医院后勤管理体制改革的实践与探索

中南大学湘雅三医院，原为湖南医科大学附属第三医院，由国家卫生部“八五”期间重点投资建设。是一所集医疗、教学、科研为一体的综合性医院。

膜联蛋白V在子痫前期蜕膜组织中的表达及其意义

目的探讨膜联蛋白V(Annexin V)在子痫前期蜕膜组织中的表达及意义。方法采用荧光实时定量PCR、Western blot和免疫组织化学技术分别对正常足月妊娠妇女(对照组)35例、晚发型重度子痫前期33例及早发型重度子痫前期38例的Annexin V mRNA及蛋白进行测定。结果Annexin V主要表达于蜕膜细胞的胞膜、胞浆及间质。荧光实时定量PCR,Western blot和免疫组化表达等各方法验证结果显示:Annexin V mRNA及蛋白在正常妊娠组蜕膜组织中表达最高;晚发型子痫前期组中次之;早发型子痫前期中最低,正常妊娠组与早发组和晚发组差异有统计学意义(P<0.01),早发组和晚发组差异没有统计学意义(P>0.05)。结论Annexin V在子痫前期蜕膜组织中表达下调,Annexin V的低表达可能与子痫前期高凝状态形成有关。

病例导入式PBL在八年制临床专业妇产科教学中的应用

目的探讨病例导入式PBL在妇产科临床教学中的教学效果。方法以中南大学湘雅三医院2006级八年制临床医学专业的学生为研究对象,根据随机原则将同学分为2组,分别采用传统教学模式和病例导入PBL模式授课。结果在期末理论测试中实验组的学生成绩虽然高于对照组,但差异没有统计学意义(P>0.05)。在技能考核中,实验组的学生成绩均优于对照组的学生,差异有统计学意义(P<0.01)。结论病例导入式PBL模式能提高学生的实际操作能力,更好地发挥学生学习的主动性、提高学生的交流沟通能力,能提高学生的综合素质。

切开复位重建钢板内固定治疗跟骨关节内骨折效果(附35例报告)

目的探讨重建钢板内固定治疗跟骨关节内骨折的效果及减少并发症的策略。方法对35例39侧跟骨关节内骨折采用外侧扩大"L"形切口,使用跟骨重建钢板固定,并对术后并发症进行分析。结果术后3个月,35例39侧跟骨关节内骨折按Maryland评分,优良率为76.92%。Bhler角由术前13.2°±4.1°恢复到术后38.5°±9.1°。随访中有1例后关节面发生塌陷,Bhler角5°,行走严重疼痛。切口坏死2例,切口感染1例,无腓肠神经损伤。并发症发生率11.43%。结论采用重建钢板内固定治疗对SandersⅡ、Ⅲ型跟骨关节内骨折,术中掌握复位和固定的关键点,正确选择手术时机和切口无创操作能取得满意的疗效。

子痫前期蜕膜组织差异蛋白的筛选与鉴定

目的:应用蛋白质组学方法筛选子痫前期差异蛋白,探讨差异蛋白与子痫前期发生的可能关系.方法:收集5例正常足月妊娠妇女和5例足月子痫前期重度患者胎盘母面及宫壁上的蜕膜组织,提取总蛋白.双向凝胶电泳技术对总蛋白进行分离,考马斯亮兰染色,获得蛋白质图谱.用PDQuest软件进行图像分析,寻找差异蛋白,随机选取8个差异蛋白质点进行胶内酶解,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术获得肽质量指纹谱,搜寻蛋白质数据库鉴定蛋白质并进行初步分析.结果:获得了正常妊娠及子痫前期重度患者蜕膜组织双向电泳凝胶图谱,蛋白质点子痫前期组为(436±13)个点,正常妊娠组为(425±16)个点,图像分析结果显示表达丰度相差2倍以上的差异蛋白质点有14个,它们在子痫前期中均表现下调.随机选取的8个蛋白质点均成功得到鉴定,它们分别是膜联蛋白-Ⅴ,血红蛋白β链,Rho-GDP解离抑制剂1,氯离子细胞内通道蛋白1,原肌球蛋白4,平滑肌蛋白22α2,α1-抗胰蛋白酶和纤维蛋白原β链.结论:子痫前期重度患者蜕膜组织中存在差异蛋白,这些蛋白质在子痫前期的发病过程可能起重要作用.

波形蛋白在子痫前期蜕膜组织中的表达及其意义

目的:探讨波形蛋白在子痫前期蜕膜组织中的表达及意义。方法:采用荧光实时定量PCR(SYBR GREEN I assay)、Western blotting和免疫组织化学技术分别对晚发型重度子痫前期(A组)及早发型重度子痫前期(B组)和正常足月妊娠妇女(对照组,C组)各10例的波形蛋白mRNA及蛋白进行测定。结果:波形蛋白主要表达于蜕膜细胞的胞膜、胞浆及间质。荧光实时定量PCR,Western blotting和免疫组化表达等各方法验证结果显示:波形蛋白mRNA及蛋白在C组蜕膜组织中表达最高;B组中次之;A组中最低,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:波形蛋白表达下调可能参与子痫前期的病理过程,并且波形蛋白下调的程度同子痫前期发病的早晚有关。

医原性输精管损伤

医原性输精管损伤是指由外科手术等医疗活动引起的输精管损伤 ,通常只有在婚后无精子、不育时才有可能被诊断。因睾丸及精道的对称性 ,手术及其损伤大多为单侧而不影响生育。因此 ,损伤的发生率远高于诊断率。现就医原性输精管损伤的分类、损伤的解剖基础及预防措施、诊断和治疗中的难题及对策进行讨论。尽管重建术后的复精、复妊娠率较男性输精管结扎再通低 ,但大多数学者仍主张外科重建以提高生活质量。在重建中 ,着重介绍了不经内环 ,而经外环 ,裁弯取直 ,缩短输精管行程重建的新技术。

靛氰绿-光动力学疗法对离体猪食管的作用

目的探讨靛氰绿(ICG)光动力学作用中激光照射猪食管的最佳功率和照射时间以及此等参数的激光对猪食管壁的损伤程度,为临床应用光动力学疗法治疗食管静脉曲张提供实验依据。方法采用不同功率的半导体激光照射离体猪食管标本,通过黏膜变性发白的功率时间关系,确定激光照射最佳功率;再采用该功率,对猪食管黏膜下分别注射靛氰绿溶液(实验组)和生理盐水(对照组)的猪食管离体标本进行照射,肉眼观察2组激光照射后猪食管壁的变化。结果激光照射最佳功率10W。采用功率为10W激光照射后,实验组猪食管黏膜激光照射时黏膜变性快,变性范围大,且深部组织不受损伤。对照组猪食管黏膜变性慢,变性面积小,且深部组织有损伤变性。结论激光照射离体猪食管功率10W较合适,黏膜下注射光敏剂靛氰绿可以加强治疗热效应,且对深部组织具有保护作用。

基因重组融合蛋白hNPY对小鼠前脂肪细胞增殖和分化影响的实验研究

目的：前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化潜力的特异化的前体细胞，如能找到可促进前脂肪细胞增殖和分化的因子或药物，并在脂肪组织移植的同时使用，则有希望提高脂肪组织的移植效果，本实验探索一种新的人体肥胖关联基因和外周脂肪细胞激动剂一基因重组融合蛋白hNPY对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响及其分子调控机制。方法：采用基因工程技术设计hNPY基因上下游序列，经过PCR反应合成hNPY的cDNA后与pET28a＋载体重组，再将已构建好、并经测序确认无误的重组质粒pET28a—NPY转导至大肠杆菌BL21（DE3），再由IPTG诱导表达hNPY融合蛋白、并进行纯化；然后，将体外培养的小鼠3T3-L1前脂肪细胞经由3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素和地塞米松进行联合诱导；诱导2d后，再将此细胞分为三组，即空白对照组（未加任何诱导剂组）、经典诱导组（胰岛素诱导）和实验干预组（hNPY融合蛋白干预），其中，实验干预组再按照hNPY融合蛋白浓度不同又分为高、中、低三个浓度组（10^-8mol／L、10^-19mol／L和10^-9 mol／L）。分别于细胞培养的第7d和第12d用相差显微镜观察各组细胞的形态学变化，再于细胞培养的第12d用油红O染色观察脂肪细胞的分化程度；同时，采用MTT法检测该细胞的增殖状况；采用Westernblot法检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体-γ（PPAR-γ）、CAAT／增强子结合蛋白-a（C／EBP-a）蛋白的表达水平。结果：低浓度（10^-10 mol／L）的hNPY融合蛋白，无明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的作用效果；中浓度（10^-9 mol／L）的hNPY融合蛋白，可有效促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖及细胞数量增多；而高浓度（10^-8 mol／L）的hNPY融合蛋白，不仅能明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞的细胞增殖和分化，且能显著提高该细胞C／EBPa和PPARγ的表达水平、而明显降低INSIG-2的表达。结论：高浓度（10^-8mol／L）的基因重组融合蛋白hNPY能够明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化，其促进3T3-L1细胞增殖和分化的分子调控机制很可能与上调PPARγ、C／EBPa表达和降低INSIG-2表达水平有关，这提示：hNPY作为脂肪细胞膜上受体NPYR的有效促进剂或激动剂，未来很可能成为人体外周脂肪细胞一个新的作用靶点。

腔镜在优化妇产科临床教学中的作用

妇产科临床教学一直是困扰教师的难题,腔镜是近十余年发展的新兴技术,由于其具有微创,直观录像等优点,近年我院将其合理应用在临床教学,发现能增加教学的生动性、趣味性,调动了学生学习的主动性与积极性,培养了学生的临床思维能力,优化了妇产科临床教学。

不同血清浓度及体外培养时间对小鼠成纤维细胞L929细胞系生长曲线和细胞形态学的影响

目的探讨不同实验条件下不同血清浓度及体外培养时间对小鼠成纤维细胞L929细胞系生长曲线和细胞形态学变化的影响。方法采用体外细胞培养技术进行小鼠成纤维细胞L929细胞的培养,并用磺基罗丹明B（sulforhodamine B,SRB）酶标仪法（A490 nm波长）测量各孔的吸光值（OD值）并转化为小鼠成纤维细胞L929细胞系生长曲线。同时,分别采用HE染色法、吖啶橙荧光染色进行小鼠成纤维细胞L929细胞系形态学观察。结果小鼠成纤维细胞L929细胞系分别在不同浓度的血清中培养2、4、6、8 d,其表现出不同的生长和生存情况及细胞形态学改变。将该细胞系处于相同培养时间和不同血清浓度（0%、20%、40%、60%、80%、100%）时,在20%和40%血清浓度组中,成纤维细胞的生长基本表现为OD值呈现快速增加趋势、且对细胞生长促进作用较强;而血清浓度为0%和100%时对小鼠成纤维细胞L929细胞生长表现出明显抑制作用及OD值呈逐渐减小的趋势。当该细胞系处于不同培养时间、且相同血清浓度时,除0%组OD值呈现减弱趋势,其他浓度组随时间的延长OD值呈增加趋势,在4 d之内OD值增长较快,4~6 d增长趋势减弱,6~8 d增长趋势回升,尤其是100%组。在这种实验条件下,小鼠成纤维细胞L929细胞的形态学也发生了相应改变。结论不同血清浓度及不同培养时间等体外培养环境对小鼠成纤维细胞L929细胞系生长和生存及细胞学形态均有明显影响,提示利用血清进行体外细胞培养时应充分考虑所添加血清的浓度以及细胞培养的时间。

不同血清浓度及介质对体外培养小鼠成纤维细胞L929细胞系生长曲线和细胞形态的影响

目的:通过探讨不同血清浓度及介质对体外培养小鼠成纤维细胞L929细胞系生长曲线和细胞形态的影响,了解它们对成纤维细胞体外生存和生长的情况。方法:采用体外细胞培养技术进行小鼠成纤维细胞L929细胞,并采用磺基罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)酶标仪法(A490nm波长下)测量各孔的吸光值(A值)并转换为小鼠成纤维细胞L929细胞系生长曲线;同时,分别采用HE(苏木精-伊红)染色法、吖啶橙荧光染色和Hoechst33342荧光染色法进行小鼠成纤维细胞L929细胞系形态学观察。结果:小鼠成纤维细胞l929细胞系不同浓度的血清分别在3种不同的介质(RPMI1640培养基、0.9%生理盐水和5%葡萄糖生理盐水)中表现出不同的生长和生存情况及细胞形态学改变。其中,在不同血清浓度(0%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%)的同一介质中,血清浓度为0%和100%浓度组的小鼠成纤维细胞L929细胞生长明昆抑制及吸发光度(A)值呈逐步减少的趋势,而除此之外的其它血清浓度组对小鼠成纤维细胞L929细胞的影响,基本表现为随着血清浓度的升高,吸光度(A)值呈逐步增加及促进细胞生长的趋势。而某些相同血清浓度在不同介质中对小鼠成纤维细胞L929细胞系生长和生存及形态学的有利影响,则基本表现为RPMI1640培养基作为介质的细胞培养效果优于0.9%生理盐水,而0.9%生理盐水作为介质的细胞培养效果又优于5%葡萄糖生理盐水。结论:不同血清浓度及介质对体外培养小鼠成纤维细胞L929细胞系生长和生存及细胞学形态均有明显影响。提示在进行体外细胞培养时应充分考虑细胞培养介质及所添加血清的浓度。

威灵仙软膏的制备及临床应用

目的:介绍威灵仙软膏的的制备及临床应用。方法:将威灵仙的水提取液制成O/W型乳剂,并外用治疗骨质增生症128例。结果:威灵仙软膏制剂稳定,质量可靠,治疗骨质增生症临床治愈为80.47%,有效率为90.6%。结论:威灵仙软膏制备工艺可行,质量稳定,治疗骨质增生症近期疗效高,且无明显不良反应。

寨卡病毒、寨卡病毒感染和诊治新进展

本文介绍了寨卡病毒的病原学特征,寨卡病毒感染的流行病学、临床表现和诊断治疗新进展。寨卡病毒是一种单链RNA病毒,属黄病毒科黄病毒属成员。主要通过伊蚊叮咬传播,其他传播方式还有性传播、血液传播、母婴传播。约20%感染者表现轻微症状,包括低热、斑丘疹、关节疼痛、结膜炎等,严重者采用对症治疗。寨卡病毒感染引起关注的重要原因是其神经系统并发症,包括吉兰巴雷综合征、孕妇感染引起胎儿的小头畸形等。确诊感染目前尚无金标准,主要是采用RT-PCR检测血清、唾液、组织、尿液、全血中寨卡病毒RNA。

剖宫产同时行子宫肌瘤切除术可行性分析

目的探究剖宫产同时行子宫肌瘤切除术可行性及其安全性,旨在为手术的顺利进行提供可靠的保障及有力的依据。方法随机选取我院2010年1月—2013年10月期间所收治的剖宫产且一同做切除子宫肌瘤手术的患者共有120例,将这些患者共同构成一个实验组;选出同一时期收治的妊娠合并子宫肌瘤且仅行剖宫产术的240例患者,以此作为对照组,回顾性分析并比较两组患者的临床资料。结果经过比较发现术中两组患者的出血量、身体恢复状况以及产褥病率等无统计学意义上的差异,P>0.05。剖宫产同时行子宫肌瘤切除术实验组比妊娠合并子宫肌瘤且仅行剖宫产术组的手术时间要长,两组差异具备统计学意义,P<0.05。结论对经验比较丰富的妇产科医生而言要结合患者具体情况,对剖宫产且一同切除子宫肌瘤手术应有选择性的实施,这样才能保证手术的安全,妇产科医生应当予以高度重视,并且可以在临床上予以推广及应用。

血清介质对体外培养L929系小鼠成纤维细胞表达产物Ⅰ、Ⅲ型胶原及其比值的影响

目的探讨不同浓度血清、不同体外培养时间对L929系小鼠成纤维细胞表达产物Ⅰ、Ⅲ型胶原及其比值的影响。方法采用双抗体夹心法检测细胞培养液中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量,并同时计算出Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值。结果除0%血清浓度组的Ⅰ、Ⅲ型胶原呈现无明显变化的微弱升高趋势外,其余各血清浓度组的Ⅰ、Ⅲ型胶原均处于增加状态,且在6~8 d时增加最为明显;另外,Ⅰ/Ⅲ型胶原比值随着血清浓度和细胞生长时间不同,表现出不同的变化趋势。其中20%和40%血清浓度组随着培养细胞生长时间延长,Ⅰ/Ⅲ型胶原比值逐渐增加;而其他血清浓度组,随着细胞培养时间的延长,Ⅰ/Ⅲ型胶原比值增加并不明显。结论 L929细胞在不同体外培养时间和不同浓度血清下其表达产物Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及其比值有一定变化,为今后优化体外细胞培养条件提供了相关的实验数据。

预防心梗 把握最佳时机

“您的心电图结果显示，现在您非常危险，必须马上停止体检去医院心内科急救。”55岁的杨先生在医院体检时,心电图医生通过心电图的异常表现，确诊发现疑似急性心肌梗死，及时把杨先生送到心内科抢救。原来，杨先生的心电图结果“红旗飘飘”，是十分典型的急性心肌梗死现象。

“亲吻病”鼻咽癌病因都是它

不少家长的朋友圈都曾被“亲吻病”的相关新闻刷屏过,有些家长从此不敢跟孩子亲密接触;但鲜为人知的是,引起“亲吻病”的病毒居然还是鼻咽癌的重要诱因.那么,到底是什么病毒,竟有如此大的杀伤力呢7它就是今天的主角--EB病毒.

鼻子里也能长出“荔枝”来

近日,耳鼻喉科门诊来了一位心急火燎的患者,一进门就对医生说：＂医生!医生!快帮我看看,我的鼻子里有一坨像荔枝一样的东西,快帮我看看是不是别人趁着我睡着的时候给我弄的恶作剧？＂ 经过检查,医生确诊这位患者原来是患上了鼻窦炎并鼻息肉,那坨像荔枝一样的东西正是鼻息肉,是因为鼻粘膜长期炎症引起组织水肿,晶莹剔透,看上去活像荔枝肉。

自体血清（血浆）在基础医学研究中的应用

自体血清（血浆）因其富含广谱、齐全的基本营养成分和生物活性物质及对细胞生存、生长和生命活动具有调控或促进作用的细胞因子等，加上来源于自体的成分，因此，通常在应用上具备生物多样性、安全性、稳定性和相容性等特点和优势，使其在现代基础医学研究中的应用越来越广泛。为了进一步探究和更加科学地将自体血清（血浆）应用于体外细胞培养和组织工程研究中，本文通过对自体血清（血浆）的主要成分及基本生物学特性阐述自体血清（血浆）在细胞生物学和组织生物学研究中的应用。