丹参联合小剂量泼尼松龙对口腔黏膜下纤维性变相关miRNA表达的改变

目的:探讨与分析丹参联合小剂量泼尼松龙对口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibrosis,OSF)相关miRNA表达的改变。方法:选取临床上具有典型中、晚期病理特征的OSF组织及正常口腔颊黏膜配对组织各10对。对正常和病变组织行昂飞miRNA芯片筛查,发现与OSF相关的miRNA表达谱。从正常口腔黏膜组织获得原代成纤维细胞,以槟榔碱(50μg/mL)诱导培养3,6,12 d后(以0 d为对照),检测差异miRNA的表达。原代培养OSF的成纤维细胞,经丹参(90 mg/mL)联合小剂量泼尼松共培养12,24,36 h后(以0 h为对照),检测差异miRNA的表达。结果:槟榔碱能诱导正常口腔黏膜成纤维细胞中miRNA的表达改变,而丹参联合小剂量泼尼松龙能逆转OSF成纤维细胞中相关miRNA的表达。结论:临床组织验证提示差异miRNA在OSF的发生、发展中发挥作用,丹参联合小剂量泼尼松龙能逆转相关miRNA的表达。

基于加权基因共表达网络分析的口腔黏膜下纤维化与其他器官纤维化的比较分子分析

目的:目前尚无成熟且经济的动物模型模拟口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis,OSF),这是制约OSF的机制和药物研究的主要障碍之一。本研究参考泛癌分析的底层逻辑,从分子、信号通路、生物学过程等方面对OSF及其他4种器官纤维化进行系统比较,这有利于学者们发现不同器官纤维化基因组之间的异同,寻找到某些普遍规律,也为OSF的研究提供新思路。方法:从基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)网站下载GSE64216、GSE76882、GSE171294、GSE92592和GSE90051数据集的芯片数据。用“Limma”软件包检测各类型纤维化的差异表达mRNAs(differentially expressed mRNAs,DEmRNAs)。采用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)鉴定各类型纤维化相关模块。通过功能富集和通路富集分析各纤维化相关模块基因的异同。结果:OSF、肾间质纤维化(kidney intestinal fibrosis,KIF)、肝纤维化(liver fibrosis,LF)、特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)、皮肤纤维化(skin fibrosis,SF)中分别检测到6057、10910、27990、10480和4801个DEmRNAs。通过WGCNA对各器官纤维化相关模块进行识别,分别构建各类型纤维化的共表达网络。除了KIF和LF有5个共同的hub基因外,其他纤维化疾病之间没有共同的hub基因。OSF、KIF、LF、IPF和SF的共同通路主要集中于免疫相关通路。结论:OSF和其他4种器官纤维化在分子水平上具有组织和器官特异性,但它们有许多共同的信号通路和生物学过程,主要是在炎症和免疫方面。

微小RNA-203对Ⅳ型胶原蛋白α4链基因的靶向调控及其在口腔黏膜下纤维化中的作用

目的 构建微小RNA-203（microRNA-203,miR-203）表达质粒和Ⅳ型胶原蛋白α4链（collagen typeⅣalpha 4,COL4A4） 3＇UTR荧光素酶报告基因,探究miR-203对COL4A4的靶向调控作用及其在口腔黏膜下纤维化（oral submucous fibrosis,OSF）中的作用.方法 通过生物信息学软件对miR-203可能调控的靶基因进行预测,结合其生物学功能,筛选出miR-203可能的靶基因COL4A4.收集2016年1至4月在中南大学湘雅口腔医院黏膜科就诊、具有典型病理特征、未经治疗、不伴其他口腔疾病的9例OSF患者颊黏膜组织（OSF组）及其配对的正常组织（对照组）,应用蛋白质印迹法检测两组标本中COL4A4的表达,实时定量聚合酶链反应法检测miR-203的相对表达量.通过生物信息学软件（http：//www.targetscan.org/）寻找COL4A4基因3UTR与miR-203之间的作用位点.将COL4A4基因3 UTR包括miR-203结合位点、上下游部分侧翼序列以及酶切位点在内共60 bp片段分别克隆入哺乳动物细胞miRNA表达报告载体（pMIR-REPORT Luciferase）荧光素酶报告基因载体,将其分别与β-半乳糖苷酶表达质粒及miR-203表达载体共转染293T细胞,24 h后检测报告基因活性.结果 COL4A4的相对表达水平OSF组（2.46±2.26）显著高于对照组（0.70±0.49）（P＜0.05）;miR-203的相对表达水平（2-△△CT） OSF组（2.57±2.09）显著低于对照组（154.07±191.11）（P＜0.01）.生物信息预测显示,COL4A4基因3＇UTR与miR-203之间有一物种间保守作用位点（位点1）,3个非保守作用位点（位点2,3,4）;miR-203能明显抑制位点1介导的报告基因活性,能部分抑制位点2与位点4介导的报告基因活性,而对位点3介导的报告基因活性无显著影响.结论 在OSF组织中,miR-203与COL4A4的蛋白表达呈负相关,miR-203靶向结合COL4A4基因3＇UTR,抑制COL4A4蛋白表达.

颌骨骨肉瘤的临床诊断和治疗进展

颌骨骨肉瘤(JOS)是骨肉瘤中较罕见的一种类型,具有独特的致病机制和临床病理表现,临床常需结合放射学检查和病理学检查综合诊断。目前,JOS的常规疗法是以手术为主、放疗和化疗为辅的综合治疗。近年,免疫疗法、基因疗法、光疗法、中药疗法等新型疗法的出现,为JOS治疗提供了更多元的选择。本文主要针对JOS的诊断和最新治疗进展进行综述,以期为JOS患者的个体化治疗提供新思路。