钴的神经毒性及耳毒性

钴是参与维生素B12合成和许多生命活动中必不可少的微量元素,然而一旦机体细胞内的钴离子含量因职业暴露或因饮食摄取钴过量或因钴合金人工假体内源性释放超过安全标准,则可导致严重的金属沉着疾病,这种金属沉着病的症状主要包括感音神经性耳聋、神经性耳鸣、视觉缺陷、认知缺陷、心肌病、心衰、甲状腺疾病、皮肤感觉异常等,在上述病症中,感音神经性耳聋和视神经萎缩是最明显的钴中毒症状。钴中毒引起的细胞损害机制主要涉及细胞的氧化应激和缺氧性损害以及线粒体损害引起的细胞凋亡。因此,钴中毒引起的细胞损害模型尤其适用于听觉系统和视觉系统以及神经系统中因细胞内氧化/抗氧化失衡和细胞缺氧以及线粒体凋亡通路等方面的医学实验研究。

内耳病理学研究技术的进展

内耳病理学是一门从组织形态学角度研究内耳疾病的发生原因和发展过程及其损害机制的边缘医学基础学科。内耳病理学的样品制备观察技术包括颞骨切片技术、膜迷路切片技术、耳蜗和前庭膜迷路取材铺片技术、内耳组织学和组织化学技术、内耳扫描电镜和透射电镜样品制备技术、以及电镜下的超微细胞化学技术等。通过分析各项内耳病理研究技术的发生、发展和现状,并结合实践经验和技术革新经验,深入讨论上述各项技术的优缺点和技术细节。

百草枯的全身毒性及特异性耳毒性作用

百草枯是目前全球使用最广泛的除草剂之一,其对哺乳类生物体的毒性机制主要是在细胞内通过反复氧化还原反应而产生大量的过氧化物阴离子并引发脂质过氧化、线粒体损伤、DNA损害、蛋白质破坏,最终导致细胞凋亡等级联反应造成全身多器官的不可逆性损害。百草枯在急性中毒过程往往在肺泡细胞首先表现出特殊的高浓度聚集,这可能是因为百草枯与多胺的化学结构相似,而肺的Clara细胞和肺泡I型及II型上皮细胞具备较强的多胺转运系统,因此百草枯首先积聚在肺的Clara细胞和肺泡I型及II型细胞。百草枯还可穿越血脑屏障并通过多巴胺转运系统在多巴胺神经元中积累并首先造成多巴胺神经元的破坏,因此,百草枯慢性中毒可能与帕金森病的发病机制也具有一定的关系。各种耳毒性药物和强噪声以及重金属和老年性耳聋引起的内耳损伤都与氧自由基的损害作用密切相关,百草枯对细胞的氧化损伤作用使之成为研究内耳自由基损害和抗氧化剂保护效应的理想研究模型之一。百草枯引起的实验动物听觉障碍表现出高频听力首先受损的特点,百草枯引起的耳蜗毛细胞损害则首先发生在耳蜗底回对应高频听觉反应的区域。在百草枯引起的受损耳蜗细胞内,过氧化物阴离子首先在细胞质中的表达增强,随后凝聚到细胞核内,说明耳蜗细胞的损害确实是因为细胞内首先发生的氧化应激所引起,而这种自由基损害最终启动了细胞的自毁装置而导致了细胞的凋亡。我们在最近的实验研究中发现,百草枯对耳蜗细胞的损害首先是发生在耳蜗毛细胞底部和周围的支持细胞,由于这些支持细胞的破坏造成耳蜗Corti器的支持结构塌陷,从而使耳蜗毛细胞因失去周围细胞的连接和支持而发生排列散乱和位置漂移,这种因失去细胞之间的联系而发生的毛细胞"失巢凋亡"可能也是造成毛细胞破坏的重要机制之一。因此,百草枯引发的毛细胞凋亡不仅与细胞内发生的各种自由基损害有关,而且因丧失与周围支持细胞相联系的外基质而引发"失巢凋亡",显然这是一个值得思考的更重要的可能性损害机制。

听神经病实验动物模型

听神经病的临床听力学特征主要表现在具有正常的耳蜗感受器电位和异常的听性脑干反应波形以及对语言的理解障碍,其病理学改变部位被确定是在周边听觉系统,主要表现在内毛细胞缺损、听神经末梢破坏、听神经纤维脱髓鞘病变、螺旋神经节细胞缺损,或上述一个或几个部位同时发生病变。本文介绍了模拟听神经病的各种实验动物模型,其中包括模拟单纯内毛细胞缺损的Slc19a2基因缺陷小鼠和Ggt1基因缺陷小鼠实验模型;模拟单纯Ⅰ型传入神经末梢损害的谷氨酸盐实验模型;模拟单纯脱髓鞘病变的甘油实验模型;模拟Ⅰ型螺旋神经节及其神经纤维损害的乌苯酐实验模型和免疫性疾病损害模型;模拟单纯神经纤维脱髓鞘病变的胆红素实验模型和髓鞘缺陷仓鼠模型;模拟单纯听神经近端脱髓鞘病变的阿霉素模型和压力夹伤听神经实验模型;以及模拟整个周边听觉系统全程病变的卡铂南美栗鼠实验模型。这些实验模型可以分别用于模拟听神经病的一种或几种临床表现及病变特征的实验研究。

多次5-ALA介导光动力下存活鼻咽癌细胞的生物学行为分析

目的评价多次5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)介导光动力下(5-ALA-PDTs)存活鼻咽癌(NPC)细胞亚株CNE2和5-8F的生物学行为。方法采用半数致死剂量(LD50)对细胞亚株CNE2和5-8F间断进行3次PDT处理,收集存活细胞传代扩增,然后分别评价细胞增殖、黏附、迁移能力和血管生成素1、2(Ang-1,Ang-2)表达的变化。结果多次5-ALA-PDTs后存活的CNE2和5-8F在增殖、粘附、迁移能力上均有下降,Ang-1和Ang-2表达下调(P<0.05)。结论多次5-ALA-PDTs可使存活NPC细胞的恶性生物学行为稳定下降,具有减少淋巴转移的潜在价值。