鞣花酸调控Nrf2和NLRP3通路影响TGF-β所致AML-12细胞EMT的作用

研究了鞣花酸(EA)对TGF-β所致小鼠AML-12正常肝细胞上皮-间质转化(EMT)的影响及其可能机制.通过细胞活力评价、细胞形态观察和细胞内ROS水平检测,评价了EA对TGF-β所致AML-12细胞EMT的作用.通过免疫荧光和免疫印迹检测了细胞内EMT标志蛋白钙黏蛋白E(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达;免疫印迹检测了细胞内Nrf2和NLRP3通路相关因子的表达水平.结果显示:EA显著抑制了TGF-β所致AML-12细胞EMT.进一步研究表明,EA可以诱导Nrf2入核并上调其下游抗氧化基因的表达.EA还可以下调NLRP3炎症通路相关蛋白的表达.综上所述,EA对TGF-β诱导的AML-12小鼠肝细胞EMT具有抑制作用,其机制可能与调控Nrf2抗氧化通路与NLRP3炎症通路有关.

鞣花酸对马兜铃酸I所致肾小管上皮细胞毒性的保护作用

探究了鞣花酸(ellagic acid,EA)对马兜铃酸I(aristolochic acids I,AAI)诱导的HK-2人肾小管上皮细胞毒性的保护作用和潜在机制.用噻唑蓝(MTT)比色法,乳酸脱氢酶(LDH)活性检测法评价了细胞活力;用Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞分析法(FITC-Annexin V/PI双染)检测了细胞凋亡;用免疫印迹和实时荧光定量PCR检测了细胞内NF-κB和NLRP3通路相关因子的表达水平.结果显示:EA显著改善了AAI所致的HK-2细胞活力下降与凋亡增加的现象.进一步研究表明,AAI通过激活NF-κB上调HK-2细胞内NLRP3炎症小体组分编码基因的转录.EA则能明显阻断AAI对NF-κB/NLRP3通路的激活作用.综上所述,EA能明显缓解AAI诱导的HK-2细胞的毒性,其作用机制可能与阻断AAI对细胞内NF-κB/NLRP3级联的激活作用紧密相关.

一测多评法在四神丸中9种成分含量的测定及质量评价中的应用

在高效液相色谱法(HPLC)基础上,采用一测多评法(QAMS)测定复方四神丸中分别来源于君、臣、佐药中的9种代表性有效成分的含量,并将方法应用于8个不同厂家的复方四神丸进行质量评价.采用HPLC法以水(A)-甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱;采用多点校正法以补骨脂素为内参物建立9种有效成分的相对校正因子;计算8个厂家四神丸中9种有效成分的含量,通过评估有效成分的含量进而评估8个厂家的四神丸质量.结果表明:9种成分测定结果与外标法(ESM)测定结果的含量差异百分比均不超过3%.结论:一测多评法高效准确,能有效地测定四神丸中9种有效成分的含量,可以快速地对复方四神丸整体的质量进行评价.

竹节参皂苷成分对对乙酰氨基酚诱导急性肝损伤的保护作用

目的:观察竹节参总皂苷提取物(PJST)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导急性肝损伤的预防保护作用.方法:构建APAP诱导HepG2细胞损伤的体外模型,采用MTT法评价PJST对APAP诱导HepG2细胞死亡的预保护作用,并观察细胞形态变化,采用Hoechst 33258荧光染色法研究PJST对细胞凋亡形态的影响.取40只昆明种小鼠构建体内模型,小鼠随机分为空白组、模型组和PJST低、高剂量组(50、100 mg·kg^(−1)),腹腔单次注射APAP溶液(400 mg·kg^(−1))以构建肝损伤模型.给药造模结束后,处死小鼠并收集血清及肝脏组织.采取生化试剂盒检测血清中ALT、AST和LDH水平,ELISA法检测肝脏组织TNF-α、IL^(-1)β和IL-6水平,HE染色法观察肝脏组织显微结构变化情况,免疫组化法检测肝组织Bax和Bcl-2蛋白的表达差异,免疫印迹检测肝组织Bax、Bcl-2、P-NF-κB p65和核内NF-κB p65的蛋白表达水平.结果:PJST可以有效干预APAP诱导的HepG2细胞凋亡;体内实验中PJST组小鼠血清ALT、AST和LDH水平均显著低于模型组,且肝脏显微结构变化也较模型组有所恢复.进一步研究结果显示:PJST可以显著改善由APAP诱导的肝脏细胞凋亡,Bax和Bcl-2蛋白表达的异常,NF-κF p65的异常磷酸化和入核,以及抑制肝脏内炎症因子TNF-α、IL^(-1)β和IL-6的过量产生与释放.结论:PJST可以明显缓解APAP诱导的急性肝损伤,其机制可能与抑制肝细胞凋亡和炎症反应有关.

马铃薯内生真菌中丁烯内酯类化合物诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制

探究马铃薯内生真菌Aspergillus carneus提取物中丁烯内酯类化合物Asperteretal D对乳腺癌细胞(MCF-7)的凋亡诱导作用及其分子机制.结果表明:化合物Asperteretal D剂量依赖性地促进MCF-7细胞凋亡,分子对接实验表明其能够与PARP、Caspase-9、P53、Bcl-2、Bax等凋亡相关蛋白结合.化合物Asperteretal D能显著下调pro Caspase-9、pro Caspase-3、PARP蛋白的表达,同时上调P53蛋白的表达.因此,化合物Asperteretal D通过诱导乳腺癌细胞凋亡,从而显著抑制其增殖.