低海拔引种栽培玛咖主要有效成分分析

为给低海拔地区栽培玛咖的开发和推广提供参考依据,以引种栽培基地湖南省湘西自治州不同海拔样地的玛咖为材料,采用醇浸取法和高效液相色谱法,对其生物碱、玛咖酰胺和玛咖烯等主要有效成分进行了测定与分析。测定结果表明：其总生物碱含量为0.707%~2.376%;玛咖酰胺含量为0.083 8%~0.529 2%,玛咖烯含量为0.008 3%~0.070 6%,玛咖酰胺＋玛咖烯含量为0.099 7%~0.537 6%。分析结果表明：湘西低海拔地区栽培的玛咖其主要有效成分含量与秘鲁原产地的相当,说明海拔高度对玛咖有效成分含量无显著影响。文中因此认为,玛咖可以在低海拔地区大量推广栽培。

大肠杆菌CFT073中Curli系统重要基因csgF的克隆、表达、纯化和结构分析

【目的】对大肠杆菌CFT073中Culri系统的重要蛋白CsgF进行高效表达,探索其纯化条件和三维结构,为研究Curli生物合成机制提供理论基础。【方法】以大肠杆菌CFT073基因组为模板扩增csgF基因,构建pET28a-csg F(nsp)-N-6His、pET28a-csg F(20-129)-N-6His、pET28a-csg F-C-6His和p ET28a-csg F(nsp)-C-6His等重组质粒,转化到大肠杆菌DH5α并在BL21(DE3)中诱导表达;通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定CsgF蛋白在大肠杆菌中的表达情况,用Ni-NTA His Bind Resin和凝胶排阻层析色谱纯化重组蛋白CsgF,SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定分析;用Pull down实验研究CsgF与CsgG蛋白的相互作用,同源模建方法分析重组蛋白CsgF的三级结构。【结果】克隆了目的基因csg F,并筛选出稳定CsgF蛋白的条件:50 mmol/L Sodium acetate(pH 5.0)、150 mmol/L NaCl、5%Glyercol;CsgF与CsgG存在相互作用,CsgF三维结构模型显示为(β/α)。【结论】获得了高纯度稳定的CsgF重组蛋白及其三维结构,为进一步研究CsgF结构与功能奠定了基础。