骨形态发生蛋白2／4在神经系统中的作用及其研究进展

骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)属于转化生长因子-β(transforming growth factorβ,TGF-β)超家族,在心、神经、软骨的发育以及出生后骨的形成等发育过程中均起重要的调节作用。近年来的研究表明:在各类BMPs分子中,BMP2/4参与并促进了发育期和成熟期的中枢神经系统内神经元与胶质细胞的发育与激活,且在特定的环境中发挥不同甚至相反的生物学作用,这种差异性为其临床应用带来了一定的风险。

右美托咪定和舒芬太尼硬膜外给药对硬膜外罗哌卡因麻醉效果的影响

目的:比较右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)和舒芬太尼硬膜外给药对罗哌卡因阻滞效果的影响。方法选取择期在硬膜外阻滞下行下肢手术、ASAⅠ~Ⅱ患者120例,按随机数字表法分为硬膜外予以罗哌卡因+生理盐水组、罗哌卡因+舒芬太尼组、罗哌卡因+右美托咪定组。观察各组在予以局麻药物前后的血流动力学变化情况、感觉阻滞起效时间、感觉阻滞最高平面、感觉阻滞持续时间、完全运动阻滞时间及恶心、呕吐、瘙痒等不良反应发生情况。结果右美托咪定组感觉阻滞起效时间、完全运动阻滞时间短于其余两组,差异具有统计学意义(t=4.25、4.59、4.32、3.82、3.79、4.23,P<0.05);感觉阻滞持续时间高于其余两组,差异具有统计学意义(t=6.24、5.78,P<0.05);各组血流动力学变化情况与各种不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论硬膜外予以右美托咪定较之舒芬太尼,可以有效地增强罗哌卡因硬膜外阻滞效果,且不增加不良反应的发生率。

自噬通过PPAR-γ介导肢体远隔缺血预适应减少肝缺血再灌注损伤（英文）

目的:探讨肢体远程缺血预处理(remote ischemic preconditioning,RIPC)对肝脏缺血/再灌注损伤的影响及其机制。方法:对大鼠进行局部的肝组织缺血再灌注(缺血60 min后再灌注24 h),缺血前30 min通过3个循环的双侧股动脉闭塞10 min和再灌注10 min来实现RIPC。在RIPC之前,用PPAR-γ抑制剂T0070907处理部分大鼠。结果:在再灌注结束时,局部缺血后肝损伤显著增加Suzike的损伤评分和AST及ALT释放,并伴随有氧化应激和炎症反应增加。RIPC能够改善肝脏缺血/再灌注后的肝功能,减少肝组织病理损伤,与PPAR-γ活化和自噬体增多相关。PPAR-γ抑制剂T0070907显著减少自噬体形成,抑制RIPC对肝脏缺血/再灌注损伤的保护作用。结论:肢体远程缺血预处理是通过活化的PPAR-γ激活肝脏自噬,从而对肝脏起保护作用。

microRNAs在脓毒症引起的炎症反应中的调控机制

近年来脓毒症的发病率及病死率逐渐增高,成为临床上危重患者最常见的并发症及主要死亡原因,为全球各国医疗保健体系中最昂贵支出的病种之一。因此,人们开始越来越关注脓毒症的病理发展机制,以期能够早期诊断并及时治疗脓毒症。脓毒症指的是病原微生物侵入机体后,机体内出现大量的炎症介质释放,并且破坏了机体内抗炎反应与促炎反应的平衡,导致全身各个器官组织出现炎症反应综合征,最终发展为多器官功能衰竭。现阶段并没有切实有效的治疗措施来治疗脓毒症,并且抗炎治疗的效果十分不理想。microRNAs的发现及时补充了在转录后水平对靶基因mRNA进行精确有效的调节,以便为有效防治脓毒症提供一个全新的靶点。因此,本文作者对microRNAs在脓毒症炎症反应过程中的发生机制进行了综述。

小干扰RNA沉默MST1基因减轻TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

目的：探讨丝／苏氨酸蛋白激酶（mammaliansterile20-likekinase1，MSTl）对肿瘤坏死因子．a（tumornecrosisfactorqTNF-α）诱导的人脐静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcell，HUVEC）凋亡的影响及作用机制。方法：用不同浓度的TNF-α（0-100ng／mE）诱导内皮细胞凋亡，24h后通过TUNEL法观察内皮细胞凋亡率，Western印迹分析TNF-α对MSTl活性的影响；随后将构建的MSTl小干扰RNA（smallinterferenceRNA，siRNA）在脂质体Lipofectamine2000的介导下转染原代HUVEC，转染后24h加入TNF-α（10ng／mL）诱导HUVEC凋亡，24h后通过Western印迹确定MSTlsiRNA的基因沉默效率；通过TUNEL法观察MSTl基因的敲除对TNF-α介导的内皮细胞凋亡的影响；并进一步用Western印迹观察MSTl基因敲除对Caspase，3活性的影响。结果：TNF-α（10，40，100ng／mL）能导致内皮细胞凋亡显著增多（P〈0．001），并且呈剂量依赖性；随着TNF-α浓度增加，MSTl的活化增多，MSTl激酶活性相应增加；MSTlsiRNA对内皮细胞中MSTI基因表达的抑制呈剂量依赖性，100nmol／LMSTlsiRNA能特异性沉默内皮细胞中MSTl基因的表达（P〈0．05）；MSTlsiRNA能明显减少TNF-α诱导的内皮细胞凋亡（P〈0．05），抑制TNF-α诱导的MSTl裂解活化，同时caspase-3的活性也相应减少。结论：MSTlsiRNA通过抑制caspase-3的级联放大效应减少TNF-α诱导的HUVEC凋亡。

右美托咪定对靶控输注瑞芬太尼所致咳嗽反射的影响

目的探讨右美托咪定对靶控输注(TCI)瑞芬太尼所致咳嗽反射的影响。方法选取在全麻下行外科手术患者150例,随机均分为三组:对照组(Ⅰ组)、右美托咪定0.5μg/kg组(Ⅱ组)、右美托咪定1.0μg/kg组(Ⅲ组)。在TCI瑞芬太尼前,分别泵注生理盐水10ml(Ⅰ组)、右美托咪定0.5μg/kg(Ⅱ组)与右美托咪定1.0μg/kg(Ⅲ组)。观察TCI瑞芬太尼后咳嗽反射的发生率、严重程度、血流动力学变化及恶心、呕吐及呼吸抑制不良反应发生情况。结果Ⅱ、Ⅲ组咳嗽反射发生率明显低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组咳嗽反射发生率明显低于Ⅱ组(P<0.05);三组患者MAP和HR差异无统计学意义;三组患者均未发生恶心、呕吐及呼吸抑制不良反应。结论在TCI瑞芬太尼前泵注右美托咪定1.0μg/kg能有效地降低咳嗽反射的发生率,不增加呼吸抑制、恶心、呕吐等不良反应的发生。

腺苷A1受体激动剂预处理兔延迟相心肌蛋白质组学分析

目的:研究腺苷A1受体激动剂2-氯环戊腺苷(2-chloro-N6-cyclopentyladenosine,CCPA)预处理延迟相缺血再灌注心肌保护的蛋白质表达谱的变化。方法:8只新西兰大白兔随机分为CCPA预处理组(CC-PA组)和生理盐水预处理组(NS组)。CCPA组用100μg/kg CCPA预处理大白兔,NS组用生理盐水预处理。24 h后冠状动脉左前降支行30 min缺血/2 h再灌注,然后取左心室缺血区心肌组织进行蛋白质组学研究。另取12只新西兰大白兔随机分为假手术组(Sham组)、生理盐水预处理组(NS组)和CCPA预处理组(CCPA组),每组4只,用Western印迹验证差异蛋白αB-晶状体蛋白的表达。结果:双向凝胶电泳分析发现2组表达明显差异的蛋白点有55个。其中17个差异蛋白质点用基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱技术以及Mas-cot和Expasy软件分析,初步鉴定出17个蛋白质。这些蛋白质包括应激反应蛋白、代谢相关蛋白、信号调节蛋白、离子通道蛋白、免疫相关蛋白等。Western印迹证实αB-晶状体蛋白在CCPA组中的表达明显上调。结论:CCPA预处理延迟相缺血再灌注心肌组织的蛋白质表达谱发生改变,这些蛋白质可能与腺苷A1受体激动剂预处理延迟相缺血再灌注心肌保护作用有关。

少突胶质前体细胞分离培养方法及其谱系限定细胞体外分化模型建立的改进

目的:对少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的分离、培养及传代方法进行改良,探讨体外条件下OPCs的增殖与分化特性。方法:取新生SD大鼠脊髓来源的细胞分离、纯化OPCs行原代培养,用含碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)和血小板源性生长因子-aa(platelet-derived growth factor-aa,PDGF-aa)的培养液作扩增培养,MTT法检测OPCs的增殖能力;三碘甲腺原氨酸和睫状神经生长因子诱导OPCs分化,最终分化为成熟的少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs),并对分化细胞行形态学及免疫化学染色法鉴定。结果:95%以上的细胞具有双极或三极突起的典型OPCs形态并表达A2B5;MTT法检测显示OPCs在体外保持良好的增殖能力;细胞最终诱导分化为成熟的OLs并表达髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)。结论:OPCs在体外条件下可继续保持良好的增殖生长及定向分化能力。

医疗安全之“墨菲定律”和“海恩法则”

医疗安全既是医学专业问题,也是人文社会问题。保证医疗安全,避免医疗意外、差错、事故的发生,是医务工作者的主要职责和面临的重大课题。"墨菲定律"和"海恩法则"是安全产生领域的重要安全法则,它揭示了事故发生的偶然性与必然性。本文结合"墨菲定律"和"海恩法则"探讨医疗安全问题,认为医疗安全问题是无法避免的,但又是可以预防的,这一看似矛盾的命题,给我们深深的思索和无穷的启迪。

异丙酚对高糖诱导人脐静脉内皮细胞SOD活力、ROS及ICAM-1表达的影响

目的探讨体外培养条件下异丙酚对高糖(HG)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)氧化应激及细胞黏附分子的影响。方法将新鲜脐带中分离培养的HUVECs分为6组:C组为正常糖浓度(5.5 mmol·L^(-1))组,P组为异丙酚(25μmol·L^(-1))组,HG组为高糖(25 mmol·L^(-1))组,HG+P1组为高糖(25 mmol·L^(-1))+异丙酚(1μmol·L^(-1))组,HG+P5组为高糖(25 mmol·L^(-1))+异丙酚(5μmol·L^(-1))组,HG+P25组为高糖(25 mmol·L^(-1))+异丙酚(25μmol·L^(-1))组,处理8 h后采用分光光度比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,DCFH-DA荧光探针法检测内皮细胞内的活性氧(ROS)含量,实时定量PCR、Western Blot检测细胞间黏附分子^(-1)(ICAM^(-1))的表达。结果与C组比较,HG组SOD活力明显下降,ROS、ICAM^(-1)明显增高,而异丙酚在适当浓度可干预上述变化。结论异丙酚通过抑制高糖诱导的HUVECs的氧化应激和黏附分子表达,对改善糖尿病血管炎症病变进展起一定的作用。

多巴胺D1受体RNA干扰载体的构建及其沉默效应鉴定

目的:构建多巴胺D1受体(DRD1)表达干扰载体,为研究DRD1在神经细胞中的作用及抗惊厥药物打下基础。方法:根据GenBank中DRD1基因序列,设计10个干扰序列并构建DRD1干扰载体。对NG-108-15进行脂质体转染后,GFP标记检测转染效果。Real-time PCR和Western印迹检测NG-108-15中DRD1的表达量。结果:构建的10个干扰载体均能采用脂质体法转染到NG-108-15细胞中。转染后NG-108-15中DRD1 mRNA和蛋白的表达均明显下降。其中转染pGPU6-GFP-Neo-si-DRD1-5载体的NG-108-15中DRD1 mRNA表达水平最低,而转染pGPU6-GFP-Neo-si-DRD1-1,-2,-6,-7载体的NG-108-15中DRD1蛋白表达水平最低。结论:成功构建了DRD1表达干扰载体。