血管内皮生长因子在内皮细胞的稳定表达促进一氧化氮分泌

目的 建立稳定表达血管内皮生长因子的人脐静脉内皮细胞系 ,研究转染后对内皮细胞生长和一氧化氮分泌的影响。方法 将真核表达载体PCD2 VEGF12 1用阳离子脂质体介导 ,转染人脐静脉内皮细胞系细胞 ,分别用RT PCR、免疫组化、Miles实验检测血管内皮生长因子的转录、蛋白质的表达及其生物学活性 ,检测转染后内皮细胞生长状况和培养基中一氧化氮水平。结果 RT PCR检测出了转录血管内皮生长因子的稳定转染细胞克隆 ,该单克隆细胞的免疫组化检测血管内皮生长因子蛋白质表达结果呈阳性 ,Miles实验表明其表达产物具有生物学活性 ,而作为对照的转空白质粒细胞和未转染细胞上述实验结果皆为阴性 ;转染后内皮细胞生长明显加快 ,一氧化氮水平在 4 8h和 72h时明显增高。结论 成功建立了稳定表达血管内皮生长因子的内皮细胞系 ,血管内皮生长因子转染可促进内皮细胞生长和一氧化氮分泌。

糖尿病大鼠主动脉内皮形态功能及培哚普利影响的研究

探讨链脲菌素 (STZ)糖尿病 (DM)大鼠血管内皮超微结构和功能变化 ,以及培哚普利对其影响。雄性SD大鼠随机分为正常对照组 (NC)、DM对照组 (DC)、DM治疗组 (DP) ,病程 4周后DP组每天予培哚普利 2mg·kg-1。分别于第 4,8,16周测血糖、血浆ET 1和AngⅡ ,并取主动脉作电镜观察。结果显示 :DC组 8周时 ,内皮细胞线粒体明显肿胀、空泡变 ,16周时血管内膜增厚 ,内皮细胞广泛坏死脱落 ,但DP组病变明显减轻。各病程中DC组血浆AngⅡ均明显升高 ,血浆ET 1在 8周时明显升高 ,而 16周时明显降低 ,在DP组血浆AngⅡ明显降低 ,ET 1则先降 (8周 )后升(16周 )。提示糖尿病大鼠主动脉内皮细胞随病程不同出现超微结构和功能变化 ,血浆ET 1可能是反应内皮细胞损伤的一个指标 ,培哚普利对糖尿病大鼠主动脉内皮细胞损伤有一定保护作用。

cDNA微阵列结合聚类分析探讨大鼠心肌缺血-再灌诱导的基因表达谱改变

目的 :探讨大鼠心肌缺血 再灌诱导的基因表达谱改变 ,为揭示心肌内源性保护的分子机制提供新的线索和思路。方法 :采用反复短时间结扎及松解左冠状动脉主支构建大鼠心肌缺血 再灌反应动物模型 ,运用含 4 0 97个大鼠基因点的cDNA芯片检测大鼠心肌缺血 再灌处理后不同时间点 (1,3,6 ,12 ,2 4h)的基因表达情况 ,并采用SOM算法将具有相似表达模式的基因进行聚类。结果 :短时间缺血后再灌 1,3,6 ,12 ,2 4h分别有 75 ,779,2 0 5 ,15 5 ,16 6个基因表达发生改变。具有相同表达模式的基因被聚为 12类。结论 :心肌缺血 再灌可以诱导心肌的基因表达谱发生改变 ,具有相似表达模式的基因可能具有相似的功能或相似的表达调控机制。

HSP25对小鼠心肌缺血-再灌注所致肌动蛋白损伤的保护作用

目的 :观察肌动蛋白在小鼠心肌缺血 -再灌注损伤时的改变及小分子热休克蛋白HSP2 5和热休克预处理对其的保护作用。方法 :Langendorff离体小鼠心脏经缺血 30min再灌注 4 5min后 ,采用免疫双荧光标记 -激光共聚焦显微技术观察肌动蛋白和HSP2 5的改变 ;采用Westernblot检测HSP2 5对H2 O2 所致心肌组织肌动蛋白沉淀的影响 ;采用电镜、免疫双荧光标记 -激光共聚焦显微镜、MDA测定及Westernblot检测热休克预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。结果 :缺血 -再灌注导致心肌组织肌动蛋白排列紊乱、溶解及聚集 ;HSP2 5从胞浆向肌动蛋白骨架移位 ,并分布于受损肌动蛋白形成的聚集体中 ,两者形成“共分布” ;热休克预处理诱导心肌HSP2 5表达增加 ,并可明显减轻缺血 -再灌注所致的肌动蛋白损伤 ;蛋白质体外实验证实纯化的外源性HSP2 5可使H2 O2 所致肌动蛋白变性沉淀重新解聚复性为可溶性蛋白质。结论 :肌动蛋白是心肌缺血 -再灌注时受损的重要靶蛋白之一 ;HSP2 5对缺血 -再灌注所致肌动蛋白损伤的保护可能是心肌内源性保护的重要机制之一。

基于小波变换的小鼠QRS复合波检测

采用二进小波变换与斜率和幅度相结合的方法,对小鼠QRS复合波进行检测。根据小鼠QRS复合波的特点,采用Daubechics小波为母函数,按照ECG的频谱特点选用尺度因子,对有噪声污染和形态变异的QRS复合波进行了检测。结果表明:小波变换对小鼠QRS复合波的检测是一种有效的方法。

心肌缺血-再灌注反应相关基因研究进展

心肌缺血 再灌注可诱导许多基因表达发生改变 ,如立早基因、抗氧化酶、一氧化氮合酶、凋亡相关基因、生长因子、热休克蛋白、炎症因子、环氧合酶 2等 ,全面了解这些基因表达改变及其意义 ,对于揭示心肌顿抑和缺血预适应现象的分子机制 ,进一步探索治疗心肌缺血 再灌注损伤的分子靶具有重要意义。