微生物谷氨酰胺转胺酶对大豆分离蛋白凝胶性的影响

利用Streptoverticillium sp.CJ3033菌株发酵得到发酵液,经过滤、离心、冷冻浓缩、乙醇沉淀和冷冻干燥后,制得的谷氨酰胺转胺酶粗酶作用于大豆分离蛋白,利用物性分析仪研究了MTG对大豆分离蛋白形成凝胶的特性及持水性的作用.通过二次回归正交组合设计的方法研究了MTG的添加浓度、作用时间、处理温度对SPI凝胶形成及保水性的影响,结果显示:MTGase对大豆分离蛋白有显著改善作用,在51℃、反应1.5 h、酶浓度9.82 U/g时,SPI的凝胶强度最大,达74.95 g/mm2;在49℃、反应1.3 h、酶浓度7.78 U/g时,SPI的持水率为96.47%.

基于尼罗红荧光染色的小球藻脂质快速检测方法研究

尼罗红荧光染色的脂质测定方法已经应用到一些种类的微藻当中,但在细胞壁较厚的一些绿藻中因不易染色而无法应用。选用了4株小球藻,对尼罗红荧光染色测定脂质的方法进行改进,采用20%二甲基亚砜溶液作为渗透剂,在35～40℃下对藻细胞进行前处理,加强尼罗红与胞内脂质的结合;藻细胞密度的OD540在0.8～1.1范围内,加入15μL质量浓度为0.1 mg/mL的尼罗红丙酮溶液染色可以有效提高荧光发射强度。该方法能够较为准确地反映胞内脂质含量,可以作为自然界中广泛筛选富脂绿藻的快速检测方法。

营养条件对三角褐指藻生长和油脂积累的影响

研究了培养基中添加乙酸钠、尿素以及Fe3+对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)生长和油脂积累的影响。结果表明,培养基中添加乙酸钠作为碳源的兼养生长模式对三角褐指藻的生长和油脂含量的增加有明显的促进作用(P<0.05),在乙酸钠浓度为5.0 g/L时得到最大生物量为1.28 g/L,是对照的1.7倍;而在乙酸钠浓度为0.5 g/L时油脂含量达到最大(28.90%),是对照的1.9倍;培养基中添加适当浓度的尿素作为氮源,可以显著地提高三角褐指藻的生长速率(P<0.05),但对生物量和油脂含量没有显著影响(P>0.05);培养基中Fe3+浓度的增加对三角褐指藻的生长速率、生物量及油脂积累均没有显著影响(P>0.05)。

城市污水培养富油蛋白小球藻的研究

为研究城市污水培养富油蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidsa)的可行性,分别采用了高压和紫外2种方式进行城市污水的灭菌,对蛋白核小球藻进行培养,考察了净化水质的效果及其油脂含量和脂肪酸组成的变化.结果表明:该株蛋白核小球藻有较高的耐污能力,对城市污水有较好的净化效果.紫外灭菌和高压灭菌后培养的蛋白核小球藻对水质的净化效果差别不大,其中COD去除率高于67.0%,总氮和氨氮去除率高于95%,总磷去除率最高达到92.87%,其中紫外灭菌培养的藻在生长初期对COD的去除率更有效.高压灭菌后培养的藻的生物量是紫外灭菌后培养的藻生物量的1.43倍,灭菌方式对城市污水培养藻的油脂含量的影响较小.基于生产的成本和操作的便利性,紫外灭菌方式更适用于基于城市污水大规模养藻系统.

2株污染小球藻的除菌技术

在考察普通小球藻(Chlorella vulgaris)和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)对青霉素、硫酸链霉素和制霉菌素等3种抗生素敏感性的基础上,研究了几种对已污染藻种除菌的方法。结果表明,2株小球藻对抗生素的敏感性有明显差异;青霉素、硫酸链霉素与制霉菌素的单独使用与联合使用对藻生长的影响差异不明显;液体培养基中加入组合抗生素能够暂时抑制藻液中杂菌的生长,但并不能得到纯培养藻种;离心清洗与抗生素结合使用能够大量除掉细菌,却使霉菌旺盛生长,说明藻菌间存在复杂的相互关系;使用添加合适浓度的混合抗生素的固体平板连续分离2次最终得到了藻的纯培养物。

血吸虫细胞色素C氧化酶亚基I基因的克隆与近缘种属关系分析

从生物化学的角度比较血吸虫不同虫株的遗传进化差异.以日本血吸虫湖北株成虫基因组总DNA为模板,设计特异性引物扩增获取血吸虫线粒体细胞色素C氧化酶基因片段,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,测序,对克隆得到的coⅠ基因作进化分析.结果表明:无论是在核苷酸序列还是在氨基酸序列上,日本血吸虫湖北株与其近地域株(云南、江苏、湖南)均具有较高的同源性,coⅠ基因的相似性分别为98%、98%和97%,但与不同种属血吸虫(曼氏、湄公、埃及、马来)的一致性则较低,分别为76%、84%、76%、85%,由此证实日本血吸虫湖北株与其它近地域株具有较近的亲缘关系.

腐烂柑橘中两株细菌的分离与鉴定

以腐烂的柑橘为材料,分离纯化得到两株致病的细菌。根据菌株的形态特征并结合16SrDNA序列比对分析,确定两株细菌分别属于芽孢杆菌属(Bacillus)和短芽孢杆菌属(Brevibacillus)。与此同时对两株细菌的生长曲线、抗生素抗性进行测定,以期为柑橘由细菌导致的病害的防治提供理论基础。

产油脂小球藻的筛选及其培养基的研究

从7株不同的小球藻中筛选到1株油脂产率较高的普通小球藻C.vulgarisNo.1,研究了含氮量不同的培养基对其生长和油脂积累的影响,并用气相色谱法分析其脂肪酸组成。结果表明,高氮培养基有利于C.vulgarisNo.1的生长,生物量达到1.231 g/L。高氮培养基中的油脂产率最高,达到0.255 g/L,为低氮培养基中的油脂产率的2倍;SE培养基中C.vulgarisNo.1的油脂积累也高于低氮培养基。气相色谱分析小球藻主要含十六碳脂肪酸和十八碳脂肪酸,总不饱和脂肪酸含量达80%左右,脂肪酸组成与植物油相似,可作为生产生物柴油的原料。

初级猪粪废水混合培养普通小球藻的研究

实验研究了初级猪粪废水混合培养一株普通小球藻（Chlorella vulgaris）的可行性。实验结果表明，初级猪粪废水可直接进行C.vulgaris的培养，不需要添加微量金属元素，生物量最大可达0．414g／L，为在Bristol培养基培养的生物量的3．14倍。Cvulgaris可以耐受1000mg／L COD的猪粪水，在250～1000mg／L范围内，C．vulgaris生物量随初始COD的升高而升高，猪粪水中的营养物质被高效地去除，其中猪粪水中的总氮、总磷和氨氮的去除率分别达到了50％，60％和90％以上。C．vulgaris的油脂含量达到22．28％，实现了初级猪粪废水中微藻的生物量转化和资源化处理。

芳香烃化合物降解菌CP5的降解特性及降解基因

以苯酚作为碳源从化工厂污水样品中富集筛选出降解能力较强的降解菌CP5,该菌能利用多种芳香烃化合物生长。16SrDNA序列系统发育分析表明,该菌属于假单胞菌属(Pseudomonas)。CP5可以在48h内将500mg/L的苯酚完全降解。从该菌株中扩增获得邻苯二酚2,3-双加氧酶基因,该基因编码氨基酸序列与P.putida NCIB9816-4以及P.fluorescens PC20的双加氧酶具有最高同源度,均为99%。CP5菌株对芳香烃化合物的生物修复有较大的应用前景。

不同氮源对三角褐指藻生长和脂类含量的影响

研究了不同氮源及浓度对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)的生长、总脂及脂肪酸组成的影响。结果表明,三角褐指藻在氮源缺乏时生长缓慢,表现出油脂积累的特性。以初始浓度大于3.9 mmol/L的氯化铵作为氮源,可以促进三角褐指藻生物量和油脂含量的同步增长。高浓度的尿素有利于三角褐指藻的生长,但达到8.0 mmol/L时脂肪含量下降。不同浓度硝酸钠都促进三角褐指藻的生长,但不能促进脂肪的积累。脂肪酸组成分析表明,单不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例为45%～50%,受各种氮源变化的影响较小,可为生物柴油提供较好的流动性。氮源的添加有利于二十碳五烯酸(EPA)和多不饱和脂肪酸(PUFAs)的合成,当氯化铵浓度为3.9 mmol/L时,EPA和PUFAs占总脂肪酸的比例达到最大,分别为20.4%和26.7%。

不同碳氮组合对三角褐指藻兼养生长及脂质积累的影响

为了探讨兼养培养中不同碳氮组合对三角褐指藻(P.tricornutum)生长及脂质积累的影响,以葡萄糖为碳源,氯化铵为氮源,以不同的碳氮组合兼养培养P.tricornutum,用干重法测定P.tricornutum的生物量,三氯甲烷-甲醇法提取脂质,并采用GC分析脂肪酸组成。结果表明,兼养生长中P.tricornutum基于氯化铵消耗的细胞得率系数随着葡萄糖质量浓度的增加而降低,降低了对氮源的需求;在碳氮组合为葡萄糖质量浓度0.5 g/L,氯化铵浓度1.0 mmol/L的条件下,P.tricornutum生物量达最高,为1.25 g/L,脂质含量可达44.6%,不同碳氮组合对P.tricornutum脂质多不饱和脂肪酸(PUFA)和二十碳五烯酸(EPA)含量的影响不显著。

益生芽胞杆菌肠道微生态学研究进展

芽胞杆菌作为微生态制剂的一种重要来源细菌,在维护人和动物肠道健康、促进微生态平衡方面起着重要的作用。但是对于益生芽胞杆菌的作用机制却知之甚少。近年来,人们对芽胞杆菌在肠道微生物调控方面做了大量的基础研究,随着芽胞杆菌肠道分子微生态学研究的不断深入,人们发现芽胞杆菌的芽孢能够在体内迅速萌发增殖,从而起到免疫促进、改善肠道菌群以及相关的代谢酶活性等生理作用。本文从芽胞杆菌在胃肠道中的分布与定植、芽胞杆菌在胃肠道中的增殖以及芽胞杆菌与肠道菌群之间的关系等三个方面综述了益生芽胞杆菌对肠道微生态的调控作用的最新研究进展,为指导芽胞杆菌作为微生态制剂机制研究和应用提供一定的理论参考。

产淀粉酶益生乳杆菌的筛选及鉴定

目的以健康仔猪肠道及粪便样品为基础,从中筛选产淀粉酶的乳杆菌菌株,并评价其作为益生菌候选菌株潜力。方法用MRS培养基分别从仔猪新鲜粪便和小肠黏膜上分离到乳酸菌,采用改良的产淀粉酶选择性培养基初筛得到能降解淀粉活性的菌株,并研究菌株的淀粉水解活性、抗逆能力、粘附特性及对抗生素的敏感性。结果从备选的485株乳酸菌中筛选得到具有初步淀粉酶活性的菌株25株(占总筛选数量的5.2%),复筛选育得到具有较强淀粉酶活性的乳杆菌3株。进一步研究了这3株乳杆菌的抗逆能力、粘附特性以及对抗生素的耐药性,并对最终选育得到的菌株进行生理生化及16S rRNA分子鉴定。经选育鉴定的罗伊乳杆菌G8-5淀粉降解能力最强,并能耐受pH 3.0的酸度、1.0%的胆盐浓度,在小肠上皮细胞上的粘附效率超过15个以上,并对常用的抗生素具有较高的敏感率。结论罗伊乳杆菌G8-5符合安全益生菌的要求,可以作为产淀粉酶的益生乳杆菌优良的候选菌株。

胆盐水解酶产生菌的筛选及其益生潜力研究

目的从健康仔猪肠道及粪便中筛选具有胆盐水解酶活性的优良益生乳杆菌菌株,并对筛选菌株的体外、体内益生潜力进行初步探讨。方法用MRS培养基分别从仔猪新鲜粪便和小肠黏膜分离培养乳酸菌,用筛选鉴别培养基筛选阳性菌株,研究菌株的抗逆能力、黏附特性以及体内益生活性。结果从粪便和小肠黏膜共得到乳酸菌388株和97株,其中胆盐水解酶阳性菌株分别为291株(75%)和86株(89%)。选择5株胆盐水解酶活性最强、能水解游离胆酸的菌株,研究菌株的抗逆能力、黏附特性以及体内益生活性,并对最终选育得到的菌株进行生理生化及16S rRNA分子鉴定,发现菌株罗伊乳杆菌G22-2能耐受pH 3.0的酸度、1.0%的胆盐浓度,在小肠上皮细胞上的黏附效率超过15个以上;通过大鼠体内实验,筛选出的菌株G22-2对大鼠无毒无害,并能显著改善血脂水平。结论罗伊乳杆菌G22-2符合益生菌的要求,可以作为产胆盐水解酶的益生乳杆菌优良的候选菌株。