拟胚体法诱导人胚胎干细胞神经分化的研究

目的研究胚胎干细胞（human embryonic stem cells,HESC）向神经祖细胞分化时,拟胚体（embryoidbody,EB）大小和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）对诱导效率的作用。方法采用人胚胎干细胞形成的EB,按照其直径大小分为3组,拟胚体阶段添加或不添加bFGF分组,检测各组的贴壁效率和神经诱导效率。结果直径350~251μm的EB组和EB阶段未添加bFGF组的贴壁率与神经诱导效率高于其他组EB。结论优化EB大小和培养基成分可促进EB的神经诱导分化。

层黏连蛋白和Matrigel对人胚胎干细胞源性神经上皮祖细胞向神经分化的影响

目的比较层黏连蛋白和Matrigel在人胚胎干细胞源性神经上皮祖细胞向神经细胞分化过程中的作用。方法人胚胎干细胞诱导分化的神经上皮祖细胞,比较其在层黏连蛋白和Matrigel处理的培养皿上贴壁增殖能力,免疫荧光染色检测神经上皮祖细胞标记Nestin和Musashi,神经元标记Tuj1和星型胶质细胞标记GFAP。结果神经上皮祖细胞在2种细胞外基质上贴壁率相近,但层黏连蛋白组的神经突起形成率和Tuj1阳性细胞比例分别为(97±2)%和(75±5)%,明显高于Matrigel组的(89±3)%和(50±5)%(P<0.05)。结论层黏连蛋白是神经上皮祖细胞向神经元分化的重要细胞外基质。