lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为

目的:探讨lncRNA XIST通过miR-32-5p/果蝇Zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog2,EZH2)分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为。方法:收集2014年7月至2018年8月中南大学湘雅医院直肠肛门外科资料完整的结直肠癌患者28例癌组织和配对的癌旁组织标本,采用qPCR检测结直肠癌组织及细胞系中lncRNA XIST和miR-32-5p的表达水平,双荧光素酶报告基因验证1ncRNA XIST、miR-32-5p和EZH2的靶向关系,并进一步通过WB检测EZH2的表达水平。CCK-8、Transwell及Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测HCT-8细胞增殖、迁移及凋亡情况。结果:lncRNA XIST在结直肠癌组织及细胞系中高表达,且在HCT-8细胞中表达最高(P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因证实,lncRNA XIST靶向负调控miR-32-5p(P<0.05),且EZH2是miR-32-5p的靶基因。敲降1ncRNA XIST抑制HCT-8细胞增殖和迁移并诱导其凋亡(P<0.05或P<0.01);进一步实验证明,敲降lncRNA XIST上调miR-32-5p的表达水平,从而下调EZH2表达水平,进而抑制HCT-8细胞增殖和迁移并诱导其凋亡。结论:lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴促进HCT-8细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡。

腹腔镜下改良Parks术治疗超低位直肠癌的临床疗效

目的:探讨腹腔镜下改良Parks术在超低位直肠癌中的临床疗效。方法:依据患者术前分期及术中吻合口位置,对98例T2期以上超低位直肠癌患者分别行腹腔镜下超低位Dixon术、改良Parks术和Miles术,并将患者分为Dixon组(39例)、改良Parks组(43例)、Miles组(16例)。收集所有患者的临床资料及术后随访结果,并对其进行对比分析,评估腹腔镜下改良Parks术的临床疗效。结果:与Dixon组相比,改良Parks组患者更加肥胖、肿瘤距肛缘距离更近、手术时间更长(均P<0.05);两组患者在手术出血量、淋巴结检出数、术后并发症方面差异均无统计学意义(均P>0.05);而且改良Parks组患者的术后排气排便时间和住院时间更短、住院总费用也更低(均P<0.05)。虽然改良Parks组患者术后早期的肛门功能较差,但随着规律的肛门功能锻炼,从术后6个月开始达到与Dixon组相近的水平(P>0.05)。与Miles组相比,改良Parks组患者在肿块大小、体型、肿瘤距肛缘距离、手术时间、手术出血量、淋巴结检出数目、术后排气排便时间方面差异均无统计学意义(均P>0.05),但改良Parks组住院时间更短、并发症发生率更低、住院总费用也更低(均P<0.05)。结论:腹腔镜下改良Parks术是一种安全、经济、有效的保肛术式,不但可以为一部分原本只能行Miles术的患者保住肛门,而且术后患者恢复得更好、更快,虽然早期肛门功能较差,但可逐渐恢复至与Dixon术相当的水平。

生理盐水水注法引出腔内心电图在PICC带管入院患者导管尖端位置判断中的应用

目的探讨采用盐水水注法引出腔内心电图对带PICC导管入院患者导管尖端位置的判断。方法选取2017年8—12月中南大学湘雅医院结肠肛门外科131例带PICC导管入院患者作为研究对象,采用盐水水注法引出腔内心电图通过观察P波有无变化及变化情况来判断导管尖端有无发生移位,同时行常规X线定位。结果采用盐水水注法引出腔内心电图定位正确122例,移位9例;X线定位尖端位置正确122例,移位9例,2种定位方法比较差异无统计学意义(P>0.05)。采用盐水水注法耗时和费用显著低于X线定位法,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论对带PICC导管入院患者采用盐水水注法引出腔内心电图能准确判断导管尖端位置有无发生移位,操作简单,安全;同时有利于缩短患者定位检查时间,减轻其经济负担及放射暴露,值得临床推广及运用。

品管圈在降低PICC置管导管尖端异位的发生率中的应用——以完全胃肠外营养PICC置管为例

目的探讨品管圈活动在降低PICC置管导管尖端异位发生率中的应用效果。方法成立多学科合作的品管圈活动小组,按照品管圈的活动步骤开展本次活动,全体圈员发挥头脑风暴并利用鱼骨图、要因评价表和真因查检表,确定导致PICC置管导管尖端异位率高的真因,针对真因拟定对策并实施,比较品管圈活动前后PICC置管导管尖端异位的发生率。结果实施品管圈活动后,PICC置管导管尖端异位的发生率由活动前的38.1%降到活动后的13.04%,目标达成率为104.46%。结论开展品管圈活动可降低PICC置管导管尖端异位的发生率,提高患者对PICC置管的信任度及满意度。

SOCS1调控JAK/STAT通路传导抑制肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的机制研究

目的探讨SOCS1在肝癌进展过程中的功能及其分子机制。方法采用qRT-PCR和Western bolt检测人正常肝细胞和肝癌细胞系中SOCS1的表达。构建SOCS1过表达及干扰表达载体,转染肝癌细胞,MTT检测肝癌细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,transwell实验检测细胞侵袭性变化。qRT-PCR检测JAK2、STAT3 mRNA水平;Western bolt检测JAK2、STAT3蛋白和磷酸化水平。通过SOCS1 siRNA和JAK/STAT通路抑制剂氯硝柳胺共处理肝癌细胞,观察肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的变化。结果SOCS1在肝癌细胞系中显著低表达,SOCS1过表达后肝癌细胞增殖活性显著下调,细胞迁移能力显著下降,1/2划痕愈合时间增长,细胞侵袭能力显著下降,而SOCS1干扰表达则促进细胞增殖、迁移和侵袭。SOCS1表达变化不影响JAK2、STAT3 mRNA和蛋白表达水平,但SOCS1过表达抑制JAK2、STAT3磷酸化,SOCS1干扰表达则增强JAK2、STAT3磷酸化水平。JAK/STAT通路抑制剂氯硝柳胺能够明显恢复SOCS1干扰表达对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭性的影响。结论SOCS1通过调控JAK/STAT信号通路活性,进而抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。

粘连性肠梗阻手术干预的危险因素分析

目的分析粘连性肠梗阻患者手术相关的危险因素,建立模型预测患者手术风险并评估该模型的有效性。方法回顾性分析2014～2017年湖南省人民医院普外科诊断为粘连性肠梗阻患者的临床资料,将患者按不同诊断时间分为预测组和验证组,比较预测组中保守治疗与手术治疗患者的临床资料差异,筛选出有统计学意义指标进行一般Logistic回归分析,根据b值建立预测模型,模型用于验证组患者,计算敏感性、特异性以评价模型有效性。结果保守组和手术组患者平均年龄、腹水比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析提示年龄≥65岁和存在腹水为是否手术的影响因素(P<0.05)。高危组患者的特异性为96%,低危组患者的敏感性为100%。结论该风险预测模型能对保守治疗粘连性肠梗阻患者进行手术风险分层,为是否进一步手术干预提供指导。

院外延续强化教育降低肠造口患者造口周围粪水性皮炎发生率分析

目的:分析院外延续强化教育降低肠造口患者造口周围粪水性皮炎发生率。方法:2018年6-12月收治肠造口患者80例,随机分为两组,各40例。强化教育组院外延续强化教育;普通教育组院外延续普通教育组。分析两组肠造口相关知识掌握情况、造口周围粪水性皮炎发生情况、适应水平、生活质量。结果:强化教育组延续复诊、造口袋更换技巧、并发症处理、合理饮食掌握率均高于普通教育组,差异有统计学意义(P<0.05);强化教育组造口周围粪水性皮炎发生率低于普通教育组,差异有统计学意义(P<0.05);强化教育组担忧、接受、生活态度积极评分及QAS-20总分均高于普通教育组,差异有统计学意义(P<0.05);强化教育组物质生活、躯体功能、心理功能、社会功能评分均高于普通教育组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:院外延续强化教育较普通教育更能有效降造口周围粪水性皮炎发生率,值得在临床推广应用。

肝X受体α与蛋白酶体激活因子28γ在胃癌中的表达及其对胃癌细胞生长的影响

目的:探讨肝X受体α(LXRα)与蛋白酶体激活因子28γ(PA28γ)在胃癌中的表达以及两者对胃癌细胞生长的影响。方法:用qRT-PCR和免疫组织化学方法检测LXRα与PA28γ的mRNA与蛋白在35例胃癌和癌旁组织中的表达,分析LXRα与PA28γ蛋白表达与患者临床病理因素的关系以及两者的相关性。分别用流式细胞术、qRT-PCR、Westernblot检测过表达LXRα对胃癌AGS细胞的细胞周期、裸鼠体内生长以及细胞中LXRα对PA28γ表达的变化。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中LXRα的mRNA与蛋白表达明显降低,而PA28γ的mRNA与蛋白表达明显升高(均P<0.05);两者蛋白的表达与胃癌患者主要临床病理因素均无明显关系(均P>0.05);LXRα与PA28γ蛋白表达在胃癌组织中呈明显负相关(r=-0.452,P=0.006)。过表达LXRα后,AGS细胞的LXRα的mRNA表达明显升高,而PA28γ的mRNA与蛋白表达明显降低;细胞周期进程受到明显阻滞;在裸鼠体内的生长明显抑制,且移植瘤组织中的LXRα的mRNA与蛋白表达明显上调、PA28γ的mRNA与蛋白表达明显下调(均P<0.05)。结论:LXRα在胃癌中表达下调,同时伴随PA28γ表达上调,两者之间的消长可能通过影响细胞周期进程而调节胃癌细胞的生长。

肝X受体激动剂GW3965对人结肠癌细胞奥沙利铂耐药的逆转作用及机制

目的:探讨肝X受体(LXR)激动剂GW3965对人结肠癌细胞奥沙利铂(OXA)耐药的逆转作用及机制。方法:用OXA药物浓度持续递增法诱导人结肠癌HCT116细胞构建OXA耐药的人结肠癌HCT116/L-OHP细胞,比较HCT116/L-OHP细胞与其亲本HCT116细胞的生长情况,以及对不同浓度OXA作用的反应情况;检测HCT116/L-OHP细胞经GW3965处理48 h后OXA耐药性及自噬相关蛋白ATG-5、Beclin-1、p62、LC3的表达的变化。结果:成功构建人结肠癌耐OXA细胞HCT116/L-OHP,表现为HCT116/L-OHP细胞与亲本HCT116细胞比较,增殖能力有所减弱,但对OXA的耐药性明显增强(IC_(50):244.99μmol/L vs.10.05μmol/L,P<0.05),其耐药指数(RI)为24.45。不同浓度(10、20、30μmol/L)GW3965作用后,HCT116/L-OHP细胞对OXA的IC_(50)、RI均明显降低(均P<0.05),且呈浓度依赖性(IC_(50):199.49、114.71、87.32μmol/L;RI:19.89、11.40、8.69),3个浓度的逆转倍数分别为1.23、2.15、2.82;ATG-5、Beclin-1蛋白的表达明显降低,而p62、LC3-II蛋白的表达明显升高(均P<0.05),且均呈浓度依赖性。结论:LXR激动剂GW3965可逆转人结肠癌细胞对OXA的耐药,其机制可能与调节自噬相关蛋白表达水平有关。