从中药营养物质活性探讨中医药发展

现代中药学研究常将中药药效成分定义为次生代谢产物,对相关化学成分的提取分离、活性及质量标准研究较多,在制药过程中蛋白质、糖类、酯类等多被认为是杂质,这是受到了天然药物化学研究思路的影响。随着人类对中医药基础研究的深入,越来越多的研究发现营养成分往往也具有一定的活性。仍将目光聚焦于中药次生代谢产物的研究思路是否有局限,蛋白质、糖类、酯类等是否也应纳入活性研究及质量控制的范畴?通过整理中药中蛋白质、油脂等各类营养物质成分的研究现状,梳理中药部分营养物质具有的药理、生理活性,反思中医药现代研究方面的发展路径,对中医药营养成分在质量控制、研究方向及医养领域发展提出一些建议,对中医药在中药营养活性方面进行初步探究。

基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物研究

目的:建立基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物(Q-marker)研究方法,为其药效物质基础及质量控制研究提供依据。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC)建立10批肉苁蓉指纹图谱。利用H2O2建立细胞氧化损伤模型,以活性氧自由基半数抑制率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量为药效指标测定肉苁蓉抗氧化能力。通过主成分分析、皮尔逊相关性分析和偏最小二乘法-回归分析共同构建谱效关系,并对筛选出的活性成分进行药效验证。结果:建立了肉苁蓉的UPLC指纹图谱,共确定了17个共有峰。基于谱效关联分析筛选出9个成分,活性成分验证结果显示京尼平苷酸、8-表马钱子酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、管花苷A具有抗氧化活性且呈浓度依赖性。结论:基于谱效关系探讨了肉苁蓉的Q-marker,为其药效物质基础及质量标准提升提供参考。

保健保本草菁萃安全性评价及对小鼠免疫功能影响研究

目的:研究保健保本草菁萃作为保健食品使用的安全性及对小鼠免疫功能的影响。方法:采用小鼠急性经口毒性实验、Ames实验和大鼠30 d喂养实验对受试物进行毒理学研究和评价;采用小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验、抗体生成细胞检测实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和乳酸脱氢酶活性测定实验,从细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能及自然杀伤(NK)细胞活性4个方面综合评价受试物对小鼠免疫功能的影响。结果:受试物急性经口剂量在38.83 g·kg^(–1)·d^(–1)时对雌、雄小鼠没有毒性;加与不加大鼠肝匀浆S9混合液时,Ames实验结果均为阴性,未见致突变作用;30 d喂养实验中,大鼠生长发育良好,血液学、血液生化学、组织学检查指标与主要脏器系数与对照组相比差异均无统计学意义;受试物能促进刀豆蛋白A(ConA)诱导的淋巴细胞增殖,具有调节细胞免疫功能;能提高NK细胞活性,具有调节非特异性免疫功能。结论:保健保本草菁萃具有较好的安全性,可以调节小鼠免疫功能,因而可作为一种功能性食品补充剂。

酸枣仁对失眠大鼠HPA轴功能的干预作用研究

目的:研究酸枣仁对失眠模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能的影响。方法:连续3 d采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)复制失眠大鼠模型,模型复制同期给药。给药组分为酸枣仁乙醇提物高剂量组(20 g·kg^(–1)·d^(–1))和低剂量组(5 g·kg^(–1)·d^(–1))。给药10 d后,观察各组大鼠行为;苏木精-伊红(HE)染色评价HPA轴相关组织的病理改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清及HPA轴组织中的促肾上皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)水平,以及血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:PCPA致失眠大鼠模型复制成功,给药酸枣仁提取物可改善失眠引起的大鼠行为异常,缓解模型大鼠HPA轴组织病理改变,抑制模型大鼠血清及HPA轴组织中CRH、ACTH、CORT水平升高,促进模型大鼠血清IL-1β、TNF-α表达量的回调。结论:酸枣仁可通过调节HPA轴功能达到干预失眠症发生与发展的作用。

不同品种来源枸杞子多糖及甜菜碱含量测定和比较分析

目的:测定并比较2种采收时间和干燥方式下不同品种来源枸杞子中多糖及甜菜碱含量差异,为枸杞子质量评价和适宜药用或食用品种的选择提供参考。方法:采用苯酚-硫酸法及雷氏铵盐法分别测定枸杞子样品中的多糖及甜菜碱含量,并采用SPSS 26.0对数据进行统计分析。结果:不同品种枸杞子多糖含量差异有统计学意义,但不同采收时间和干燥方式处理的品种间差异规律不同,其中7月采收、烘干方式加工的“宁杞10号”多糖含量显著低于其他品种,而“宁杞5号”及“宁杞4号”中多糖含量最高,食用和药用效果较佳。2个采收时间的枸杞子多糖及甜菜碱含量均存在一定差异,但仅“宁杞10号”多糖含量差异有统计学意义,“宁杞1号”“宁杞4号”的甜菜碱含量差异有统计学意义,均以6月20日采收含量较高。不同品种枸杞子采用2种干燥方式,多糖及甜菜碱含量差异均有统计学意义,其中烘干处理“宁杞1号”“宁杞4号”多糖含量较高,“宁杞5号”“宁杞10号”甜菜碱含量较高,而晒干处理仅“宁杞0909号”甜菜碱含量较高。结论:不同品种宁夏枸杞子在2种采收时间和干燥方式下多糖及甜菜碱含量均存在一定差异,研究结果可为枸杞子的质量控制,药食同源适宜品种、采收期及加工方式的选择提供参考。

肉苁蓉延缓衰老功能因子及作用机制研究

目的:基于网络药理学及模式生物秀丽隐杆线虫(以下简称线虫)体内实验探究药食同源物质肉苁蓉延缓衰老的功能因子与作用机制,为其合理开发利用提供实验依据。方法:选取肉苁蓉中主要活性成分为研究对象,运用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)、SwissTargetPrediction、GeneCards、OMIM等数据库预测肉苁蓉发挥功效的潜在靶点,将其输入到STRING网络分析平台,获得活性成分与疾病靶点的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,从而筛选出核心靶点,并借助京都基因与基因组百科全书(KEGG)平台对作用通路进行预测分析,通过Cytoscape软件构建药物-活性成分-靶点-通路网络。将线虫分为对照组及不同质量浓度给药组,采用直接观察法测定线虫寿命、繁殖能力、运动能力;采用试剂盒方法测定线虫体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定与寿命及应激能力改变相关的基因表达。结果:筛选得到的肉苁蓉潜在功能因子可作用于75个衰老相关靶点,经拓扑学分析筛选出热休克蛋白90α(HSP90AA1)、雌激素受体α(ESR1)、GTP酶(HRAS)、凝血酶原(F2)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、己糖激酶-2(HK2)、蔗糖异麦芽糖酶(SI)、麦芽糖酶-葡糖淀粉酶(MGAM)8个核心靶点,KEGG分析显示肉苁蓉可干预雌激素信号通路、癌症信号通路、促性腺激素释放素信号通路和胰岛素信号通路等27条通路,发挥延缓衰老作用。肉苁蓉能够明显延长线虫的平均寿命,提高线虫的抗氧化应激能力,增强SOD、CAT和GSH-Px的活性,降低ROS和MDA含量,下调胰岛素受体样基因daf-2及age-1表达水平,上调daf-16及其下游靶基因(sod-3、mtl-1、gst-4、ctl-1和ctl-2)表达水平,同时激活skn-1及热休克相关基因(hsf-1、hsp-16.1和hsp-16.2)的表达。结论:基于网络药理学阐释了肉苁蓉延缓衰老可能的作用机制,进一步实验证明了肉苁蓉可以延长线虫的寿命、增强线虫抵抗环境应激能力,其作用机制可能与抑制胰岛素信号通路并激活daf-16下游转录因子及热休克相关基因,从而提高线虫抗氧化应激能力有关。