Circ_0080425通过miR-1182/FGF9轴影响高糖环境下血管内皮细胞功能

目的探讨circ_0080425调控高糖环境下内皮功能的作用及分子机制。方法采用qRT-PCR检测在高糖环境下培养的人血管内皮细胞(human vascular endothelial cells,HUVECs)中circ_0080425的表达变化,通过小干扰RNA(siRNA)对circ_0080425进行敲低,并利用CCK-8、平板克隆、Transwell和流式细胞术,观察circ_0080425对高糖培养下的HUVECs增殖、迁移以及凋亡等生物学特性的影响。利用生物信息学网站预测circ_0080425的下游miRNA以及靶基因,并通过双荧光素酶报告实验验证分子间的相互结合。此外,通过sponge慢病毒以及质粒转染对目标分子的表达水平进行调控,并采用CCK-8、平板克隆、Transwell和流式细胞术等进行功能学验证。结果Circ_0080425在高糖培养条件下HUVECs中表达上调,且circ_0080425可通过miR-1182/FGF9轴调控高糖条件下HUVECs的增殖、迁移和凋亡(P<0.05)。结论Circ_0080425可通过miR-1182/FGF9轴影响高糖环境下的血管内皮功能。

miR-141靶向FZD4调节Wnt/β-catenin信号通路促进糖尿病肾病的进展

目的探讨miR-141在糖尿病肾病进展中的作用及其潜在机制。方法通过脂质体转染法分别将miR-141、miR-141 mimic、miR-141 sponge转入人肾小球系膜细胞中,高糖培养构建体外模拟糖尿病肾病模型。利用流式分析和ELISA法检测miR-141对细胞凋亡和炎症反应的影响。TargetScan数据库预测miR-141的下游靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验验证两者的结合作用。过表达靶基因FZD4,检测FZD4对miR-141在高糖培养的肾小球系膜细胞中发挥的具体作用。利用Western印迹法检测下游Wnt/β-catenin信号通路及下游靶基因的变化。结果miR-141的上调促进了细胞凋亡以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的表达(P<0.05);miR-141的下调抑制了细胞凋亡以及TNF-α、IL-6的产生(P<0.05)。miR-141负调控FZD4的表达,FZD4的过表达逆转了miR-141对高糖培养肾小球系膜细胞凋亡和炎症因子分泌的促进作用(P<0.05)。敲低miR-141显著促进了Wnt/β-catenin的表达,抑制FZD4则减弱了Wnt/β-catenin的表达(P<0.05)。siβ-catenin可以消除miR-141的干扰及对照高糖培养肾小球系膜细胞凋亡比例和炎症因子分泌的差异(P<0.05)。结论miR-141通过靶向FZD4调控Wnt/β-catenin信号通路,促进糖尿病肾病的进展。