基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路探讨芍药汤抗氧化应激抑制肠“炎-癌”转化进展的作用机制

目的:选取氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)诱导的慢性肠炎癌变小鼠模型,动态探究具有清热燥湿、调气和血功效的芍药汤调控抗氧化应激信号通路Keap1/Nrf2/ARE发挥抗氧化作用对肠"炎-癌"转化进展的保护机制。方法:病理学评价AOM/DSS诱导的肠炎癌变情况;定量RT-PCR检测结直肠组织中抗氧化信号通路核因子E-2-相关因子2(Nrf2)关键指标的表达;免疫组化检测结直肠组织炎症和肿瘤形成指标核因子κB(NF-κB)、Ki-67抗原(Ki-67)、Nrf2的表达;ELISA法检测结直肠组织炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)以及氧化应激蛋白超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的表达。结果:与AOM模型组比较,芍药汤各组小鼠体质量减轻较少、均能明显抑制结肠缩短、显著减少肿瘤数量(P<0.01)。与AOM组比较,芍药汤高剂量组各时间点谷胱甘肽还原酶(GR)、硫氧还蛋白还原酶(TR)、血红素氧合酶-1(HO-1)、苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1(UGT1A1)的mRNA表达水平,第63、98天时,醌NADH脱氢酶1(NQO-1)mRNA及第28、63天时尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A10(UGT1A10)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶c(γ-GCSc)mRNA表达水平均显著升高(P<0.05,P<0.01);芍药汤各剂量组第98天NF-κB、Ki-67表达水平显著降低(P<0.01),第63、98天TNF-α及IL-1β表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01);芍药汤高、中剂量组各时间点SOD活性增强(P<0.05,P<0.01),芍药汤各剂量组各时间点MDA含量减少(P<0.01)。结论:芍药汤对AOM/DSS诱导的肿瘤发生具有一定程度的预防作用,能够抑制氧化应激诱导的炎性损伤,通过调控抗氧化应激信号通路Keap1/Nrf2/ARE发挥抗氧化和抗炎作用。