辅助生殖技术多胎妊娠行减胎术对临床结局的影响

目的:评估辅助生殖技术多胎妊娠选择性经阴道减为单胎的安全性和必要性。方法:回顾分析本中心行辅助生殖技术治疗后获得妊娠的患者,其中单胎妊娠2760例,双胎未减胎1258例,三胎未减胎15例,减胎后单胎18例。比较各组的流产率、早产率、剖宫产率、分娩孕周、新生儿出生体重及低体重儿出生率等。结果:减胎后单胎组与多胎未减胎组比较,早产率、剖宫产率及低体重儿出生率降低(P<0.05),分娩孕周延长(P<0.05),新生儿出生体重增加(P<0.05)。单胎妊娠组与减胎后单胎组患者的年龄、流产率、早产率、剖宫产率、分娩孕周、新生儿出生体重及低体重儿出生率等比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:多胎妊娠孕早期实施选择性经阴道减胎术,仅保留一个胎儿,可有效降低母婴早产及剖宫产导致的风险,从而改善临床结局。

联合子宫内膜厚度和类型对体外受精-胚胎移植临床结局的预测

为评估联合子宫内膜厚度和类型对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)临床结局的预测价值,回顾性分析1 933个IVF-ET周期.按照HCG日子宫内膜厚度分3组(组1:≤7 mm;组2:>7 mm到≤14 mm;组3:>14 mm),每组按内膜类型再分为3个亚组(组1(2、3)-A、B、C型),分析各组的妊娠率和着床率.结果显示HCG日内膜厚度是影响妊娠的独立因素;组1和组3的3个亚组妊娠率及着床率无差异;妊娠率和着床率在组2的A、B、C中依次降低,各组比较有显著差异(P<0.05).提示子宫内膜厚度和类型都是影响妊娠结局的独立因素;当内膜<7 mm或>14 mm时,联合内膜厚度和类型更好地预测临床结局;当内膜厚度适中(7～14 mm)且内膜类型有三线征时,将预示很好的临床结局.

不明原因不孕患者精子的精-卵相互作用实验及体外受精临床结局的研究

目的:研究不明原因不孕患者的精子功能,并进一步探讨不明原因不孕患者体外受精(in vitrofertilization,IVF)方式对临床结局的影响。方法:选择2009年7月至2010年1月在中南大学湘雅医院生殖医学中心行IVF治疗的55例患者,根据不孕的原因将患者分为不明原因不孕组(A组)和单纯女方输卵管因素组(B组)。将不明原因不孕组25例患者通过超排卵获取的成熟卵母细胞随机分为2组,分别行常规IVF(A1组)和卵胞质内单精子注射术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)受精(A2组);单纯女方输卵管因素组(B组)采用常规IVF。将2组男方的精子利用废卵分别进行精-卵结合实验和透明带诱发精子顶体反应实验。观察A组与B组平均精卵结合数和透明带诱发精子顶体反应情况,分析透明带诱发精子顶体反应率与受精率的关系。比较不明原因不孕组通过2种方式受精后的受精率、优胚率及妊娠率。结果:A组平均精卵结合数(78.29±16.31)和透明带诱发精子顶体反应率[(55.87±27.69)%]明显低于B组的平均精卵结合数(94.63±6.72)及透明带诱发精子顶体反应率[(82.53±17.99)%],差异具有统计学意义(P<0.01);A1组的受精率(49.32%)明显低于B组(64.42%)和A2组(71.33%),差异具有统计学意义(P<0.01);而A1组的优胚率(44.44%),与A2组(56.86%)及B组的优胚率(53.81%)相比,差异无统计学意义(P>0.05);A2组的受精率及优胚率与B组比较,差异也无统计学意义(P>0.05);A组的妊娠率(36%)与B组(40%)相比,差异无统计学意义(P>0.05);A1组的受精率与透明带诱发精子顶体反应率具有明显的相关性,有统计学意义(r=0.932,P<0.01)。结论:对于不明原因不孕患者,精卵结合及透明带诱发精子顶体反应是有重要意义的精子功能检测实验。不明原因不孕患者的卵子采用half-ICSI,可有效地避免受精完全失败导致的无胚胎移植,从而获得较理想的妊娠结局。

3种子宫内膜准备方案对冻融胚胎移植的临床结局比较

目的通过分析3种子宫内膜准备方案的冻融胚胎移植临床结局情况,探讨如何选择恰当的冻融胚胎移植子宫内膜准备方案。方法对该中心243例冻融胚胎移植周期进行回顾性分析。结果自然周期、激素替代周期和HMG促排卵周期三组冻融胚胎移植患者的年龄、不孕年限、胚胎完整率和优胚率比较,差异均无显著性(P>0.05);3组子宫内膜厚度及其A型内膜百分率比较,差异具有显著性(P<0.05);3组种植率及妊娠率比较,差异无显著性(P>0.05)。结论 3种子宫内膜准备方案各有优缺点,自然周期是冻融胚胎子宫内膜准备最经济有效的首选方案;对于排卵障碍或子宫内膜薄者,激素替代周期及HMG促排卵周期不失为内膜准备的补充措施。临床医生应因人而异选择适宜的子宫内膜准备方案。

微刺激方案与常规促排卵方案在高龄卵巢低反应不育女性中的前后周期比较

目的探讨36岁以上高龄、卵巢低反应（POR）不育患者最适宜的体外受精-胚胎移植（IVF-ET）促排卵方案。方法回顾性分析34例36～45岁POR患者接受IVF-ET助孕治疗的临床结局,根据患者前后促排卵方案的不同分为常规促排卵方案34个周期和灵活微刺激方案34个周期。比较前后两种不同方案患者的临床资料及助孕结局。结果 （1）微刺激周期、常规促排卵周期人绒毛膜促性腺激素（HCG）日的雌二醇（E2）水平、获卵数、MⅡ数、优胚率比较无显著性差异（P〉0.05）;（2）微刺激周期的基础卵泡刺激素（FSH）水平高于常规促排卵周期,窦卵泡数则少于常规促排卵周期,差异均有统计学意义（P〈0.05）;（3）常规促排卵周期的促性腺激素（Gn）天数、Gn总量大于微刺激周期,差异有统计学意义（P〈0.05）;（4）微刺激周期的受精数、可利用胚胎数、优胚数、冻存胚胎数、MⅡ率及正常受精率均高于常规促排卵周期,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论对于高龄POR妇女,微刺激方案与常规促排卵方案相比,可以获得较多的受精数、可利用胚胎数、优胚数和冻存胚胎数,MⅡ率和正常受精率也有提高,且微刺激方式更加温和,既减轻了患者的痛苦,又减少了Gn的用量和医疗费用,提示对于高龄POR不育症患者可能更宜用微刺激促排卵方案。

大鼠薄型子宫内膜模型的建立和鉴定

为探索宫腔注入无水乙醇建立薄型子宫内膜模型的可行性,将25只大鼠分3组:对照组(宫腔注入生理盐水),5分钟组(宫腔注入无水乙醇并贮留5 min),10分钟组(宫腔注入无水乙醇并贮留10 min),经测量子宫内膜变薄者为造模组,5分钟组有14个子宫内膜变薄,10分钟组无一例纳入造模组.免疫组织化学检测角蛋白、波形蛋白、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、雌激素受体α(estrogen related recep-tor alpha,ERα)的表达.结果发现5分钟组造模组与对照组单位内膜面积中角蛋白面积、单位间质面积中波形蛋白面积和子宫内膜中VEGF平均光密度差异有统计学意义(P<0.05),造模组与对照组子宫内膜ERα组织学积分无差异(P>0.05).表明宫腔注入无水乙醇并贮留5 min可以成功建立薄型子宫内膜模型,成功率为70%.

来曲唑促排卵治疗的临床观察

目的观察来曲唑（LE）促排卵治疗的临床疗效.方法符合标准的患者67例服用LE治疗,记录卵泡发育、子宫内膜生长、宫颈黏液性状等指标,并与同期使用克罗米酚（CC）治疗患者进行比较.其中22例CC反应不良患者采用自身对比.结果LE促排卵治疗67个周期中42个周期有优势卵泡发育（62.7%）,35个周期在注射人绒毛膜促性腺激素（hCG）48～60 h内破裂排卵（排卵率83.3%）,卵泡期13.76 d,平均1.07/周期卵泡成熟,10个周期的子宫内膜出现明显的三线征（A型内膜率23.8%）,宫颈黏液平均11.52分,1个周期发生黄素化未破裂卵泡综合征（LUFS）,未出现卵巢过度刺激综合征（OHSS）,2例妊娠（4.76%）.22例CC反应不良患者服用LE后有13例发育出优势卵泡,LUFS和内膜＜7 mm各1例.结论LE有促卵泡生长的作用,并对CC反应不良患者有一定疗效;成熟卵泡破裂排卵率高,对生殖系统及全身的副反应小.

来曲唑与克罗米酚对子宫内膜整合素α_Vβ_3和基质金属蛋白酶组织抑制因子-3表达的影响

目的 比较来曲唑（LE）与克罗米酚（CC）促排卵治疗时对植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和基质金属蛋白酶组织抑制因子-3（TIMP-3）表达的影响。方法 收集2004年3～10月在本中心服用LE或CC促排卵治疗20例患者植入窗期子宫内膜（LE组9例，CC组11例），另取12例自然月经周期的相应时期内膜作为对照。通过免疫组织化学法测定整合素αvβ3和TIMP-3的表达强度。结果 三组子宫内膜整合素αvβ3的表达强度无显著性差异；TIMP-3表达强度CC组高于LE和对照组。结论 LE和CC都不影响植入窗期子宫内膜中整合素αvβ3的表达。CC使TIMP-3的表达信号明显加强。

特发性弱精子症患者精子DNA氧化损伤

目的:探讨特发性弱精子症患者精浆的氧化应激及其精子DNA的氧化损伤。方法:选择2010年12月至2011年3月就诊于中南大学湘雅医院生殖中心门诊的不孕不育夫妇。以28名特发性弱精子症患者为实验组,选取24名精液分析正常且有生育史的男性为对照组,收集新鲜精液。应用鲁米诺化学发光法检测原始精浆活性氧(reactiveoxygen species,ROS)水平;酶联免疫分析法检测精子DNA氧化产物8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)浓度。结果:1)实验组精浆ROS水平增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);两组前向运动精子活动率与精浆ROS水平呈负相关(r=-0.72,P<0.01)。2)实验组精子8-OHdG浓度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);两组前向运动精子活动率与精子8-OHdG浓度也呈负相关(r=-0.73,P<0.01)。3)两组患者精浆ROS水平与精子8-OHdG浓度呈正相关(r=0.77,P<0.01)。结论:特发性弱精子症患者的精子具有DNA氧化损伤,可能与氧化应激有关。过量活性氧产生可能是特发性弱精子症患者精子活力低下的原因之一。

多原核受精与HCG日雌孕激素、获卵数、授精密度、受精率、妊娠率的关系

回顾性分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的686个周期,比较多原核受精组(348例)和非多原核受精组(338例)两组的一般资料、HCG日雌孕激素、获卵数、授精密度及活力、受精率、卵裂率、妊娠率.结果显示两组HCG日雌孕激素、获卵数、成熟卵率、受精率、卵裂率、妊娠率之间有显著差异(P<0.05),授精密度、受精活力之间无差异.表明HCG日雌孕激素较高,获卵数多及未成熟和过熟卵子比例高,预示着发生多原核受精的可能性大,而多原核受精的发生可能有较好的临床结局.

阴道B超结合尿LH试纸测定在不孕妇女卵泡生长及排卵监测中的应用

【目的】阴道B超(TVB)结合尿LH试纸测定预测不孕妇女排卵时间,探讨该方法在不孕症妇女排卵预测中的应用。【方法】阴道B超结合尿LH试纸测定不孕妇女自然月经周期卵泡生长,血、尿LH峰,排卵时间,比较尿LH试纸测定与血LH测定的吻合度及其预测排卵的准确性。【结果】尿LH试纸测定预测排卵的准确率达97.7%,阳性组的卵泡直径、血LH值、较可疑阳性组增加;排卵时间较可疑阳性组提前。【结论】TVB联合尿LH试纸测定对监测卵泡生长及预测排卵时间是一个简单易行、准确可靠的方法。连续的尿LH试纸测定更能动态的反映卵泡生长并准确预测排卵时间。

颗粒细胞氧化应激及凋亡对IVF-ET结局的影响

目的:研究颗粒细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平及凋亡对IVF-ET结局的影响。方法:选取51名首次行IVF-ET的输卵管性因素不孕患者。用GnRH-a长方案超促排卵治疗,密度梯度离心法分离卵泡液中颗粒细胞,硫代巴比妥酸法测定MDA水平,化学发光法测定SOD水平,流式细胞仪法测定凋亡率。结果:妊娠组与未妊娠组相比有较低的MDA水平和凋亡率,较高的优胚率,差异有统计学意义(P<0.05)。MDA与受精率呈中度负相关(r=-0.425,P=0.002),与获卵数、成熟卵子数、卵裂率、优胚率无明显相关关系;SOD与之均无相关关系;凋亡率与获卵数(r=-286,P=0.042)、成熟卵子数(r=-0.330,P=0.020)、优胚率(r=-0.311,P=0.026)呈低度负相关。MDA与SOD呈中度负相关(r=-0.471,P<0.001);与凋亡率呈中度正相关(r=0.475,P<0.001)。结论:氧化应激可能导致卵巢颗粒细胞凋亡,进而影响卵子的发育潜能及IVF-ET的结局。

整合素β_3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的检测整合素β3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达,明确整合素β3表达规律。方法将清洁级性成熟期昆明小鼠44只,雌性24只,雄性20只,雌性小鼠阴道涂片检查为动情前期,在此期注射PMSG和HCG,4只雌鼠不合笼,用颈椎脱臼法处死,剪取子宫组织(孕D0,对照组),直接液氮保存和福尔马林固定保存,其余的雌:雄小鼠1∶1合笼,次日检查阴栓,发现阴栓计为妊娠第1天。分别于妊娠第4、5、6、7和8天用颈椎脱臼法处死,迅速剖腹,剪取子宫组织予以保存(实验组),采用免疫组化方法和Western-blotting技术分析围植入期小鼠子宫内膜中的整合素β3表达规律,采用RT-PCR技术半定量分析围植入期小鼠子宫内膜整合素β3mRNA表达特征。结果小鼠整个围植入期子宫内膜中均有整合素β3表达,但表达的高峰在着床窗口期,即孕D5。孕D0(非孕)子宫内膜的整合素β3表达较弱,孕D4时表达增强,孕D5时表达最强,孕D6时表达突然回落,孕D7、孕D8时表达减弱,降至非孕水平。结论整合素β3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达随着孕龄的增加逐渐增强,但表达的高峰在孕D5,与植入窗的开放相吻合,是子宫内膜接受性的客观标志,提示整合素β3在胚泡着床过程中起重要作用,该研究为阐明胚泡着床机制提供实验依据。

骨桥蛋白(OPN)在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的检测骨桥蛋白在围植入期小鼠子宫内膜中的表达,明确OPN表达规律。方法将清洁级性成熟期昆明小鼠44只,雌性24只,雄性20只,雌性小鼠阴道涂片检查为动情前期,在此期注射PMSG和HCG,4只雌鼠不合笼(孕D0,对照组),用颈椎脱臼法处死,剪取子宫组织,直接液氮保存和福尔马林固定保存,其余的雌:雄小鼠1∶1合笼,次日检查阴栓,发现阴栓计为妊娠第1天。分别于妊娠第4、5、6、7和8天用颈椎脱臼法处死,迅速剖腹,剪取子宫组织予以保存(实验组),采用免疫组化方法和Western-blotting技术分析围植入期小鼠子宫内膜中的骨桥蛋白表达规律,采用RT-PCR技术半定量分析围植入期小鼠子宫内膜骨桥蛋白mRNA表达特征。结果小鼠整个围植入期子宫内膜中均有OPN表达,但表达的高峰在着床窗口期,即孕D5。孕D0(非孕)子宫内膜的OPN表达较弱,孕D4时表达增强,孕D5时表达最强,孕D6时表达突然回落,孕D7、孕D8时表达减弱,降至非孕水平。结论骨桥蛋白在围植入期小鼠子宫内膜中的表达随着孕龄的增加逐渐增强,但表达的高峰在孕D5,与植入窗的开放相吻合,是子宫内膜接受性的客观标志,提示骨桥蛋白在胚泡着床过程中起重要作用,该研究为阐明胚泡着床机制提供了实验依据。

卵母细胞mtDNA4977bp缺失在卵巢储备功能下降中的研究

目的检测卵巢储备功能下降患者卵母细胞线粒体DNA(mtDNA)4977 bp缺失,探讨其对卵巢储备功能下降患者生育潜能的可能影响。方法选取湘雅医院生殖中心2008年3～9月行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不育患者80例,按卵巢储备功能状态分为卵巢储备功能下降(DOR)和卵巢储备功能正常(NOR)两组,胚胎移植日收集两组患者成熟未受精MII卵母细胞110枚,DOR组46枚,NOR组64枚。采用聚合酶链反应(PCR)定性检测mtDNA 4977 bp缺失,比较两组患者卵母细胞mtDNA 4977 bp缺失率。结果 DOR组与NOR组比较,卵母细胞具有较高的mtDNA 4977 bp缺失率(48.8%vs 18.8%,P<0.05),两者比较差异有显著性。Logistic回归分析显示,患者年龄对两组患者mtDNA4977 bp的检测结果无影响。结论 DOR患者卵母细胞mtDNA4977 bp缺失率增高,可能与其卵母细胞发育潜能下降相关。

胚胎着床机制的研究进展

胚胎着床是子宫内膜接受胚胎植入的过程。胚胎植入需要经过定位、黏附、侵入3个过程以实现继续妊娠。成功的植入需要同步发育的正常胚胎、容受性的内膜及胚胎和母体不断进行相互对话来实现。目前研究发现很多调节胚胎着床的重要分子和基因,但仍有很多物质及其功能是不完全了解的,并不断有新的在胚胎种植过程中起重要作用的分子和基因或者已知分子和基因的新功能被发现。胚胎着床机制的研究对于不孕症的诊断和治疗具有重要意义。

抗骨桥蛋白(OPN)和整合素β3抗体中和OPN、整合素β3对小鼠胚泡种植的影响

目的研究骨桥蛋白抗体和整合素β3抗体对小鼠胚泡着床的影响。方法取20只孕4d小鼠,分别在两侧子宫角内注射骨桥蛋白抗体、整合素β3抗体,对照组注射生理盐水,正常妊娠空白对照组未行任何处理,于孕8d处死小鼠,统计胚泡着床数及妊娠率,取子宫观察内膜的组织学变化。结果结果显示骨桥蛋白抗体组小鼠妊娠率为60%,平均胚胎着床数为1.6±1.19,整合素β3抗体组妊娠率为70%,平均胚胎着床数为1.7±1.28,明显低于生理盐水组及空白对照组(90%,10.0±1.63及100%,10.5±1.58),提示骨桥蛋白抗体和整合素β3抗体明显抑制小鼠胚泡着床。结论骨桥蛋白和整合素β3抗体明显抑制小鼠胚泡的着床并导致子宫内膜的形态学变化,这提示骨桥蛋白和整合素β3与子宫内膜容受性获得有关。骨桥蛋白和整合素β3参与了小鼠胚泡的着床。

性交后试验在预测生育力的临床意义

【目的】通过性交后试验（PCT），来预测生育力。【方法】回顾分析本院生殖中心2004年1～12月对96例不孕妇女进行性交后试验的结果。【结果】1年后按有无妊娠分成妊娠组与非妊娠组，两组宫颈粘液评分差异无显著性（P〉0．05）但妊娠组PCT阳性率71．4％明显高于非妊娠组。【结论】PCT是有价值的预测生育力的指标，PCT正常可排除男方精子成活率和穿透力等相关因素及宫颈性不孕。PCT异常则可选择人工授精或作进一部检查以提高妊娠率。

男方少、弱精子症行宫腔内人工授精和指导性生活治疗不孕症临床分析

【目的】比较分析男方少、弱精子症行宫腔内人工授精(IUI)和指导性生活的临床效果,以期更好地提高妊娠率。【方法】回顾性分析本院不孕症门诊病人,采用自然周期或促排卵周期,用阴道B超监测卵泡发育结合尿LH峰于卵泡成熟时或排卵24h内行宫腔内人工授精或指导性生活。【结果】宫腔内人工授精(IUI)146周期,临床妊娠34例,临床妊娠率23.29%,指导性生活150周期,临床妊娠18例,临床妊娠率12%。【结论】宫腔内人工授精是治疗男方少、弱精症的较好的有效方法。

半定量LH试纸测定排卵时间联合移植导管行宫腔内人工授精的探讨

【目的】探讨半定量LH试纸测定排卵时间联合移植导管行宫腔内人工授精对其结果的影响。【方法】将本院2005年1～12月拟行人工授精的不孕症患者196例238个周期随机分成两组，研究组采用半定量LH试纸结合B超监测排卵及移植导管将精子注入宫腔，与传统对照组比较两组妊娠率。【结果】经过对其方法的改进后行宫腔内人工授精118周期，临床妊娠28周期，临床妊娠率23．7％，传统方法行官腔内人工授精120周期，临床妊娠16周期，临床妊娠率13．3％，两者临床妊娠率差异有显著性。【结论】半定量I。H试纸测定排卵时间联合移植导管行宫腔内人工授精有利于妊娠率的提高。