提高结扎冠状动脉在体大鼠心肌梗死模型制作速度和质量的实验研究

目的建立提高结扎冠状动脉在体大鼠心肌梗死(简称心梗)模型制作速度和质量的方法。方法以不影响大鼠心梗面积为前提条件,(1)比较结扎冠状动脉时打1结与打2结所用的结扎时间和开胸时间;(2)比较使用水合氯醛和戊巴比妥钠,对造模过程中动物的存活率、麻醉起效时间、苏醒所需时间及心梗面积等的影响。结果与结扎冠状动脉时打两结方法比较,在对大鼠心脏的梗死面积无显著影响(P>0.05)的情况下,打1结所用的开胸时间和结扎心脏时间均显著缩短(P<0.01);用戊巴比妥钠麻醉制作的大鼠心肌梗死模型麻醉起效时间、心梗面积与水合氯醛组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但戊巴比妥钠组大鼠苏醒时间明显缩短(P<0.01),心梗模型的清晰率提高。结论结扎1次可以提高模型制作速度,戊巴比妥钠作为在体大鼠心肌梗死模型的麻醉剂可以提高制作模型的心梗面积清晰度。

吐温80及其配制的鱼腥草注射液致豚鼠过敏反应的实验研究

目的评价2种吐温80及其配制的鱼腥草注射液静脉给药对豚鼠的致敏性。方法采用全身主动过敏试验方法,豚鼠分别腹腔注射各组受试药液以致敏,致敏期间每日观察动物状态。末次致敏后第11天,各组豚鼠由足趾静脉注射2倍致敏剂量的相应药液进行激发,激发给药前15 min及激发后连续40 min观察豚鼠的反应,记录症状出现、消失时间,评价动物反应症状。激发停药后40 min取血,ELISA方法检测血浆IgE、组胺含量,并结合反应症状结果综合评价致敏性。结果各组豚鼠致敏期间无异常反应,激发后综合判定致敏性,卵白蛋白阳性对照组、0.5%吐温80(1)组可诱发豚鼠过敏反应阳性,其他各组均未诱发豚鼠出现典型的过敏反应。结论控制吐温80质量,并将浓度限定在0.25%及以下,可在保证药物增溶效果的同时避免过敏反应的发生。在进行豚鼠全身主动过敏试验时,以豚鼠反应症状为主要指标,血浆IgE、组胺升高为辅助指标综合判定致敏性,可在一定程度上提高试验的灵敏性。

慢性乙型肝炎患者中医证型特点及分布差异

目的:探讨慢性乙型肝炎患者中医证型特点及分布差异.方法:结合慢性乙型肝炎中医证型研究的文献,对126例西苑医院的慢性乙型肝炎患者症状体征、中医证型分布差异及特点进行前瞻性调查.结果:慢性乙型肝炎患者中医证型分布规律以肝郁脾虚型为主,湿热型次之,肝肾阴虚型又次之,瘀血阻络型所占比例较肝肾阴虚型小,脾肾阳虚型最为少见,其中,湿热与气阴亏虚为各证型的主要兼夹因素,暗红舌、红舌和腻苔是慢性乙型肝炎患者的主要舌象.患者的症状体征(胁痛、口苦、腹胀、食欲低下、舌苔腻等)积分在各证型中分布有显著性差异(P<0.05).ALT、AST均以湿热中阻型为最高,与其他证型相比,差异有显著性(ALT:75.81±39.93vs48.13±26.02,50.42±31.69,59.09±21.50,P<0.05;AST:82.89±38.37vs42.62±21.43,51.88±36.11,68.93±24.57,P<0.05).结论:湿热因素贯穿于慢性乙肝患者的不同阶段,是该病长期存在的基本矛盾,而正气亏虚,正是湿热毒邪侵扰的内在基础,该病的病机为"邪侵而正虚,正虚而邪恋"。

聚山梨酯80及其配制的鱼腥草注射液致Beagle犬类过敏反应实验研究

目的评价多种聚山梨酯80及其配制的鱼腥草注射液静脉给药对Beagle犬的致敏性。方法 Beagle犬是类过敏反应的敏感动物,以动物反应症状与血浆组胺升高为判断标准,综合判定类过敏反应。Beagle犬随机分为18组,每组3只,分别静脉注射不同厂家0.25%、0.10%、0.05%浓度的聚山梨酯80灭菌水溶液,或分别含0.25%、0.30%不同厂家聚山梨酯80的鱼腥草注射液。给药体积10mL/kg,前肢静脉恒速注射(速度5mL/min)。观察给药前至给药后24h每只犬的变化,记录症状出现、消失时间,并根据反应症状的轻重判定级别。给药前及停药后10min取血,ELISA方法检测血浆组胺含量,并结合反应症状级别,综合判定致敏性。结果各厂家、各浓度(0.05%、0.10%、0.25%)聚山梨酯80灭菌液以及各组鱼腥草注射液,均未导致Beagle犬出现典型的类过敏反应症状及血浆组胺升高1倍以上。综合判定,各组受试液均未诱发Beagle犬出现典型的类过敏反应。结论控制聚山梨酯80质量,并将使用浓度限定在0.30%或0.25%以下,可以在保证药物增溶效果的同时避免类过敏反应的发生。

中医证候模型拟临床研究概念的形成及应用

通过近年来的探索性研究,结合有关中医证候模型的文献研究,分析现有中医证候模型研究中存在的问题,提出中医证候模型拟临床研究的概念,并对其可能的应用价值进行评述。提倡用临床实验方法研究中医证候的科学规律及其演化过程,并对病证结合模型动物进行中药干预,评价药物的对证候模型的作用及内在本质,构建符合中医药作用的特点药物评价技术及研究平台。

双参宁心方血清药物化学和抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的实验研究

目的研究双参宁心方(SSNX)主要有效成分及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法利用血药指纹图谱检测来源于SSNX的血中成分,并利用体外心肌细胞缺氧/复氧损伤实验进行验证。结果给药后血清样本中,共检测到15个来源于SSNX的原型成分,其中确定了人参皂苷Rg1、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱4个化学成分。在对心肌细胞缺氧/复氧损伤的实验中,人参皂苷Rg1、脱氢紫堇碱能抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤导致的乳酰脱氢酶升高(P<0.05),丹酚酸B、延胡索乙素则能显著抑制乳酸脱氢酶的升高(P<0.01),对心肌细胞具有保护作用。结论提示人参皂苷Rg1、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱可能是SSNX抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的有效物质基础,可用于复方药代动力学的指标检测。

五子衍宗丸对少精子症模型大鼠的实验研究

目的研究五子衍宗丸对腺嘌呤所致的少精子症模型大鼠的影响,探讨其改善男性少精子症的作用机理。方法 72只成年雄性大鼠随机分为6组:空白对照组,模型组,阳性药组及五子衍宗丸大、中、小剂量组。以腺嘌呤溶液(250 mg/kg)每日灌胃,连续4周,造成大鼠少精子症模型。同日各受试药组按剂量灌胃给药,连续4周。取附睾尾作精子计数、形态学观察及精浆中性α-糖苷酶测定;取血测肝、肾功能及生殖激素;肝、肾及生殖器官称重并计算脏器指数及病理形态学观察。结果与模型组比较,五子衍宗丸各剂量组精子数量和活动率显著升高,畸形率显著下降,并呈现量效关系;精浆中性α-糖苷酶显著升高;大、中剂量组肝、肾功能有显著改善;血清睾酮显著升高;附睾指数及前列腺+精囊指数显著增加。形态学观察显示:五子衍宗丸各剂量组肾脏病变明显改善。结论 五子衍宗丸对腺嘌呤诱发的少精子症模型大鼠有明显的改善作用。

降糖消脂片对转基因小鼠降糖降脂作用的实验研究

目的建立糖尿病肥胖小鼠模型,观察降糖消脂片对其血糖、血脂等指标的影响。方法采用KK-Ay转基因小鼠,高脂饲料喂养,造成糖尿病肥胖小鼠模型。对照组为同龄C57小鼠,成模的KK-Ay小鼠分为:模型组、吡格咧酮组(8mg/kg)、降糖消脂片大剂量组(简称降糖消脂大组,10g/kg)、降糖消脂片中剂量组(简称降糖消脂中组,5g/kg)、降糖消脂片小剂量组(简称降糖消脂小组,2.5g/kg),每组11只。灌胃给药8周。每周称体重及摄食量,隔周测血糖(FBG)。药后8周测FBG、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、胰岛素(INS)、瘦素(Lep);取肝脏、脂肪称重,计算其脏器指数;并对肝脏的脂肪变性进行分级、计数胰岛数目及脂肪细胞数。结果与模型组比较,降糖消脂大、中、小组体重明显减轻、摄食量明显下降(P<0.05,P<0.01);降糖消脂大组从第6周开始,FBG明显下降(P<0.01);连续灌胃给药8周后,降糖消脂大、中、小组的TG、INS明显下降(P<0.05,P<0.01);降糖消脂大组Lep有所下降(P<0.05);降糖消脂大、中、小组肝脏和脂肪指数明显降低、胰岛数目明显增多(P<0.05,P<0.01);降糖消脂大、中组的脂肪细胞数目明显减少(P<0.05,P<0.01);降糖消脂大组肝脏的脂肪变性明显改善(P<0.05)。结论降糖消脂片对KK-Ay糖尿病肥胖小鼠有明显的降糖、降脂作用。

腺嘌呤致大鼠少精子症模型的实验研究

目的:探讨腺嘌呤致大鼠少精子症模型的最佳剂量和造模时间点。方法:用0.5%羧甲基纤维素钠溶液,将腺嘌呤按0、20、25、30、35mg/ml浓度配制,75只大鼠按体重随机分为5组(0、200、250、300、350mg/kg),每组15只,按1ml/100g灌胃,1次/日。造模10d、20d、30d各处死一批,共3批。观察大鼠一般状态,取附睾尾作精子计数及形态学观察,取血测肝、肾功能及生殖激素,称量肝、肾及生殖器官湿重并计算脏器指数,切片进行病理形态学观察。结果:各模型组相继出现不同程度的肾阳虚体征;尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)第10d开始明显升高;20d开始血清睾酮明显下降;随着造模时间的延长和剂量的增加,精子密度和活力出现不同程度的降低,畸形率上升,并呈一定的时效和量效关系。肝、肾指数明显升高,生殖器官指数明显降低;造模30d时,多数模型组睾丸内生精细胞和附睾精子数量减少。结论:腺嘌呤致大鼠少精子症模型的最佳剂量为250mg/kg,造模时间点为20d。

缺血/再灌注过程中心肌细胞自噬研究进展

自噬是一种广泛存在于真核细胞中的生命现象,心肌细胞营养缺乏、缺血/再灌注损伤、心衰等均可诱发细胞自噬。缺血/再灌注过程中的心肌细胞自噬可以维持心肌细胞稳态、减少细胞缺失,但是自噬作用也可导致心肌细胞死亡。

AS炎性信号通路与中医药干预

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是血管内皮损伤导致的慢性炎症反应性血管疾病,该文就AS炎性信号通路相关因子,如细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、核因子-κB(NF-κB)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ),以及中医药在抗AS中调节这些炎性信号通路方面研究进展做一综述。

肉桂对滋肾丸抗实验性大鼠前列腺增生作用的影响

目的:研究肉桂对滋肾丸抗实验性大鼠前列腺增生作用的影响,探讨肉桂的引经作用。方法:采用丙酸睾酮所致大鼠前列腺增生模型,比较滋肾丸与知柏(滋肾丸去肉桂)对动物前列腺湿重、前列腺指数、血清和前列腺、睾丸组织中睾酮、雌二醇等性激素含量,以及前列腺组织病理学的影响。结果:肉桂能明显增加腺体面积,降低腺体腔面积,降低血清、前列腺组织睾酮、双氢睾酮的含量,升高血清和前列腺组织雌二醇/睾酮比值;但对前列腺湿重、前列腺指数没有影响。结论:肉桂能增强滋肾丸的抗前列腺增生作用,对性激素的作用是其增效的分子机制,初步表明肉桂具有引经的作用。

中医药防治糖尿病视网膜病变周细胞凋亡的研究进展

糖尿病视网膜病变是糖尿病患者常见的微血管并发症之一,视网膜周细胞凋亡是糖尿病视网膜病变早期的主要病理改变,近年来其机制研究进展明显。中药单味药、有效成分及复方均从多个途径如减轻高糖对视网膜周细胞的损害、抑制糖基化终末产物对周细胞的损伤、抑制视网膜微血管的炎性反应等方面发挥作用,对防治视网膜病变周细胞凋亡有着自身的优势。本文总结了近年来糖尿病视网膜病变周细胞凋亡的分子机制研究现状,并对中药在保护视网膜周细胞方面的作用进行综述,为深入的中药研究和防治糖尿病视网膜周细胞凋亡的创新药物开发提供科学依据。

中医药研究的问题与建议

长期以来中医药工作受到党和国家的高度重视,中医药事业有了较大的发展。但在提高中医药学术水平,提高防病治病能力等方面仍不够理想。本文针对这一问题进行分析,并从15个方面进行了初步探讨提出建议,仅供参考。

单味中药及复方对实验性糖尿病视网膜病变防治作用的研究进展

糖尿病视网膜病变(DR)是一种常见的糖尿病微血管并发症,是成年人致盲的主要原因。近年来的研究表明,单味中药如葛根、姜黄、枸杞、银杏叶和丹参等,中药复方如活血解毒方、菩人丹超微粉、通脉糖眼明胶囊、芪黄明目胶囊和复方血栓通等在防治DR变中有一定作用,其作用机制与保护视网膜毛细血管周细胞、内皮细胞的功能,减少相关分子如晚期糖基化终末产物形成及其受体的表达,抑制NF-κB的活化,抑制血管内皮细胞生长因子的表达,缓解线粒体氧化应激,抑制凋亡基因及蛋白表达,保护视网膜神经细胞等有关。本文就近年来单味中药及复方对实验性DR的研究进展进行归纳,以期对中药防治DR病变及创新药物研究提供参考。

安特逍胶囊对Beagle犬39周重复给药毒性实验研究

目的观察连续灌胃给予安特逍胶囊对Beagle犬产生的毒性作用。方法 Beagle犬48只,分为安特逍胶囊120、320、800 mg·kg^(-1)剂量组和溶媒对照组,分别灌胃给予相应药物或溶媒,每天1次,连续39周,检查其一般体征、体重、心电图、血液学、血清生化学、脏器系数、组织病理学等指标。结果安特逍胶囊给药可引起动物呕吐、流涎、稀便等症状;800 mg·kg^(-1)剂量可导致动物体重下降(P <0.05);320和800 mg·kg^(-1)剂量可引起血清TP、ALB和GLOB等指标发生变化(P <0.05);组织病理学检查未见与药物相关的病变。结论灌胃给予安特逍胶囊320和800 mg·kg^(-1)剂量对Beagle犬具有一定胃肠道毒性。

栀子苷对缺氧/复氧小胶质细胞TLR4通路的影响

目的研究缺氧/复氧对原代培养的小胶质细胞TLR4受体及其通路中MyD88、NF-κBp65、p-ERK1/2、p-IκBα和p38的影响和不同浓度栀子苷的干预作用,以揭示栀子苷治疗脑缺血的分子生物学机制。方法原代培养小胶质细胞,采用缺氧/复氧的方式制备模型,用栀子苷125、250和500μmol.L-1 3个浓度梯度进行干预,用逆转录聚合酶链反应检测小胶质细胞TLR4 mRNA的表达,Western blot检测TLR4、p-IκBα、p38、p-ERK1/2蛋白,免疫荧光双染观察MyD88和NF-κB;结果缺氧/复氧激活了TLR4通路,并通过MyD88依赖途径激活了下游蛋白MyD88、NF-κBp65、p-ERK1/2、p-IκBα和p38;栀子苷250和500μmol.L-1组抑制了通路蛋白的活性;结论缺氧/复氧使TLR4通路蛋白磷酸化激活。栀子苷通过对TLR4通路蛋白的抑制发挥抗炎效应,促进脑缺血的恢复。

痰瘀互结证冠心病小型猪模型的建立

目的利用高脂喂养结合冠脉球囊损伤在小型猪体内建立病证结合冠心病痰瘀互结模型。方法12只小型猪随机分为对照组和模型组,每组6只,分别用普通饲料和高脂饲料喂养2周,采用介入技术球囊损伤左冠状动脉前降支(LAD),模型组继续高脂饲料喂养8周,制备小型猪冠心病模型。测定动物的体重指数(BMI)、血脂水平、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、体表心电图(BS-ECG)、冠状动脉造影及病理学指标,评价模型的建立和病理生理特点。结果模型组BMI、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、hs-CRP均明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);BS-ECG显示模型组心肌缺血程度(∑-ST)及心肌缺血范围(N-ST)均明显高于对照组(P<0.05,P<0.01);冠脉造影显示LAD管腔狭窄,管腔丧失明显,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);弹力纤维EVG染色显示模型组管腔明显狭窄,内膜增生,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论高脂饲料喂养结合冠脉球囊拉伤在小型猪体内可以成功建立病证结合的痰瘀互结证冠心病模型。

正交试验法比较女贞子中齐墩果酸与特女贞苷的乙醇提取工艺

目的通过正交试验法比较女贞子药材的乙醇提取工艺。方法建立HPLC法测定女贞子药材中齐墩果酸和特女贞苷含量的方法。采用L9(34)正交试验设计安排实验,分别以齐墩果酸和特女贞苷2种指标成分对正交试验结果进行分析。结果以齐墩果酸和特女贞苷为指标成分筛选出的女贞子提取工艺为以6倍量75%乙醇提取3次,每次2h。结论所得到的最佳醇提工艺可以反映女贞子两种成分的综合提取效果。

鱼腥草蒸馏液与3种增溶剂配伍后对Beagle犬的致敏性

目的:比较聚山梨酯-80(吐温-80)、泊洛沙姆188和羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)3种增溶剂对Beagle犬的致敏性。方法:3种增溶剂分别与鱼腥草蒸馏液配伍,采用主动全身过敏试验的方法对Beagle犬静脉给药,观察给药后犬的过敏反应、体温变化、心电图变化以及血常规、肝肾功、血清组胺和总IgE的变化情况。实验同时设鱼腥草蒸馏液单独给药对照组。结果:1%吐温-80组的犬给药后均出现3级以上过敏反应,伴有心率加快,血清组胺水平明显升高。其余3组犬均未出现明显不良反应,且给药前后血清组胺水平没有明显变化。结论:泊洛沙姆188和HP-β-CD与鱼腥草蒸馏液配伍对Beagle犬的致敏性明显低于吐温-80。