miR-891a-5p通过CPEB1调控结肠癌细胞生物过程的机制研究

目的 探讨miR-891a-5p通过细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白1(CPEB1)调控结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的机制。方法 运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测结肠癌组织、癌旁组织、人正常结肠上皮细胞和人结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达;将LOVO细胞分为A组(不做任何处理)、B组(转染anti-miRcon)、C组(转染anti-miR-891a-5p)、D组(共转染anti-miR-891a-5p和si-con)、E组(共转染anti-miR-891a-5p和siCPEB1)、F组(转染miR-con)、G组(转染miR-891a-5p);CCK-8法检测细胞增殖率、Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹实验检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、胱天蛋白酶-3酶原(Pro-caspase-3)、裂解的胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果 与癌旁组织相比,结肠癌组织miR-891a-5p表达升高,与正常结肠上皮细胞相比,结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达均显著升高(P<0.05)。与B组相比,C组miR-891a-5p、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin蛋白表达下降,细胞增殖率、迁移、侵袭数量降低,C-caspase-3、CPEB1、E-cadherin蛋白表达和凋亡率升高(P<0.05);与D组相比,E组miR-891a-5p、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平升高,细胞增殖率、迁移、侵袭数量升高,C-caspase-3、CPEB1、E-cadherin蛋白表达和凋亡率降低(P<0.05)。miR-891a-5p与CPEB1的3′-UTR存在连续的6个互补结合位点。与F组相比,G组WT-CPEB1荧光活性和CPEB1蛋白表达降低;与B组相比,C组WT-CPEB1荧光活性升高(P<0.05)。结论 miR-891a-5p可促进结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭,抑制凋亡,其作用机制可能与靶向抑制CPEB1有关。