基于动物实验与计算机验证探讨人参-三七-川芎药对延缓心脏衰老的作用机制

目的利用动物实验、网络药理学与分子对接技术研究人参-三七-川芎药对延缓心脏衰老的作用机制。方法将小鼠按随机数字表法分为空白对照组、衰老模型组、二甲双胍组、中药组。除空白对照组外,其余各组小鼠采用皮下注射D-半乳糖诱导亚急性衰老小鼠模型。2周后,二甲双胍组灌胃二甲双胍混悬液150 mg/kg,中药组灌胃人参、三七、川芎冻干粉溶液650 mg/kg,空白对照组与衰老模型组灌胃等体积超纯水,1次/d,6次/周,连续灌胃10周。采用PCR检测心脏组织端粒酶蛋白催化亚基(TERT)mRNA水平,采用免疫组化染色观察心脏组织p53表达,采用HE染色观察心脏组织形态。检索TCMSP、Swiss Target Prediciton数据库中人参、三七、川芎的活性成分和靶点;利用TTD、OMIM、Gene、HAGR、DisGeNET数据库筛选心脏衰老靶点;将药物与疾病靶点取交集后得到人参-三七-川芎活性成分作用心脏衰老靶点;采用STRING数据库、Cytoscape 3.8.0软件构建交集靶点PPI网络,筛选核心靶点;利用FunRich软件对核心靶点进行细胞组分、分子功能、生物过程及通路富集分析;运用Schrödinger Maestro软件对药物活性成分与核心靶点进行分子对接,使用PyMOL2.1软件将对接结果可视化。结果实验结果表明,人参-三七-川芎可明显改善心脏衰老小鼠心脏组织损伤,升高TERT mRNA水平,降低p53阳性表达。共获得人参-三七-川芎活性成分32个,共对应637个靶点基因;心脏衰老靶点263个,药物活性成分靶点与心脏衰老交集靶点67个,筛选得到核心靶点31个。富集分析显示,分子功能与转录因子活性、蛋白酪氨酸激酶活性有关;生物过程涉及信号转导、细胞交流;信号通路涉及PDGFR-beta、PI3K-Akt、S1P1、Glypican、TRAIL、Glypican 1通路等。分子对接显示,人参-三七-川芎药对中山柰酚、苏齐内酯、人参皂苷Rg5和p53结合能力较强。结论人参-三七-川芎可通过抑制p53表达延缓心脏衰老,可为益气活血药延缓心脏衰老的作用机制研究提供依据。