骨形态发生蛋白2／4在神经系统中的作用及其研究进展

骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)属于转化生长因子-β(transforming growth factorβ,TGF-β)超家族,在心、神经、软骨的发育以及出生后骨的形成等发育过程中均起重要的调节作用。近年来的研究表明:在各类BMPs分子中,BMP2/4参与并促进了发育期和成熟期的中枢神经系统内神经元与胶质细胞的发育与激活,且在特定的环境中发挥不同甚至相反的生物学作用,这种差异性为其临床应用带来了一定的风险。

腺苷A1受体激动剂预处理兔延迟相心肌蛋白质组学分析

目的:研究腺苷A1受体激动剂2-氯环戊腺苷(2-chloro-N6-cyclopentyladenosine,CCPA)预处理延迟相缺血再灌注心肌保护的蛋白质表达谱的变化。方法:8只新西兰大白兔随机分为CCPA预处理组(CC-PA组)和生理盐水预处理组(NS组)。CCPA组用100μg/kg CCPA预处理大白兔,NS组用生理盐水预处理。24 h后冠状动脉左前降支行30 min缺血/2 h再灌注,然后取左心室缺血区心肌组织进行蛋白质组学研究。另取12只新西兰大白兔随机分为假手术组(Sham组)、生理盐水预处理组(NS组)和CCPA预处理组(CCPA组),每组4只,用Western印迹验证差异蛋白αB-晶状体蛋白的表达。结果:双向凝胶电泳分析发现2组表达明显差异的蛋白点有55个。其中17个差异蛋白质点用基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱技术以及Mas-cot和Expasy软件分析,初步鉴定出17个蛋白质。这些蛋白质包括应激反应蛋白、代谢相关蛋白、信号调节蛋白、离子通道蛋白、免疫相关蛋白等。Western印迹证实αB-晶状体蛋白在CCPA组中的表达明显上调。结论:CCPA预处理延迟相缺血再灌注心肌组织的蛋白质表达谱发生改变,这些蛋白质可能与腺苷A1受体激动剂预处理延迟相缺血再灌注心肌保护作用有关。

少突胶质前体细胞分离培养方法及其谱系限定细胞体外分化模型建立的改进

目的:对少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的分离、培养及传代方法进行改良,探讨体外条件下OPCs的增殖与分化特性。方法:取新生SD大鼠脊髓来源的细胞分离、纯化OPCs行原代培养,用含碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)和血小板源性生长因子-aa(platelet-derived growth factor-aa,PDGF-aa)的培养液作扩增培养,MTT法检测OPCs的增殖能力;三碘甲腺原氨酸和睫状神经生长因子诱导OPCs分化,最终分化为成熟的少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs),并对分化细胞行形态学及免疫化学染色法鉴定。结果:95%以上的细胞具有双极或三极突起的典型OPCs形态并表达A2B5;MTT法检测显示OPCs在体外保持良好的增殖能力;细胞最终诱导分化为成熟的OLs并表达髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)。结论:OPCs在体外条件下可继续保持良好的增殖生长及定向分化能力。

医疗安全之“墨菲定律”和“海恩法则”

医疗安全既是医学专业问题,也是人文社会问题。保证医疗安全,避免医疗意外、差错、事故的发生,是医务工作者的主要职责和面临的重大课题。"墨菲定律"和"海恩法则"是安全产生领域的重要安全法则,它揭示了事故发生的偶然性与必然性。本文结合"墨菲定律"和"海恩法则"探讨医疗安全问题,认为医疗安全问题是无法避免的,但又是可以预防的,这一看似矛盾的命题,给我们深深的思索和无穷的启迪。

多巴胺D1受体RNA干扰载体的构建及其沉默效应鉴定

目的:构建多巴胺D1受体(DRD1)表达干扰载体,为研究DRD1在神经细胞中的作用及抗惊厥药物打下基础。方法:根据GenBank中DRD1基因序列,设计10个干扰序列并构建DRD1干扰载体。对NG-108-15进行脂质体转染后,GFP标记检测转染效果。Real-time PCR和Western印迹检测NG-108-15中DRD1的表达量。结果:构建的10个干扰载体均能采用脂质体法转染到NG-108-15细胞中。转染后NG-108-15中DRD1 mRNA和蛋白的表达均明显下降。其中转染pGPU6-GFP-Neo-si-DRD1-5载体的NG-108-15中DRD1 mRNA表达水平最低,而转染pGPU6-GFP-Neo-si-DRD1-1,-2,-6,-7载体的NG-108-15中DRD1蛋白表达水平最低。结论:成功构建了DRD1表达干扰载体。