脂肪细胞形态和排布变化与血管网络走行分布的相关性观察——与血瘀症的可能关系探讨

目的:研究通过对雄性大鼠背部皮下组织内脂肪组织和血管网络分布的比较观察,探寻脂肪细胞体积和数量对血管网络空间的影响。方法:实验采用Wistar雄性成年大鼠5只,动物背部体表剃毛,剥取皮肤,做铺片固定,1%甲苯胺兰染色,显微镜观察和拍照。结果:在皮下组织内,脂肪细胞形态随血管拓扑结构变化而变化,接近或贴近血管的脂肪细胞的形状改变有规则,沿血管走行排列成行,构成血管穿行的隧道;在血管分叉处,脂肪细胞又恢复为球形;远离血管的脂肪细胞彼此排列无序,并多为球形。结论:脂肪细胞具有围绕血管形成动态空间或通道,随血管拓扑结构变化而变化的特性。

大鼠前脂肪细胞的原代培养分化

目的 建立一种简便的大鼠前脂肪细胞的原代培养方法.方法 无菌取成年Wistar大鼠的腹股沟纯脂肪颗粒,采用酶消化法进行原代培养.在倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况,以油红O脂肪染色法进行原代培养细胞的鉴定.结果 培养细胞的形态学观察显示,脂肪细胞贴壁后初为类圆形,3 d后渐成梭形;7～8 d细胞增殖明显,形状由多角梭形变为椭圆形,并开始积聚脂肪颗粒;10 d后细胞呈椭圆形、圆形,胞内积聚大量脂肪颗粒.培养10 d的细胞经油红O染色后于普通光镜下观察,见细胞内出现红染颗粒,可以鉴定细胞分化为前脂肪细胞.结论 成功建立了大鼠前脂肪细胞的原代培养方法,为脂肪内分泌学研究提供了制备适用细胞模型的手段.

新鲜组织肥大细胞快速染色方法的探讨与应用

目的探讨如何在组织内更好地显示肥大细胞。方法取大鼠后肢皮肤组织,经恒冷箱切片机切片,然后将组织切片直接入1%甲苯胺蓝染液进行染色。结果在新鲜组织切片内可见到较多充满蓝紫色颗粒的肥大细胞和它们分泌的蓝紫色颗粒。结论新鲜组织直接进行甲苯胺蓝染色可显示较多的肥大细胞。

色甘酸钠穴位注射对穴区肥大细胞数、脱颗粒率以及电针镇痛效应的影响

目的:观察色甘酸钠(SCG)穴区注射后大鼠穴区肥大细胞(MC)及痛阈值变化。方法:大鼠左足三里穴注射SCG后再给予电针刺激,比较各组大鼠实验前后痛阈值;穴区组织做冰冻切片、组化染色,观察穴区MC形态学改变。结果:SCG+电针组大鼠痛阈差值、MC数均显著低于电针组、正常组;SCG+电针组大鼠MC脱颗粒率显著低于电针组。结论:SCG具有抑制电针促穴区MC数增多和脱颗粒的作用,并使MC参与的电针镇痛效应减弱。

经穴组织肥大细胞对不同染色剂的反应

目的:探讨经穴组织肥大细胞对不同染色剂的反应。方法:采用SD大白鼠6只,分为甲苯胺蓝染色组和美蓝染色组,取包含"大椎"和"后三里"穴的皮肤组织块进行冰冻切片和染色观察。结果:切片组织经美蓝染色后,肥大细胞颜色浅淡清晰;而甲苯胺蓝染色肥大细胞颜色深,并组织背景染色也较深,不容易分色,往往由于背景分色时间长,使肥大细胞的染色消失。结论:皮肤组织内肥大细胞对不同染色剂着色的程度存在差异。

大鼠组织中乙酰胆碱酯酶阳性神经与肥大细胞接触

目的：观察正常大鼠穴区组织内肥大细胞与血管壁乙酰胆碱酯酶阳性反应神经的接触联系。方法：正常成年Wistar大鼠10只,以大椎穴（背部正中第7颈椎与第1胸椎间）和足三里穴（膝关节后外侧,腓骨小头下约5mm）为中心,切取约1.5cm2组织块,速冻于恒冷箱内,切片经乙酰胆碱酯酶染色和甲苯胺蓝复染色,显示皮肤、皮下组织和肌肉组织内沿血管分布的肥大细胞与血管壁乙酰胆碱酯酶阳性反应神经。结果：在穴区组织内,从真皮至皮下组织、肌肉组织的肥大细胞多聚集在血管附近,或沿血管壁乙酰胆碱酯酶阳性反应神经分布,并形成点接触或面接触。结论：采用2种染色方法观察到肥大细胞与血管壁中乙酰胆碱酯酶阳性反应神经形成紧密接触,这可能是肥大细胞与乙酰胆碱酯酶阳性反应神经发生功能联系的形态学基础。

皮部脂肪组织内分泌活动与经络现象相关性的研究——兔前脂肪细胞的原代培养

目的:原代培养家兔前脂肪细胞并诱导其分化为成熟脂肪细胞,为针灸血清经络实验建立活细胞模型。方法:选用兔腹股沟处皮下脂肪组织,采用原代消化法培养,通过对培养细胞进行形态学观察及用油红O脂肪染色法进行染色以鉴定。结果:形态学观察及油红O脂肪染色法测定证明是脂肪细胞,针灸细胞分子机制和经络现象研究的活细胞模型成功。结论:该实验建立的体外培养兔脂肪细胞的结果,可为研究脂肪组织内分泌活动与经络现象的相关性提供模型基础。

大鼠胃腧穴注射单核细胞趋化蛋白抗体对肥大细胞分布及功能的影响

目的观察大鼠胃腧穴单核细胞趋化蛋白抗体(Anti-MCP-1)注射及电针后穴区组织内肥大细胞(MCs)分布及功能变化,探究MCP-1与电针对大鼠穴区MCs活性影响的关系。方法将动物随机均分为对照组、电针组、抗体组、联合组,10只/组;电针组大鼠左胃腧电针25 min,抗体组左胃腧注射Anti-MCP-1,联合组先给予左胃腧Anti-MCP-1注射再电针25 min。取各组穴区组织,检测并比较穴区MCP-1含量差异;同时对组织切片进行乙酰胆碱酯酶组化染色加甲苯胺蓝复染,观察各组穴区组织内MCs的分布,比较各组MCs数量和脱颗粒的差异。结果联合组、抗体组胃腧穴区MCP-1含量、MCs数均显著低于对照组和电针组(P<0.05);抗体组穴区MCs的脱颗粒率显著低于电针组(P<0.05)。结论 Anti-MCP-1穴区注射、电针后,穴区MCs数量和脱颗粒均显著减少,穴区MCs数与穴区MCP-1含量成正相关,MCP-1在电针促进MCs向穴区迁移、募集过程中有促进作用。

大鼠穴区注射干细胞因子抗体对肥大细胞数量和脱颗粒的影响

目的:观察穴位干细胞因子(SCF)抗体注射及电针后大鼠穴区组织内肥大细胞(MCs)分布及功能变化,探讨电针过程中SCF对大鼠穴区MCs活性的影响。方法:将30只Wistar大鼠随机分为正常组、电针组、注射抗体+电针组,每组10只。电针组选取左侧"胃俞""足三里"穴给予电针,强度0.1 mA,频率2 Hz/15 Hz,针刺25 min。注射抗体+电针组先给予左侧"胃俞""足三里"穴1∶200 SCF抗体稀释液0.1 mL封闭,然后进行电针刺激25 min,其它参数同电针组。乙酰胆碱酯酶组化染色并甲苯胺兰复染法观察各穴区组织内MCs的分布,比较各组"胃俞""足三里"穴区内MCs总量和脱颗粒的差异。结果:与正常组比较,电针组"胃俞"穴区、"足三里"穴区组织MCs总数均升高,注射抗体+电针组两穴区MCs总数均下降,注射抗体+电针组"胃俞""足三里"穴MCs总数与电针组、正常组的差异有统计学意义(均P<0.05)。与正常组比较,电针组、注射抗体+电针组"胃俞""足三里"穴MCs脱颗粒率均显著升高(均P<0.05),电针组和注射抗体+电针组两穴区MCs脱颗粒率的差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:SCF抗体穴区注射及电针后,穴区MCs显著减少,SCF是电针过程中促进MCs向穴区迁移、募集的重要因子。