不同营养元素及其配比对枣花粉萌发与花粉管生长的影响

为研究营养元素N、P、K、Ca、Mg、B、Zn、Mo及其配比对枣花粉萌发与花粉管生长的影响。以“金丝4号”枣花粉为试材，运用琼脂培养基萌发法，对不同营养元素条件下花粉萌发率及花粉管长度进行比较。结果表明：（1） Zn、Ca、Mo、Mg对枣花粉萌发与花粉管生长具有抑制作用，而N、P、K、B则具有明显的促进作用。（2）促进花粉萌发最适宜质量浓度：CO（ NH2）2为0．10～0．15 g/L；KH2 PO4为0．10 g/L；KCl为0．25 g/L；H3 BO3为0．02 g/L，促进花粉管生长最适宜质量浓度：CO（ NH2）2为0．10～0．15 g/L；KH2 PO4为0．10 g/L；KCl为0．20～0．25 g/L；H3BO3为0．015～0．02 g/L。（3）N、P、K、B营养元素配合使用极显著地促进花粉萌发和花粉管生长，其中以0．10 g/L CO（ NH2）2＋0．10 g/L KH2 PO4＋0．25 g/L KCl＋0．015 g/L H3 BO3处理的效果最好，其花粉萌发率和花粉管长度分别为87．45％和1350μm，比CK提高了37．28％和1293．5μm。

基于cDNA芯片的梨品种S基因型鉴定及新S-RNase基因进化分析

梨品种S基因型鉴定对梨栽培中授粉品种选择和遗传育种都具有重要意义。本研究利用梨S-RNase基因荧光标记的特异引物PCR扩增获得梨品种荧光标记的cDNA特异产物;进一步完善梨S-RNase基因cDNA芯片,以被检测梨品种cDNA特异序列与梨S-RNase基因cDNA芯片杂交检测不同梨品种S基因型,并发现新的S-RNase基因。结果表明:利用梨S-RNase基因cDNA芯片鉴定了泸定王皮梨、兴山24号、弥渡百合等35个未知S基因型梨品种,确定了各品种的S基因型。结合PCRRFLP及DNA克隆和测序等技术,发现了7个新的S-RNase基因资源,获得了新S-RNase基因序列。序列分析表明各新S-RNase基因均具有S-RNase基因特异区域序列的典型特征;进化分析显示7个新S-RNase基因主要属于蔷薇科苹果亚科S-RNase类群,且存在种间和属间比种内和属内进化关系更近的现象。7个新的S基因分别命名为:PpS_(53)(Pyrus pyrifolia S53)、PpS_(54)、PpS_(55)、PpS_(56)、PpS_(57)、PpS_(58)和PpS_(59),GenBank登录号分别为:KX581753、KX581754、KX581755、KX581756、KX581757、KX581751和KX581752。

油茶脂酰辅酶A脱氢酶基因的克隆与表达分析

以国审油茶(Camellia oleifera)良种‘华硕’种子为材料,在已构建的转录组和表达谱数据库基础之上,采用RACE技术,克隆获得油茶脂酰辅酶A脱氢酶基因的全长c DNA序列,命名为Co ACAD(基因登录号KJ910338)。该基因c DNA全长为2702 bp,含有2487 bp的开放读码框,编码828个氨基酸,分子量为92.4113 k D,理论等电点p I为8.47,具有2个比较明显的跨膜区和酪氨酸蛋白激酶活性位点LVHGDFRIDNLVF,存在5个亚结构域;在Co ACAD基因c DNA全长序列的基础上构建表达载体,其中原核表达载体在宿主细胞BL21(DE3)中成功诱导表达,获得表观分子量约为93 k D的目的蛋白;实时荧光定量PCR分析表明,Co ACAD基因在果实膨大期和成熟期上调表达,预示着Co ACAD基因可能在种子发育过程中参与能量供应过程的调控。

大花红山茶4个变异类型开花生物学特性

为开展大花红山茶（ Camellia magniflora Chang）杂交育种及物种保护工作，以大花红山茶的4个变异类型为材料，通过田间观察开花物候期并结合花器特征分析、花粉活力、花粉／胚珠比和杂交指数等指标测定，研究大花红山茶变异类型的开花生物学特性。结果表明：（1）4个类型的开花物候期不一致，类型1开花最早，类型2花期最长为73 d，类型3花期最短为48 d，类型4开花最晚；（2）类型1花冠最大，花瓣浅粉色，雄蕊数量多达182枚。类型2、类型3和类型4花瓣颜色逐渐加深，雄蕊数量相差不大但均较类型1少。4个类型的花柱数量均为3个，花瓣数量均为5～7枚；（3）4个类型的新鲜花粉在10％蔗糖＋1％琼脂的培养基上萌发率均大于46％，活力较高，雄配子可育；（4） P／O值法和OCI值法表明4个类型的繁育系统为异交型，需要传粉者。大花红山茶变异的类型中存在雄蕊瓣化现象。

顶花板凳果愈伤组织和芽诱导培养研究

为快速繁殖顶花板凳果优良品种,筛选出顶花板凳果愈伤组织和芽诱导的最佳培养条件,以顶花板凳果当年生鲜嫩带芽茎段为试材,研究了不同采样时间、植体消毒方式、激素配比、是否光照处理等培养条件对顶花板凳果愈伤组织和芽的诱导的影响。结果表明:5月是顶花板凳果最佳采样季节,其外植体的愈伤组织和芽诱导率高于其他月份、为44%;以仅用0.1%HgCl_2处理5 min的消毒效果最好,污染率及死亡率均较低,分别为11%、22%;NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L为最佳愈伤组织和芽诱导培养的激素浓度及配比,诱导率高达47%;以光照培养的效果最佳,诱导率为60%。

油茶甘油二酯激酶基因(CoDGK3)的克隆与表达分析

以油茶转录组数据为基础,采用RT-PCR和RACE技术,根据Unigene序列设计油茶甘油二酯激酶基因(Co DGK)RACE引物,分离克隆了DGK基因全长c DNA序列,命名为Co DGK3(Gene Bank登录号:KM068056),基因全长1 568 bp,开放阅读框1 455 bp,编码485个氨基酸;氨基酸同源比对及序列分析表明油茶与其它物种的DGK氨基酸序列具有较高的相似性,其中与麻风树和毛果杨相似性最高,达到78%;利用生物学软件对蛋白质进行生物信息学分析,获得其结构特点及理化性质;分析转录组数据中DGK相关的Unigene序列RTKM值和对Co DGK3基因实施实时荧光定量PCR,结果表明Co DGK3在油茶种子发育各时期表达量变化差异不大,并且发现转录组数据分析和实时荧光定量分析的结果变化规律一致,证明了转录组测序的有效性。

植物生长调节剂对波斯菊种子萌发的影响

为促进植物生长调节剂在园林生产中的应用。采用L_9(3)~3正交设计法,用赤霉素(GA_3)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三种植物生长调节剂组合处理波斯菊种子,研究其对波斯菊种子萌发的影响。结果表明:GA_3和2,4-D对波斯菊种子萌发及幼苗早期生长的影响明显高于6-BA;采用0.5 mg·L^(-1) GA_3处理波斯菊种子,其发芽时间能较对照组缩短1～2 d;采用0.5～1.0 mg·L^(-1) GA_3和2,4-D的混合液浸泡波斯菊种子24 h后催芽,其萌芽率和发芽指数均较对照组高出16%以上,幼苗生长初期生物量也较对照组高出35%以上。

钛离子注入种子对油茶幼苗叶绿体DNA、叶绿素含量和光合参数的影响

[目的]探讨钛离子注入对油茶生长过程中叶绿体及光合作用的影响,利用离子注入技术进行油茶种质创制及选育提供科学依据。[方法]以油茶品种华硕为试材,设置6×10^16、9×10^16、12×10^16、15×10^16和18×10^16Ti^2+/cm^2 5种剂量的钛离子,分别注入油茶种子,以未进行注入处理的种子作为对照,在相同条件下播种培育。采摘幼叶进行DNA提取,对叶绿体基因组的部分基因片段的序列进行扩增、纯化,并定期测量其叶绿素含量和光合参数,连续3年(2016—2018年)追踪研究其叶绿体DNA的变异、叶绿素相对含量及净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(Ci)和蒸腾速率(Tr)的变化规律。[结果]钛离子注入处理会引起叶绿体DNA少数碱基置换,虽然注入剂量越大置换相对增多,但不存在明显的缺失或插入现象;叶绿素相对含量和光合参数均呈现马鞍形变化;钛离子注入浓度为6×10^16和12×10^16 Ti^2+/cm^2时,叶绿素含量相对较高,但随着生长年份增加,优势逐渐减小;处理后当年各试验组Pn差异不显著(P>0.05,下同),但第2和第3年,6×10^16Ti^2+/cm^2注入组Pn显著高于对照组(P<0.05,下同),分别增加13.94%和12.56%;第1、2年中Gs和Tt各组差异不明显,而第3年差异开始增大,在注入浓度为0及6×10^16Ti^2+/cm^2时Gs分别为最低组的235.78%和249.55%,而在注入浓度为6×10^16Ti^2+/cm^2 Tr是最低组的239.24%;在第1年中,对照组Ci为508.4074μL/L,是最低组的213.72%,第2年中对照组与其他各组均存在显著差异,达该年度最高值,为288.2563μL/L,较其他处理组增加6.66%~17.98%,但第3年对照与其他组差异减小。[结论]钛离子注入浓度的差异对叶绿素的影响暂时不稳定,但当钛离子注入浓度为6×10^16 Ti^2+/cm^2时,对油茶的综合作用效果最佳,能促进油茶净光合速率的提升以及蒸腾作用的加强。