吸虫染色体的制作及其G带显带方法 ,进一步分析其染色体核型和G带带型特征。 方法日本血吸虫 18d童虫 ,经 2 0 μg/ml的秋水仙素溶液培养后剪碎 ,经消化、低渗和固定等处理 ,然后作滴片、烤片、胰酶消化和Giemsa染色显G带 ,最后在光镜下观察并测量染色体大小 ,显微摄像 ,分析染色体核型及其G带显示的特征。 结果 日本血吸虫染色体数 2n =16,按大小顺序排列分为 3组 :大型 1～ 2号为A组 ,其中 2号为性染色体 ,中型 3～ 5号为B组 ,小型 6～ 8号为C组 ,其核型公式为 2n =6st +8sm +2m ;各对染色体均显示出各自特征性的G带。 结论 本研究采用 2 0 μg/ml的秋水仙素溶液处理日本血吸虫童虫 ,能获取较理想的染色体图像 ,进一步证明血吸虫核型为 2n =16,n =8,多倍体亦可见。此外 ,对日本血吸虫染色体G带显示特征作了初步分析。

一种简易的小牛血清制备方法

小牛血清是细胞组织培养中常用的培养基成份。介绍一种简易、快捷的小牛血清制备方法 ,经该方法制备的血清质量稳定 。

大鼠后足切割后脊髓和背根神经节中脑源性神经营养因子表达的变化

目的观察大鼠后足切割后脊髓和背根神经节(DRG)中脑源性神经营养因子(BDNF)水平的变化及其定位。方法雄性SD大鼠24只,体重150～250g,均施行后足切割手术。术后1h、6h、1d、3d各取6只大鼠行行为学检测后处死,分离脊髓和DRG进行免疫组化和双标免疫荧光检测BDNF。结果大鼠后足切割后,切割侧腰段脊髓背角和DRG中BDNF水平上升(P<0.05)。而对侧腰段和胸段脊髓中BDNF水平均没有明显改变。升高的BDNF主要定位于神经元而非星形胶质细胞或小胶质细胞。结论大鼠后足切割后切割侧腰段脊髓背角和DRG中BDNF表达上升,BDNF升高主要定位于神经元。

多发性骨髓瘤细胞中一个新的Alu超基因家族成员的克隆与分析

根据Genebank收录的多发性骨髓瘤细胞株 (ARH 77)表达上调ESTAF4 97797设计引物 ,采用半定量RT PCR证实了多发性骨髓瘤患者及正常人骨髓细胞中该expressedsequencetags(EST)存在表达差异 .用ESTAF4 97797作探针筛选人胚肾cDNA文库 ,获得cDNA克隆经测序并用生物信息学方法对该序列进行了初步分析 .AF4 97797在多发性骨髓瘤患者骨髓中确有较高的表达 ,而在正常人骨髓细胞中低表达 .获得的全长cDNA克隆序列长 1 2 4 8bp(Genebank登录号 :AY0 94 6 1 2 ) .生物信息学分析显示该片段全长cDNA编码 4 4个氨基酸的蛋白产物且可能属于Alu家族成员 .基因AY0 94 6 1 2为一个在多发性骨髓瘤中表达上调的新基因 ,其改变可能与多发性骨髓瘤的发生与发展有关 .

SD大鼠吗啡依赖易感性差异与脑内5-羟色胺转运体和5-羟色胺1A受体mRNA表达的关系(英文)

目的:探讨5-羟色胺转运体(5-HTT)和5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)在吗啡精神依赖易感性差异形成中的可能作用机制。方法:使用条件性位置偏爱模型,将大鼠分为高、低偏爱组,采用原位杂交对成瘾密切相关的3个脑区:内侧前额叶皮质(mPFC)、中脑腹侧被盖区(VTA)和伏隔核(NAc)内5-HT转运体和5-HT1A受体mRNA的表达在依赖和戒断过程中的动态变化。结果:在大鼠依赖状态下,5-HT转运体mRNA的表达在mPFC,VTA,Nac 3个区域,高吗啡CPP组显著低于低吗啡CPP组,而5-HT1A受体mRNA的表达却相反,高吗啡CPP组显著高于低吗啡CPP组(P<0.05);在戒断状态时正好相反,5-HT转运体mRNA的表达在mPFC,VTA,Nac 3个区域,高吗啡CPP组显著高于低吗啡CPP组,而5-HT1A受体mRNA的表达却是高吗啡CPP组显著低于低吗啡CPP组(P<0.05)。结论:5-HT转运体和5-HT1A受体可能参与了大鼠吗啡易感性差异的形成。

多发性骨髓瘤中新的表达上调Alu超基因家族成员在不同肿瘤组织中的表达分析

目的 :分析多发性骨髓瘤患者中表达上调基因在正常组织及不同类型实质性肿瘤组织中的表达。方法 :运用RNA点杂交、半定量RT -PCR方法分析AY0 94 6 12在肿瘤组织与正常组织中的表达差异。结果 :多组织表达膜杂交结果显示AY0 94 6 12在各种正常组织以及几种癌细胞系中均有表达。RNA点杂交及半定量RT -PCR均显示AY0 94 6 12在直肠癌、肺癌、脑瘤组织中均表达水平上调 ,其它如胃癌、肝癌、子宫内膜癌、卵巢癌患者的组织中亦有部分表达水平上调。结论 :AY0 94 6 12的表达上调可能是恶性肿瘤发生的一个重要因素。

武警某部新训期间卫生防病工作的做法和体会

总结武警某部新训部队卫生防病工作的做法和经验,探索武警集中新兵训练期间的卫生防病工作规律,不断提高卫生防病能力。对近年新兵集中训练期间卫生防病工作进行回顾,总结做好新训卫生防病工作经验。针对南方地区秋冬季节气候特点,总结出新训期间卫生防病工作的3点做法,同时获得3点体会。